Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos (CIDEM)

Control de calidad de la tintura homeopática de Capsicum annuum L.

Lic. Madeline Chalala Vázquez,1 MSc. Dinah María García García,2 Téc. Maritza Crespo Valiente,3 Téc. Carlos A. Rodríguez Ferradá4 y Téc. Isabel Hechevarría Sosa4

Resumen

El propósito de este trabajo fue obtener la tintura de Capsicum annuum L. según el método de la escuela francesa, a un título de etanol del 90 % y establecer sus índices de calidad tales como: características organolépticas, imagen capilar, índice de refracción, densidad relativa, pH, título etanólico y porcentaje de residuo seco. Se realizaron reacciones de identificación para detectar la presencia de carotenoides y determinar la prueba del vanadato. Por cromatografía en capa delgada fue estandarizado un perfil de la tintura. En todos los lotes obtenidos, sus índices de calidad se encontraron dentro de los límites establecidos por las farmacopeas tomadas como referencias. Se realizó un estudio para determinar el tiempo de vida útil de la tintura por 1 año a temperatura ambiente en frascos de vidrio de color ámbar de 30 mL y pudo comprobarse que en estas condiciones conservó óptimamente sus características. El conteo microbiano de la tintura se mantuvo por debajo de los niveles permisibles durante todo el experimento. Estos resultados demostraron que es realmente posible obtener esta tintura en Cuba con una calidad similar a la exigida por farmacopeas homeopáticas oficiales.

Palabras clave: Capsicum annuum L., tintura homeopática.

Capsicum annuum L. var. annuum popularmente conocida con el nombre de ají, pertenece a la familia Solanáceaes.1 Fue introducida en la práctica homeopática por Hahnemam en 1805.2

Es utilizada para la inflamación de los huesos y de las mucosas con dolores ardorosos y desgarrantes, tendencia a la supuración y a las secreciones. Su indicación clínica conviene particularmente a las personas gruesas, indolentes, sedentarias y pletóricas con cara roja y congestionada; alcohólicos, con anginas, blenorragia, cistitis, disentería, hemorroides y trastornos urinarios.2

Para seguir satisfaciendo la demanda cada vez mayor de estos productos, se realizó este trabajo con el objetivo de demostrar la posibilidad de obtener tinturas madres homeopáticas a partir de plantas cultivadas en las condiciones de Cuba, y establecer los índices de calidad y compararlos con farmacopeas homeopáticas de prestigio internacional.

Métodos

Se obtuvieron 9 lotes de tintura, según el método de la escuela francesa (Allen TF. The enciclopedia of pure materia médica) a un título de etanol del 85-95 % v/v, 3 a partir de los frutos maduros de C. annuum, cultivados en la Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig". Las cosechas se realizaron durante los meses de marzo, abril y mayo del año 2000 y se conservó en el herbario de la citada estación un ejemplar registrado con el número 4650.

A todos los lotes de tintura se les determinó las características organolépticas, imagen capilar, índice de refracción, densidad relativa, pH, título de etanol y residuo seco y además se realizaron reacciones de identificación para detectar la presencia de carotenoides y la prueba del vanadato. 3

Por cromatografía en capa delgada se obtuvo el perfil de la tintura. Se utilizaron placas precubiertas con gel de sílice G - 60 de 0,25 mm de espesor, como sistema de solvente una mezcla de butanol: ácido acético: agua ( 40:10:10 ) y como revelador luz ultravioleta de 365 nm. Además se detectó la presencia de capsaicina en una mezcla de cloroformo: acetato de etilo: isopropanol (33:9:3), como revelador una mezcla de anisaldehído, ácido acético y ácido sulfúrico y como sustancia de referencia 10 mg de capsaicina en metanol.

También se realizó estudio de la estabilidad por 1 año a 3 lotes almacenados a temperatura ambiente en frascos de vidrio de color ámbar de 30 mL con tapas de baquelita y retapas de prolipopileno y cada 3 meses se les realizaron los mismos análisis del control de calidad. Se controló cada 6 meses la calidad microbiológica mediante un conteo total de bacterias y hongos, evaluación cualitativa y cuantitativa de enterobacterias y determinación de Escherichia coli, Salmonella sp., Pseudomonas aeruginosas y Staphylococcus aureus (United States. Pharmacopeial Convention USP XXII Rockville; 1990) (Cuba. Medicamentos no estériles. Determinaciones microbiológicas. NC. 26 - 121: 92: 199).

Para la evaluación estadística de los resultados se realizó un análisis de varianza simple, determinándose la diferencia entre las medias mediante la prueba de rangos múltiples de Duncan.4

Resultados

La tintura de Capsicum obtenida tenía el aspecto de un líquido transparente de color naranja rojizo de olor fuerte característico, sabor picante y ardiente.

La imagen capilar de los lotes estudiados es alta de color naranja claro, la franja es lineal con una coloración más acentuada.

En la porción superior de la banda se observa una zona bien definida coloreada de naranja más oscuro. A la luz ultravioleta la franja presenta fluorescencia roja, la zona superior de color naranja de la banda fluoresce de rojo claro y el resto de la imagen muestra una fluorescencia azul que se hace más notable hacia la sub - banda. Con vapores de amoníaco al visible se intensifica la coloración de la imagen y a la luz ultravioleta de igual forma la fluorescencia también se hace más intensa, tornándose en este caso la fluorescencia azul en azul verde.

Mediante las reacciones de identificación se detectó la presencia de carotenoides en todos los lotes de tintura y además la prueba del vanadato se comportó positivamente.

En la tabla 1 se muestran los resultados de las evaluaciones de los diferentes índices realizados a los 9 lotes estudiados y los límites establecidos por las farmacopeas utilizadas como referencia. 3

Tabla 1. Índices medidos a los diferentes lotes de tintura de C. annuum

Lote	Índice de refracción	Densidad relativa	pH	Título de etanol (%)	Residuo seco(%)
1	1,363	0,841	5,5	82,19	3,42
2	1,363	0,836	5,6	84,04	2,51
3	1,361	0,816	5,2	83,11	1,31
4	1,362	0,816	5,5	89,58	1,79
5	1,361	0,818	5,3	88,66	1,33
6	1,361	0,976	5,3	85,00	1,72
7	1,361	0,817	5,3	85,00	1,35
8	1,361	0,817	5,2	86,81	1,43
9	1,361	0,818	5,2	90,49	1,41
Valor reportado	-	-	85	- 95%	³ 1,00

En las fig. 1 y 2 se presentan los perfiles cromatográficos obtenidos en las diferentes condiciones y se relacionan los intervalos de valores de Rf y el color para cada una de las bandas detectadas.

Los 2 perfiles cromatográficos mostraron desde el inicio hasta el final la misma cantidad de bandas, siendo similar su comportamiento frente a los sistemas de detección utilizados.

Fig.1. Perfil cromatográfico de la tintura de C. annuum revelado con luz UV.

Fig. 2. Perfil cromatográfico de la tintura de C. annuum revelado con anisaldehído.

La imagen capilar y las características organolépticas durante el estudio de estabilidad permanecieron inalterables, así como se detectó la presencia de carotenoides en todas las evaluaciones y muy positiva la prueba del vanadato. En la tabla 2 aparecen los índices determinados.

Tabla 2. Índices evaluados a C. annuum durante el estudio de estabilidad

Indice de refracción
Lote	Inicio	3 meses	6 meses	9 meses	12 meses
1	1,361	1,365	1,365	1,362	1,362
2	1,361	1,365	1,365	1,363	1,363
3	1,361	1,365	1,365	1,362	1,362
Densidad relativa
Lote	Inicio	3 meses	6 meses	9 meses	12 meses
1	0,817	0,820	0,818	0,817	0,818
2	0,817	0,819	0,819	0,819	0,820
3	0,818	0,816	0,818	0,818	0,819
pH
Lote	Inicio	3 meses	6 meses	9 meses	12 meses
1	5,3	5,4	5,3	5,1	5,2
2	5,2	5,2	5,2	5,0	5,0
3	5,2	5,2	5,2	5,1	5,1
Residuo seco (%)
Lote	Inicio	3 meses	6 meses	9 meses	12 meses
1	1,35	1,32	1,73	1,37	1,43
2	1,43	1,45	2,00	1,52	1,62
3	1,41	1,42	1,90	1,51	1,51
Título de etanol (%)
Lote	Inicio	3 meses	6 meses	9 meses	12 meses
1	85,00	85,00	84,96	85,88	85,00
2	86,81	88,66	88,66	88,66	87,73
3	90,49	89,58	88,66	88,66	87,73

          Límite reportado:
          Título de etanol: 85 - 95%
          Residuo seco: ³ 1,00

Los 3 lotes de tinturas seleccionados para el estudio de estabilidad resultaron microbiológicamente estables durante el año y el conteo microbiano se mantuvo dentro de los límites aceptados.

Discusión

Las características organolépticas de los 9 lotes coincidieron con lo que se plantea, así como el porcentaje de sólidos totales que para todos los casos fue mayor de 1.00, valor mínimo aceptado por varias farmacopeas,1,3 y la Pharmacopée Francaise 6 suppl 10 ed. París, Moulins-Lés-Metz: L' Adrapharm/Moisonneuve, 1989.

Los valores de índice de refracción, densidad relativa y pH, se mueven en un rango bastante estrecho. En el caso del título de etanol los primeros lotes obtenidos se quedaron por debajo del límite establecido, sin embargo, después de realizar algunos ajustes en el método de obtención quedó resuelta esta dificultad.

El perfil cromatográfico de la tintura revelado con luz ultravioleta a 365 nm, en el frente del solvente mostró una banda amarilla de Rf 0,98 - 0,99, en el intervalo de Rf 0,30 - 0,50 siempre se observan las bandas de color azul y al revelar con el reactivo de anisaldehído, el cromatograma de la tintura presenta una banda azul violácea con un valor de Rf por debajo de 0,75 entre 0,55 - 0,65 correspondiente a la capsaicina al igual que la solución tomada como referencia.

En la tabla 2 los valores de densidad relativa, índice de refracción y pH se mantuvieron invariables durante el año de almacenamiento. El comportamiento del título de etanol en el lote 1 y 2 al inicio y a los 12 meses de evaluados se diferenciaron entre sí al igual que el porcentaje de sólidos totales en los 3 lotes evaluados. Hay que destacar que el título de etanol se mantuvo dentro del límite establecido (85-95 %) y los sólidos totales se mantuvieron por encima del límite ( ³1,00) durante todo el experimento, lo que favoreció que la tintura conservara todas sus características de forma óptima durante 1 año bajo las condiciones ensayadas.

Se demostró que la tintura de C. annuum obtenida a partir de plantas cultivadas en las condiciones de Cuba, posee una calidad similar a la exigida por farmacopeas homeopáticas de reconocido prestigio y que la misma mantiene todas sus propiedades en frascos de vidrio de color ámbar de 30 mL, almacenados a temperatura ambiente por espacio de 1 año.

Agradecimientos

Los autores agradecen a la compañera Miralys Reyes Arias, operadora de microcomputadora de la Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig", su colaboración en la realización de este trabajo.

Summary

Control of quality of the homeopathic tincture of Capsicum annuum L.

The purpose of this paper was to obtain the tincture of Capsicum annuum L. by the method of the French school at a titer of ethanol 90 % and to establish its quality indexes, such as: organoleptic characteristics, capillary image, refraction index, relative density, pH, ethanol titer and percentage of dry residue. Identification reactions were made to detect the presence of carotenoids and to determine the vanadate test. A profile of the tincture was standardized by thin layer chromatography. In all the batches obtained, the quality indexes were within the limits established by the pharmacopeias taken as reference. A study was conducted to determine the time of useful life of the tincture for a year at room temperature in amber glass flasks of 30 mL. It was proved that it conserved its optimum characteristics under these conditions, and that its microbe count was under the permissible levels during the whole experiment. These results showed that it is really possible to obtain this tincture in Cuba with a quality similar to that demanded by the official homeopathic pharmacopeias.

Key words: Capsicum annuum L., homeopathic tincture.

Referencias bibliográficas

1. Pharmacopea Homeopática de los Estados Unidos Mexicanos. México: Publicaciones e Impresiones de Calidad;1998.p. 335.

2. Vannier L, Poirier J. Compendium de Materia Médica Homeopática. 6ta ed. São Paulo: Andrei; 1987.p. 568.

3. Syndicat des pharmacies et laboratories homeopatiques. Homeopathic- pharmacotechnie et monographies des medicaments courants. V I. Lyon (París): Syndicat;1981.

4. Duncan A. Multiple range test biometric. Biometrics. 1965;11(1):42.

Recibido: 21 de junio de 2004. Aprobado: 31 de enero de 2005.
Lic. Madeline Chalala Vázquez. Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig". San Antonio de los Baños. Provincia La Habana, Cuba.

1 Licenciada en Química. Investigadora Aspirante.
2 Máster. Investigadora Auxiliar.
3 Técnico Medio en Tecnología Farmacéutica.
4 Técnico Medio en Agronomía.