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Revista Cubana de Plantas Medicinales

versão On-line ISSN 1028-4796

Rev Cubana Plant Med v.2001 n.1 Ciudad de la Habana jan.-abr. 2001

 

Facultad de Medicina Dr. “Salvador Allende”

Actividad antiespasmódica de extractos de Piper auritum en intestino

Dra. Ana Julia Gracia Milián,1 Dra. María del Carmen Martínez Torres2 y Dr. Francisco Morón Rodríguez3

RESUMEN

Para validar la actividad espasmolítica del P. auritum H.B.K. en el intestino, se prepararon los extractos al 45 y 80 % y se evaluaron en el modelo de motilidad espontánea de yeyuno aislado de conejo a las concentraciones de 0,48; 0,7275 y 0,97 mg/mL para el extracto al 45 % y 0,0699;0,1398 y 0,2097 mg/mL para el de 80 %, frente a diferentes espasmógenos (BaCl 200, acetilcolina 0,06 e histamina 0,05 mg/10-3/mL) en íleon de curiel con valores similares. La papaverina se empleó con 0,0033; 0,0066 y 0,013 mg/mL. Un modelo in vivo para medir la actividad sobre el tránsito intestinal con la dosis de 500, 1 000 y 1 500 para el extracto al 45 %, de 10, 40 y 80 con papaverina y 0,5, 1 y 1,5 mg/mL para la atropina. Con los resultados se puede plantear que la planta tiene acción espasmolítica en el intestino.

DeCS: EXTRACTOS VEGETALES/uso terapéutico; PLANTAS MEDICINALES; MEDICINA HERBARIA, INTESTINOS; PARASIMPATOLITICOS/uso terapéutico.

SUMMARY

To validate the spasmolitic activity of P. auritum H.B.K. in the intestine, extracts at 45 % and 80 % were prepared and evaluated in a jejunum spontaneous motility model isolated from rabbit at concentrations of 0,48; 0,7275 and 0,97 mg/mL for the extract 45 %, and of 0,0699; 0,01398 and 0,2097 mg/mL for that at 80 % against different spasmogens (BaCl 200, acetylcholine 0,06 and histamine 0,05 mg/10-3/mL) in guinea pig ileum with similar values. Papaverine was used with concentrations of 0,0033; 0,0066 and 0,013 mg/mL. We used an in vivo model to measure the activity on intestinal transit at doses of 500, 1000 and 1 500 for the extract 45 %, of 10, 40 and 80 with papaverine and of 0,5; 1 and 1,5 mg/mL for atropine. With the results obtained it is possible to state that this plant has a spasmolitic action on the intestine.

Subject headings: PLANT EXTRACTS/therapeutic use; PLANTS, MEDICINAL; MEDICINE, HERBAL; INTESTINES; PARASYMPATHOLYTICS/therapeutic use.

El Piper auritum H.B.K. es utilizado como antiespasmódico, diaforético y como remedio en las malas digestiones.1,2 Se ha demostrado actividad antimicrobiana, hipotensora y espasmogénica en íleon de cobayo aislado.3,4 Un extracto acuoso redujo la amplitud y frecuencia de la actividad espontánea del íleon aislado de rata según Sánchez Agramonte. El aceite esencial al 1 % demostró efecto espasmolítico, al ser evaluado por el equipo por lo que se decidió validar la actividad espasmolítica del estracto fluido al 45 y 80 % del Piper auritum sobre la motilidad espontánea y frente a diferentes espasmógenos en intestino aislado y compararlo con la papaverina y determinar la actividad en el tránsito intestinal del extracto al 45 % de Piper auritum en ratones in vivo.

MÉTODOS

Los extractos fueron elaborados y caracterizados según las normas5 en LABIOFAM, se utilizó como menstruo el etanol al 45 y 80 %. La planta fue colectada en la mañana e identificada por el Dr. Víctor Fuentes y conservada con el # 4519.

Modelos experimentales

Yeyuno aislado de conejo. Se utilizaron conejos Nueva Zelandia, procedentes del CENPALAB. Privados de alimentos las primeras 24 h, se sacrificaron y se abrió el abdomen. Se seccionó el intestino y se extrajo un segmento de yeyuno depositándolo en una placa de Petri y después en un baño para órgano aislado de 10 mL de solución Tyrode a 37 grados 6 y burbujeada con una mezcla de 95 % de oxígeno y 5 % de dióxido de carbono.7 Las variables fueron amplitud de la contracción y frecuencia. Con n = 12.

Concentraciones de las sustancias evaluadas en yeyuno aislado de conejo. Se trabajó con 3 concentraciones de las sustancias a evaluar para el extracto fluido de Piper auritum 45 % fueron (0,4800; 0,7275; 0,9700 mg/mL), para el extracto de la planta al 80 % fueron de (0,0699; 0,1398; 0,2097 mg/mL) y por último la papaverina con concentraciones de (0,0033; 0,0066; 0,0130 mg/mL).

Íleon aislado de curiel. Se realizó con curieles albinos Dunkin-Hartley de ambos sexos. Para el sacrificio, extracción y preparación de los segmentos se procedió de igual forma que en el modelo anterior con solución Tyrode modificada.8 Las concentraciones fijas del agonista se evaluaron frente a 3 de los antagonistas. La variable analizada fue la amplitud. La muestra fue de 12.

Las dosis de los agonistas en íleon aislado de curiel fueron de 200; 0,0665; 10-3 mL 0,05 mg x 10-3 mL (Cloruro de Bario, Acetilcolina e Histamina respectivamente).

Para los antagonistas en íleon aislado de curiel las dosis utilizadas fueron 0,4800; 0,7275 y 0,97 para el extracto fluido 45 % y de 0,0033; 0,0066 y 0,0130 mg/mL para la papaverina.

Actividad sobre el tránsito intestinal en ratones. Modelo in vivo con ratones OF-1, privados de alimentos 6 h antes del experimento. Distribuidos en 3 grupos de 10 animales, a los que se les administró por vía intramuscular la sustancia a evaluar. Con n=10.

Las concentraciones de las sustancias evaluadas en el mismo fueron de 500, 1000, 1500 mg x kg para el extracto fluido al 45 %, de 10, 40, 60 mg x kg para la papaverina y de 0,5, 1 y 1,5 para la atropina.

Un grupo control de 20 animales fueron tratados con agua destilada con el volumen de la mayor dosis. A los 30 min se administró carbón activado al 10 %, por vía oral a todos los animales. Pasados 30 min se sacrificaron y se extrajo el intestino delgado. Se midió desde el píloro hasta donde se encontró más distal el carbón, calculándose en por ciento el avance de este con relación al largo total del intestino.9 Análisis estadístico.

Se le aplicó un análisis de varianza y cuando en este se obtuvo una F significativa se realizó una prueba a posteriori. Todo el procesamiento se realizó con el programa MICROSTAT. La DE50 y el cálculo de la actividad relativa fue determinado por el método de Litchfield y Wilcoxon.

 

RESULTADOS

Efecto sobre la motilidad espontánea del yeyuno aislado de conejo. Con el extracto al 45 y 80 % fue significativa (p < 0,05) la disminución de la amplitud y similar respuesta se obtuvo con la papaverina (tabla 1). Se le calculó la DE50 (tabla 2). La frecuencia mostró una disminución significativa (p < 0,05) respecto al control (tabla 3). El extracto fluido al 45 % mostró el 0,0219 % de la Actividad Relativa y al 80 % tuvo el 2,781 % de dicha actividad.

Tabla 1. Efecto del Piper auritum y papaverina sobre la motilidad espontánea (amplitud) en yeyuno aislado de conejo

 

Sustancia a evaluar
Basal 1
C1
C2
C3
Extracto fluido 45 %91,761,261,4

45,29

+/-3,7+/-13,5+/-14,3+/-17,06
Extracto fluido 80 % 85,566,358,9 47,8
+/-6,9+/-12,8+/-17,5+/-17,7
Papaverina87,666,665,634,6
+/-2,12 +/-29,9+/-41,6+/-21,1

 

Tabla 2. Dosis que produce respuesta en el 50 % de los animales en yeyuno de conejo

Sustancia a evaluar Dosis estimada DE50 mg/mL
Extracto fluido 45 %1,770,025
Extracto fluido 80 % 0,22 0,03
Papaverina0,007  

 

Tabla 3. Efecto del Piper auritum sobre la motilidad espontánea (frecuencia) en yeyuno de conejo

Sustancia a evaluar Basal 1C1C2 C3
Extracto fluido 45 % 12,912,6 10,4 10,2
+/-1,6 +/-1,9 +/-0,9 +/-1,3
Extracto fluido 80 % 12,912,610,08 10,6
+/-1,8 +/-1,6+/-2,06+/-1,6
Papaverina 12,9 10,4 10,410,2
+/-1,6+/-0,9+/-0,9+/-1,3

Tabla 4. Efecto del Piper auritum (extracto fluido 45 %) sobre las concentraciones inducidas por espasmógenos en íleon de curiel

EspasmógenosBasal 1C1 C2C3
Cloruro de bario 93,148,148,3 29,4
+/-4,5 +/-26+/-19,3+/-22
Acetilcolina91,962 42,3 66,9
+/-5 +/-25+/-15+/-15,1
Histamina 95,851,136,951,1
+/-2,5+/-17,6+/-12,1+/-17,6

 

Tabla 5. Efecto de la papaverina sobre las contracciones inducidas por espasmógenos en íleon aislado de curiel

Espasmógenos Basal 1 C1C2 C3
Cloruro de bario 97,784,9 77,716,2
+/-1,07+/-8,4+/-8,4+/-5,3
Acetilcolina+/-2,5+/-5,1 +/-5,1+/-12,4
Histamina 96,9 78,6 55,0421,9
+/-2,9+/-19,6 +/-8,4+/-10,5

Tabla 6. Dosis estimada que produce respuesta en el 50 % de los animales para el Piper auritum y papaverina en íleon de curiel

Dosis que produce respuesta en la mitad de los animales
Extracto fluido 45 %
 
Sólidos totales
Aceite esencial
Papaverina
Cloruro de bario0,630,005 0,0065
Acetilcolina0,510,004 0,0061
Histamina0,48 0,00420,0069

 

Tabla 7. Efecto del Piper auritum (extracto fluido 45 %), papaverina, atropina sobre la actividad del tránsito intestinal en ratones

Sustancia a evaluar
B1
C1
C2
C3
Atropina 77,124944,5 38,9
+/-15,7+/-11,2 +/-10,2+/-10,7
Papaverina 77,1258,724,9 9,8
+/-15,7 +/-12,9+/-19,6 +/-16,6
Extracto fluido 45 % 56,243,7 23,4 15,5
+/-9,04+/-10,2+/-14,6+/-9,4

 

Tabla 8. Dosis capaz de producir respuestas en el 50 % de los animales en papaverina, atropina y Piper auritum (extracto fluido 45 %)

SustanciasDE 50 de los agonistas mg/mL
Papaverina 23,09
Atropina1,911
Piper auritum809,54

 

Efecto sobre la actividad del tránsito intestinal en ratones. Todos los tratamientos provocaron una disminución significativa y dosis dependiente (tabla7). Por lo que se le calculó la DE50 (tabla 8).

DISCUSIÓN

Los extractos fluidos del P. auritum disminuyen la motilidad espontánea, coincidiendo con Sánchez Agramonte y con el estudio del aceite al 1 %. De igual forma la papaverina

Conclusiones

  • Los extractos evaluados son antiespasmódicos en el músculo liso intestinal, similar a la papaverina.
  • El extracto al 45 % disminuyó el tránsito intestinal de igual forma que la atropina y la papaverina.

Recomendaciones

Determinar el modo de acción de la planta y completar el estudio toxicológico.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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  5. Cuba. Ministerio de Salud Pública. Normas ramales de medicamentos de origen vegetal. Tinturas y extractos fluidos. CNICM. La Habana, 1992.
  6. Sainz DF, Miyares C, García M. Técnicas de farmacología experimental. La Habana. Editorial Ciencia y Técnica, 1972: 131-34.
  7. Kawashima K, Yoshida N, Kodokama T. Pharmacological propierties of the novel antimuscarinic agen (SX-810). Arzei Forsch Drug Res 1986;36(1):6,936.
  8. Simonis AM, Aries EJ, Brocke JJ van den. Noncompetitive spasmolyties as antagonists of Ca induced smooth muscle contraccion. J Pharm Pharmacol 1970;23:107-9.
  9. Arbos J, Zegri A, López-Soriano FRJ, Argiles JMA. A simple method for determining the rate of gastrointestinal transit in the rat. Arch Physiol Biochim Biophys 1993;101:103-15.
  10. Bowman WC, Rand MJ. Farmacología bases bioquímicas y patológicas. Aplicaciones clínicas. 2 ed. Ciudad de La Habana. 1984;t1:924-27.
  11. Manzini S, Maggi CA, Meli A. System and organ selectivity of smooth muscle relaxants on in vitro spontaneously contracting preparations. Arch Int Pharmacodyn Ther 1984;270(1):50-60.

Recibido: 2 de junio de 1999. Aprobado: 3 de diciembre del 2000.
Dra. Ana Julia Gracia Milián. Facultad de Medicina Dr. “Salvador Allende”. Calle Buenos Aires s/n. Cerro. Ciudad de La Habana.

1 Doctora. Especialista de I Grado en Farmacología. Coordinadora Nacional del Programa para el Uso Racional de los Medicamentos. CDF.
2 Doctora. Especialista de I Grado en Farmacología. Profesora de la Facultad de Medicina “Salvador Allende”.
3 Doctor en Ciencias. Profesor Titular de Farmacología de la Facultad de Medicina “Salvador Allende”.

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