Laboratorio de Medicina Herbaria. Hospital Militar Central "Dr. Luís Díaz Soto".

Ácidos nucleicos en el ratón con mielosupresión por quimioterapia y tratado con Aloe vera L.

Lic. José de la Paz Naranjo,1 Lic. Lourdes Moreira Carrillo2 y Téc. Maribel Machin Lugones

Resumen

Con el objetivo de conocer el efecto del extracto acuoso inyectable Aloe vera sobre el contenido de ácidos nucleicos en sangre periférica del ratón con mielosupresión por quimioterapia fueron utilizados ratones Balb/c hembras de 18 g de peso, que habían recibido previamente una dosis subletal de ciclofosfamida. El tratamiento con el extracto vegetal en dosis de 0,18 mg/Kg se realizó por vía intramuscular una vez al día y durante 7 días. Las determinaciones se realizaron al inicio del ensayo, y a los 4 y 8 días de comenzada la administración del inyectable. Se encontró un aumento estadísticamente significativo del contenido de ácidos nucleicos totales en leucocitos de sangre periférica en los animales que recibieron el extracto a los 8 días de comenzado el tratamiento, cuando fue comparado con un grupo control que recibió solución de cloruro de sodio al 0,9 %. El nivel de significación se fijó en una p menor o igual que 0,05. Los resultados indicaron que el extracto acuoso inyectable Aloe vera pudiera estar protegiendo o favoreciendo la reparación y/o la síntesis de estas moléculas.

DeCS: ALOE/uso terapéutico; ACIDOS NUCLEICOS; CICLOFOSFAMIDA; RATONES CONSANGUINEOS BALB C.

Los datos acumulados por la radiobiología muestran una serie de cambios bioquímicos que ocurren en el organismo durante el período post-radiacional y que pueden ser utilizados para medir los daños producidos. Entre estos, la determinación de la concentración de ácidos nucleicos en leucocitos de sangre periférica, como dosimétrico fue propuesta como modelo en la década del 80 del pasado siglo cuando se demostró en animales de experimentación que existía una dependencia logarítmica entre la dosis de radiación absorbida por el organismo y la concentración de estas macromoléculas. Posteriormente varios han sido los trabajos que informan el empleo de esta variable con dichos fines.1

Es conocido el efecto del Aloe vera L. en la proliferación celular, como anti-genotóxico, anti-tumoral y antioxidante, y estudios recientes han demostrado su efecto hematopoyético positivo después de terapias cito-reductoras. Por lo anterior, fue propósito de la presente investigación, conocer el efecto del extracto acuoso inyectable Aloe b sobre el contenido de ácidos nucleicos en leucocitos de sangre periférica en ratones con mielosupresión por quimioterapia.2-4

Métodos

El extracto acuoso inyectable Aloe b® fue elaborado por el Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamento (CIDEM), a partir de hojas de Aloe vera L. El medicamento está registrado como antiviral con la patente 2239/1989. Se utilizaron en todo el experimento ratones hembras Balb/c de 18 g de peso, provenientes del Centro Nacional de Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB). El día de inicio del ensayo, los animales fueron inyectados por vía intraperitoneal con una dosis subletal de ciclofosfamida (Genoxal, Laboratorios Funk, Barcelona) de 200 mg/kg de peso corporal en agua para inyección libre de pirógeno (IMEFA, Cuba). Transcurridas 24 h, los ratones fueron distribuidos al azar mediante tabla de números aleatorios en 2 grupos experimentales y se comenzó en este primer día el tratamiento, durante 7 días con una inyección intramuscular en volumen de 0,1 mL diario.

El tratamiento asignado por grupo fue:

• Grupo 1: solución de cloruro de sodio 0,9 %.
• Grupo 2: extracto acuoso inyectable de Aloe b 0,18 mg/Kg.
  

Cada grupo estaba compuesto por 30 animales distribuidos en subgrupos de 10, según el día de la determinación del contenido de ácidos nucleicos (0, 4 y 8) y de comenzado el tratamiento con Aloe b o solución de cloruro de sodio al 0,9 %.

La determinación de ácidos nucleicos se efectuó según el método de Krihski GA y Alexandrov V, modificado por Minkova M y presentado en el XII Simposio de Biología y Medicina Espacial celebrado en 1997 en La Habana. La toma de muestra se efectuó por el plexo orbital con ayuda de un capilar heparinizado.

Análisis estadístico

Los datos obtenidos fueron procesados de forma automatizada. Para detectar diferencias significativas entre tratamientos y día de la determinación del contenido de ácidos nucleicos se aplicó la prueba no paramétrica de Mann Whitney. El nivel de significación se fijo en una p £ que 0,05.

Resultados

La figura muestra los valores medios de los contenidos de ácidos nucleicos de ambos grupos durante el experimento, donde se observa un aumento estadísticamente significativo (p = 0,002) a los 8 días de iniciado el tratamiento.

* P = 0,002 (control vs. Aloe b)
Fig. Contenido de ácidos nucleicos de leucocitos de sangre periférica por grupo

Discusión

Al Aloe vera L. se le han atribuido varios efectos farmacológicos. Entre sus componentes activos se destacan: los polisacáridos, por su acción en la proliferación celular y como protector de la carcinogénesis química; la aloesina, una cromona de bajo peso molecular que favorece el paso de la fase G1 (de presíntesis) a S (síntesis) en el ciclo celular y el 8-c-beta-d-[2-o-(e)-cumaroil] glucopiranosil-2-[2-hidroxi]-propil-7-metoxi-5-metilcromona
con un efecto antioxidante demostrado.2,5,6

En este estudio se encontró, un aumento significativo del contenido de ácidos nucleicos en los animales que recibieron el extracto acuoso, lo cual pudiera ser atribuido a los efectos antes mencionados; si se tiene en cuenta que la técnica empleada cuantifica exclusivamente ácidos nucleicos intactos, y que la ciclofosfamida ataca fundamentalmente el enlace 3´- 5´ de estas moléculas y es un activo generador de radicales libres.

Aunque no se determinó el mecanismo de acción del extracto inyectable, este pudiera estar relacionado con: la protección, la reparación o la síntesis de los ácidos nucleicos. Habría que continuar los estudios en este sentido para verificar esta hipótesis.
Finalmente se puede concluir que el extracto acuoso inyectable Aloe b puede favorecer el aumento de los ácidos nucleicos totales en leucocitos de sangre periférica en el ratón con mielosupresión por quimioterapia mediante un mecanismo de acción aún no precisado.

Summary

In order to know the effect of the Aloe vera injectable aqueous extract on the content of nucleic acids in peripheral blood of the mouse with myelosupression due to drug therapy, Balb/c female mouses of 18 g of weight that had previously received a sublethal dose of cyclophosphamide were used. The treatment was applied with the plant extract at doses of 0.18 mg/Kg by intramuscular route once a day and during 7 days. The determinations were made at the beginning of the trial and 4 and 8 days after the administration of the injectable. A significant statistical increase of the content of total nucleic acids in leukocytes of peripheral blood was observed in those animals that received the extract 8 days after the beginning of the treatment, when it was compared with a control group that received sodium chloride solution 0.9 %. The significance level was fixed at a p lower than or equal to 0.05. The results showed that the Aloe vera injectable aqueous extract could protect or favor the repairing and/or synthesis of these molecules.

Subject headings: ALOE/ therapeutic use; NUCLEIC ACIDS; CYCLOPHOSPHAMIDE; MICE, INBRED BALB C.

Referencias bibliográficas

1. Kritski GA, Alexandrov V. Diagnosis of radiation injury to the body using determination of blood nucleic acid. Doklady Academic Nauk SSSR 1982;3:44-8.
   
2. Kim HS, Kacew S, Lee BM. In vitro chemopreventive effects of plant polysaccharides (Aloe barbadensis Miller, Lentinus edodes, Ganoderma lucidum and Coriolus versicolor). Carcinogenesis 1999;20(8):1637-40.
   
3. Paz J de la, Sotolongo MC, Perdomo ME, Hernández M, Matos O. Aloe barbadensis Miller en la recuperación hematopoyética del ratón con mielosupresión por quimioterapia. Rev Cubana Farm 2001; 35 (Supl esp):212-4.
   
4. Paz J de la, Sotolongo MC, Perdomo ME, Matos O. Hematopoyesis hepática en el ratón con mielosupresión por quimioterapia y tratado con Aloe barbadensis Miller. Rev Cubana Med Milit 2001;30(3):172-5.
   
5. Lee KY. Aloesin up - regulates cyclin E/CDK2 kinase activity via inducing the levels of cyclin E, CDK2 and CDC 25A in SH - HEP 1 cell. Biochm Mol Biol Int 1997;41(2):285-92.
   
6. Lee KY. Isolation and identification of a phenolic antioxidant from Aloe barbadensis. Free Radic Biol Med 2000;28(2):261-5

Recibido:12 de mayo de 2003. Aprobado: 21 de mayo de 2003.
MSc. José de la Paz Naranjo. Hospital Militar Central "Dr Luis Díaz Soto". Avenida Monumental y Carretera del Asilo. Habana del Este. CP 11700. La Habana, Cuba. E-mail: [e-mail]

1 Máster en Ciencias Bioquímicas. Investigador Agregado.
2 Licenciada en Bioquímica. Investigadora Titular.
3 Técnica en Química Analítica.