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Introducción
La formulación del Medio Transporte de Cary-Blair cuenta con un conjunto de sales y un agente gelificante (agar), que combinado con el pH alcalino de 8,4, le permiten al medio recolectar, transportar y conservar muestras clínicas para el diagnóstico microbiológico de agentes patógenos y bacterias entéricas, garantizando la supervivencia de estos microorganismos, por largos períodos de tiempo, sin que se produzca sobrecrecimiento o deterioro de la célula bacteriana 1-3.
En las etapas de laboratorio y piloto del proceso de desarrollo del producto en el Centro Nacional de Biopreparados (BioCen), se detectó un precipitado de color blanco, que sedimentaba en el fondo de los tubos que contenían el medio listo para el uso, que se hacía más visible luego de esterilizar el medio por calor húmedo (100 ºC por 15 min). Aunque los controles de calidad evidencian que la funcionalidad microbiológica del medio de transporte no se veía afectada, su apariencia no resultaba idónea para su comercialización como producto terminado.
La precipitación se debe a que una vez mezclados e hidratados los ingredientes, la interacción del fosfato de sodio (Na2HPO4) con el cloruro de calcio (CaCl2), forman el fosfato de calcio (Ca3(PO4)2) el cual es prácticamente insoluble en agua 4,5.
Estudios preliminares, registrados en el informe analítico del Medio de Transporte de Cary-Blair, demostraron que tanto el Na2HPO4 como el CaCl2, no muestran incompatibilidad con el resto de los ingredientes incluidos en la fórmula.
La formulación experimental del medio, realizada en los laboratorios de Investigaciones de Medios Diagnósticos de BioCen y las de distintas firmas comerciales extranjeras, incluyen el CaCl2 con los demás ingredientes (OXOID, 2006; CULTIMED, 2009; CONDA, 2011). No pocas empresas productoras de medios de cultivo, excluyen esta sal de sus formulaciones y solo sugieren agregar una solución al 0,09 %, luego de esterilizar el medio (Difco & BBL, 2009; Britania, 2015).
Esta última alternativa no es muy factible para los laboratorios de diagnóstico microbiológico y de investigación epidemiológica, fundamentalmente para aquellos pertenecientes la red de hospitales en Cuba, no sólo por representar una acción extra de importación de reactivos, sino que implica realizar actividades adicionales a la metodología diagnóstica.
Ante esta disyuntiva, el departamento de Diagnóstico Microbiológico y la Planta de Medios de Cultivo de BioCen, se propusieron desarrollar una metodología para la producción y evaluación de una mezcla basal de sales que constituiría un producto intermedio para la confección del Medio Transporte de Cary-Blair (MTCB), evaluar sus características fisicoquímicas y organolépticas y el rendimiento microbiológico.
Materiales y métodos
Se realizó un estudio de evaluación de las operaciones para el mezclado y deshidratación de la mezcla de sales en dos etapas: la determinación de la solubilidad del Na2HPO4 y el CaCl2, según la temperatura, pH y orden de la mezcla, y el proceso tecnológico para la confección del producto intermedio y evaluación de los parámetros de calidad antes y después de incluido en el producto final.
Materias primas
Se empleó un conjunto de sales y un agente gelificante que conformaron la formulación experimental del MTCB de BioCen (tabla 1).
a: Alemania; b: México; c: se utiliza solo la mitad del total de g/L referidos en la formulación del producto final.
Material biológico
Para el estudio de estabilidad en el tiempo del medio (evaluación del rendimiento microbiológico) se emplearon cuatro cepas microbianas de referencia de la American Type Culture Collection (ATCC): Salmonella Typhimurium 14028, Salmonella Enteritidis 13076, Shigella sonnei 25931 y Shigella flexneri 12028, procedentes del cepario central del BioCen.
Medios de cultivo
Se utilizó el caldo triptona soya (CTS) (BioCen, Cuba) como medio de enriquecimiento para la preparación del inóculo de los microorganismos utilizados en el ensayo, y el agar triptona soya (ATS) (BioCen, Cuba) para la siembra de las suspensiones bacterianas con el objetivo de cuantificar la promoción, mantenimiento o inhibición del crecimiento. Se empleó el MTCB de OXOID (Inglaterra) como control. Los medios fueron preparados según las especificaciones del fabricante.
Determinación de la solubilidad de las sales preparadas de manera independiente
Se prepararon soluciones de ambas sales (Na2HPO4: 8 g/100 mL y CaCl2: 100 g/100 mL), según estudios de solubilidad en agua, a partir de los datos disponibles en catálogos y especificaciones de estos reactivos. Se sometieron a distintas temperaturas de trabajo (25 y 70 ºC) y se comprobó la velocidad de dilución según el tiempo. Se determinaron las características organolépticas de la solución en cuanto a transparencia del líquido, presencia de precipitado y cristales y desprendimiento o no de calor.
Determinación de la solubilidad de la mezcla de ambas sales según el orden de adición, la temperatura y pH
Se confeccionaron ocho variantes que evaluaron los parámetros definidos como factores que inciden sobre la solubilidad de ambas sales. Tanto el Na2HPO4 como CaCl2 se emplearon según su concentración en la formulación del producto final (1,1 g/L y 0,09 g/L respectivamente) (tabla 2).
*: Se utilizó 1,1 g/L de Na2HPO4 y 0,09 g/L de CaCl2 para la preparación de ambas soluciones de las sales
Se empleó un baño termostatado (ThermoHaake) y un termómetro de 100 °C (B & C), ambos de procedencia alemana, para lograr una temperatura de trabajo controlada.
Para la determinación del pH se utilizó un pH-metro de superficie (MeterLab, Francia).
Método tecnológico utilizado en la investigación
Se determinó la cantidad de ambas sales para producir 9 kg y la concentración final de sólidos disueltos según el volumen de agua empleado. Para la mezcla de las mismas se definió el orden de cada una y la temperatura de trabajo para lograr la homogeneidad de la disolución concentrada de ambas sales. La mezcla se filtró en dos ocasiones y se deshidrató por aspersión en un equipo Niro Atomizer (Dinamarca) con una temperatura del aire a la entrada de la cámara de 120 oC y a la salida de 72 oC. El producto obtenido constituyó el producto intermedio para la confección del MTCB.
Preparación de la solución de fosfato disódico anhidro y cloruro de calcio di-hidratado
Se agregó 50 L de agua desionizada en un tanque de acero inoxidable (100 L de capacidad), a una temperatura de 60 ºC. Se adicionó, 8,332 Kg de Na2HPO4, se homogeneizó la solución con agitación constante hasta disolución completa de la sal y se dejó disminuir la temperatura hasta 25 ± 2 ºC. Se preparó la solución de CaCl2, agregando 1,365 kg en una cubeta de acero inoxidable (10 L de capacidad) que contenía 5 L de agua desionizada a temperatura ambiente (25 ± 2 ºC).
Ambas sales se pesaron en balanza técnica (Sartorius, Alemania) y se disolvieron en agua, por separado. Las disoluciones se homogeneizaron con la ayuda de un electro agitador portátil (IKA, Alemania).
Mezcla de las soluciones de ambas sales
Se agregó la solución de CaCl2 sobre la solución de Na2HPO4 contenida en el tanque de acero inoxidable, de manera gradual, bajo agitación constante (a 1000 rpm) con ayuda de un electroagitador (ANTICO OLINDO E CESARE, Italia), durante 20 minutos a temperatura ambiente. La mezcla se mantuvo en reposo por 1 h.
Filtrado y secado de la mezcla de sales
Se procedió a filtrar dos veces la mezcla de sales por filtración intermitente, en un filtro prensa (SENorion, Alemania) con un grupo de seis placas filtrantes SA-395 y a una presión de 0,5 kgf/cm2, en cada proceso. El líquido se recuperó en un contenedor de acero inoxidable de 100 L, se midió el índice de refracción con un refractómetro (Atago, Japón) a temperatura de 25 a 30 ºC y se determinó la transparencia de la solución por el método de la observación visual.
La mezcla filtrada se pesó en una balanza técnica (Sartorius, Alemania) y se pasó a la máquina de secado por aspersión (NiroAtomyzer, Dinamarca) con capacidad para 33 kg. Se secó por espacio de 1 h, a una temperatura de entrada de aire en el equipo de 120 ºC y de salida de 72 ºC. El polvo resultante (producto intermedio) se pesó y se depositó en bolsas de nylon selladas herméticamente.
Cálculo del rendimiento del proceso de secado por aspersión
El rendimiento del proceso (R) de secado se determinó mediante la relación porcentual entre el sólido obtenido al final del proceso de secado por aspersión (peso neto: Pn), y los sólidos aportados por la mezcla de sales a la entrada en el equipo (Peso teórico: Pt), según la Ecuación (1). 6 El rendimiento se determinó a partir del balance de materiales en función de la composición de sólidos y considerando que en el agua evaporada no se pierde producto.
donde:
R: rendimiento del proceso.
Pn: peso neto total de sólidos al inicio del proceso.
Pt: peso teórico total de sólidos al final del proceso.
Evaluación fisicoquímica y organoléptica del producto intermedio
Se realizó la evaluación de las características fisicoquímicas y organolépticas al producto intermedio (Base de sales para MTCB, ESP 1449) de manera paralela, en los laboratorios de investigaciones de Medios de Cultivo y de Control de Calidad de BioCen (tabla 3), cuyo Sistema de Calidad está certificado por las ISO 9001:2015, por la compañía británica Lloyd’s Register Quality Assurance y la Oficina Nacional de Normalización (ONN) de Cuba.
Tabla 3 Características fisicoquímicas y organolépticas evaluadas a la base de sales para medio transporte de Cary-Blair (producto intermedio)
* Se pesan 0,12 g de la base de medio en 100 mL de agua destilada o desionizada
Determinación de la pérdida por desecación del producto intermedio
Se empleó el método gravimétrico descrito por la Farmacopea de los Estados Unidos, 7 depositando el polvo del producto intermedio en pesa filtros de porcelana. El secado de ambos materiales se realizó en una estufa (Heraeus, Alemania) al vacío (Ecuación 2).
donde:
PD: pérdida por desecación.
A: pesa filtro con muestra.
B: peso de la muestra.
C: pesa filtro vacío.
Preparación del MTCB experimental
Para el MTCB experimental (BioCen, Cuba) se pesó 0,64 g del producto intermedio, que contiene 0,09 g/L de CaCl2 y 0,55 g/L de Na2HPO4. Posteriormente, se pesó 0,55 g/L, que corresponde con el Na2HPO4 faltante y el total del resto de los ingredientes: 1,5 g/L de C2H3NaO2S, 5,0 g/L de NaCl y 5,5 g/L de agar bacteriológico. Se añadió un litro de agua desionizada, se fundió y distribuyeron 4 mL del medio en tubos de cristal con tapa de rosca. Se esterilizó por calor húmedo (100 ºC por 15 min), se dejó enfriar y se cerraron bien los tubos para evitar la pérdida de agua.
Evaluación microbiológica del producto intermedio
Preparación del inóculo y método de siembra
El material biológico se inoculó en tubos con CTS y se incubaron en aerobiosis de 18-24 h a 35 ± 2 °C. Se embebieron hisopos estériles en el medio de enriquecimiento y se introdujeron en tubos que contenían 4 mL de MTCB control (OXOID, Inglaterra) y el experimental (BioCen, Cuba). Se incubaron a temperatura ambiente (25 a 30 °C) desde uno hasta 49 días con tres siembras obligatorias (1, 16 y 49 días), se retiraron los hisopos del MTCB y se sembraron por estría de agotamiento del inóculo en la superficie del medio ATS. Las placas se incubaron en aerobiosis por 24 h a 35 ( 2 °C.
Resultados y discusión
Determinación de la solubilidad de las sales empleadas en el producto intermedio
Se observó alta solubilidad en agua del CaCl2 (100 g/100 mL) y baja disolución de Na2HPO4 (8 g/100 mL) a temperatura ambiente (entre 25 y 30 ºC). Se evidenció el doble de la solubilidad, y aumento de la velocidad de dilución, al elevar la temperatura (> 70 ºC), en todas las variantes de las soluciones de sales. Se determinó que el Na2HPO4 demora en disolverse totalmente, en ambas temperaturas de trabajo, en comparación con CaCl2. En ambas sales, preparadas de manera independiente, se observó desprendimiento de energía en forma de calor y no se evidenció producción de precipitado al final de la reacción (tabla 4).
Los resultados en esta etapa demuestran las diferencias en la solubilidad de las sales en estudio. Estudios realizados por Barros y colaboradores en el 2009 8 refieren que el CaCl2 es una sal totalmente soluble en agua, en comparación con el Na2HPO4.
Tabla 4 Relación de los indicadores con las características físicas de las soluciones de ambas sales de las variantes experimentales
ST. Amb: solución sometida a temperatura ambiente; SAT: solución sometida a altas temperaturas; *: concentración de 100 g/100 mL; **: concentración de 8 g/100 mL; a: dilución rápida; b: dilución lenta; c: dilución muy rápida; AP: ausencia de precipitado; DC: desprendimiento de calor; Pr: principio de la reacción;
PC: presencia de cristales; Fr: final de la reacción.
Se comprobó que las temperaturas de trabajo no influyen significativamente sobre la solución de CaCl2, la cual no muestra variabilidad en sus características físicas, aunque se logra obtener la solubilidad en menor tiempo a temperaturas superiores.
En el caso de la solución de Na2HPO4 se logra mayor solubilidad a mayor temperatura que la ambiente.
Para el empleo de ambas sales en la elaboración del producto intermedio, que garantizara la producción de 9 kg de MTCB, es necesario disminuir la concentración de Na2HPO4. Lo anterior responde a lo que plantean distintos autores, que a mayor concentración de esta sustancia en una mezcla con una solución de CaCl2, mayor será la formación de Ca3(PO4)2. Esta sal es un compuesto muy poco soluble, con una Kps de 2.83 x 10-30. 9 Es resultado de la reacción del Na2HPO4 y el CaCl2 en una disolución, que por ser poco soluble en agua, precipita. 4
Determinación de la solubilidad de la mezcla de ambas sales según la temperatura
Se observó menor opalescencia, formación de precipitado, y cristales salinos en la mezcla de las soluciones de CaCl2 y Na2HPO4 sometida a temperaturas entre 3 a 8 °C con respecto a las mezclas de las sales a temperatura ambiente (28 °C) y por encima de los 70 °C. Se evidenció mayor incompatibilidad de las sales a medida que la disolución era sometida a temperaturas superiores.
Resultados similares obtuvo Sinitsyna y colaboradores en el 2005 10 cuando demostraron que las temperaturas altas disminuyeron la solubilidad del Ca3(PO4)2, evidenciado en una mayor formación de precipitado. Lo anterior se justifica en que a medida que la temperatura aumenta, se produce una mayor disociación del ión Ca, por lo que se encuentra más disponible para unirse al fosfato, aumentando la velocidad de reacción y produciendo la precipitación del Ca3(PO4)2.11-14
Determinación de la solubilidad de la mezcla de ambas sales según pH de la disolución
La mezcla de sales sometida a un pH entre 4 y 5 no reveló opalescencia, precipitado ni formación de cristales salinos. Similares resultados se obtuvieron con la disolución a pH entre 6 y 7, solo que en este caso se evidenció leve opalescencia del sobrenadante. La mezcla sometida a pH alcalino (8-9) mostró marcada incompatibilidad entre ambas soluciones con una evidente opalescencia del sobrenadante y formación de precipitado depositado en forma de sedimento en el fondo del recipiente.
Estos resultados coinciden con lo reportado por diferentes autores que plantean que un pH en 6,5 de la disolución, disminuye la precipitación del Ca3(PO4)215,16 y que a pH más ácidos (<5) la estabilidad del Ca con las sales inorgánicas de PO4 es mayor 11, y por tanto se incrementa la solubilidad 9,17. Otros investigadores explican que un aumento del pH disminuye la solubilidad del Ca y el P, ya que habría mayor disponibilidad de H2PO4, por lo que aumenta la probabilidad de precipitación con el Ca. 10,11,12,18,19
Determinación de la solubilidad de la mezcla de sales según el orden de adición
Se observó mayor opalescencia y formación de precipitado al añadir la solución de Na2HPO4 sobre la solución de CaCl2, que realizando la operación inversa. En este otro aspecto, la investigación coincide con la literatura consultada, que refiere no añadir el PO4 y el Ca de manera secuencial, además de que aconseja realizar la mezcla de ambas sales añadiendo de manera primaria la sal PO4, después los otros elementos de la formulación y por último el Ca, siempre agregándolo de manera suave para evitar precipitación local. 11,20
En el caso del estudio realizado no se añadieron en el producto intermedio, el C2H3NaO2S y el NaCl, los cuales podrían ser los microelementos claves para evitar la formación de precipitado, o al menos atenuar en gran medida su aparición en la disolución.
Los resultados en esta etapa de trabajo demostraron que la concentración de ambas sales, la temperatura, el tiempo, el pH y la presencia de otros elementos en la mezcla, son factores que influyen en la solubilidad del Ca en presencia de las sales inorgánicas de PO4. Esta conclusión fue clave para la determinación de la metodología a emplear y los indicadores a tener en cuenta en cada paso de los procedimientos utilizados para la confección de la Base de Sales para el MTCB, como producto intermedio. Es importante destacar que existen otras condicionantes durante el proceso de producción, que pueden incidir en la compatibilidad de la mezcla de ambas sales como son las interacciones físico-químicas de los elementos y materias primas que conforman la formulación del medio de cultivo, los materiales empleados y el ambiente donde se realizan los procesos de producción.
Concentración de las sales para el producto intermedio
Se observó un líquido transparente, en las disoluciones sometidas a temperatura de 70 °C, tanto en la solución de Na2HPO4 al 17 % (8,3 kg/50 L), como en la de CaCl2 al 27 % (1,4 kg/5 L). El total de sólidos en la solución fue de 9,7 kg para un volumen total de agua de 55 L, quedando la mezcla a una concentración final aproximada del 18 %.
La baja solubilidad del Na2HPO4, su elevada concentración en el medio de cultivo, la posibilidad de que al mezclarla con el CaCl2, produjera mayor precipitado, unido al inconveniente de emplear mayores volúmenes de agua en la mezcla, impuso la necesidad de disminuir a la mitad la concentración de este reactivo en el producto intermedio. La alta solubilidad de la sal de Ca, permitió emplearlo en su totalidad en la base de sales.
Mezcla de sales para el producto intermedio
Se evidenció un líquido opalescente de color blanco y presencia de precipitado, luego de mezclar la solución de CaCl2 (1,4 kg/5 L) sobre la de Na2HPO4 (8,3 kg/50 L). Se observó un aumento considerable de la temperatura del líquido, que de la inicial (60-70 °C) pasó a ser entre 80 y 85 °C. El peso total de la dilución resultó en 64,69 kg.
A pesar que se empleó el orden de mezcla recomendado por la literatura, la secuencialidad de ambas sales, sin que entre ellas mediara algún micro o macro elemento, la imposibilidad de disminuir el pH a menos de cinco, y el encontrarse la disolución a una temperatura superior a la ambiental, favoreció a una mayor interacción de ambas sales y que se detectara la incompatibilidad y la formación de Ca3(PO4)2. Esto está en plena correspondencia con estudios realizados por Delgado y Díaz en el año 2005, 21 que plantean que por la naturaleza inorgánica de estas sales, tienden a disociarse con mayor facilidad y solo el mantenimiento del pH y la temperatura en niveles más bajos, unido a evitar el contacto directo de ambos electrolitos a altas concentraciones, evita la formación de precipitado.
Filtrado y secado de las sales para el producto intermedio
La mezcla de sales contó con un peso inicial de 64,69 Kg, donde el proceso de filtrado mostró una solución opalescente, con presencia de partículas minúsculas en suspensión y ausencia de precipitado. El refiltrado de la dilución permitió obtener un líquido totalmente transparente, con una cantidad final del concentrado de 57,0 kg, un índice de refracción de 1,354 y un total de sólidos de 8,5 kg, para una representación aproximada del 15 % en la mezcla. El rendimiento del proceso resultó en un 88 %.
El valor de la concentración total de la mezcla se considera aceptable para el filtrado y secado por aspersión, teniendo en cuenta que Valiente y colaboradores en el 2015 22 plantean, que lo ideal es que las soluciones posean de 20 a 30 % de sólidos totales disueltos.
Se obtuvo 4,35 kg de producto seco, en el proceso de secado por aspersión, lo que representó un rendimiento real de 51,2 %. Estos resultados concuerdan con los estudios realizados a pequeña escala de dos lotes de la base de sales realizados en la etapa piloto del MTCB, donde en cada proceso de filtrado y secado por aspersión, se obtuvo la mitad del producto inicial con un rendimiento entre 50 y 52 %.
Aunque se observa una reproducibilidad de los resultados, a diferentes escalas de producción del producto, es necesario determinar si otros elementos en el proceso inciden en el rendimiento. López y colaboradores en el 2009 23 plantearon que uno de los factores críticos para un mayor provecho en el proceso de secado, es el adecuado contenido de sólidos totales. Por lo que una alta concentración de sólidos totales, evita una pérdida considerable del soluto e incrementa el rendimiento del producto final. Otro factor que favorece el rendimiento del proceso, es la temperatura de entrada y de salida; por lo que a un aumento de la misma, garantiza que a escalas superiores se obtengan rendimientos mayores. 24
Si tomamos en cuenta lo referido por Edrisi y colaboradores en el año 2016, 25 podemos considerar de adecuado el rendimiento en nuestro estudio. Esto se debe a que secadores por aspersión en pequeña escala con rendimientos entre 60 y 80 % pueden dar indicio de rendimientos más altos en posteriores secados a escalas superiores de producción.
Evaluación fisicoquímica y organoléptica de la base de sales
Se obtuvo un polvo de color blanco con una apariencia fina, deshidratada, homogénea, fluida, sin presencia de grumos o partículas extrañas insolubles. La apariencia de la base de sales en una solución al 0,12 % fue transparente, sin presencia de precipitados. La pérdida por desecación se estableció en 0,5 %, encontrándose por debajo del límite de aceptación (≤ 7,0 %).
Se obtuvo una apariencia del polvo satisfactoria, lo cual es consecuencia del empleo de la máquina de secado por aspersión. Esta tecnología es un proceso continuo y controlado, con tiempos cortos de secado, que garantiza un polvo fluido y soluble, homogéneo, que preserva sus propiedades fisicoquímicas, y da como resultado una excelente presentación del producto final. 26
Se comprobó la efectividad del proceso tecnológico en eliminar el Ca3(PO4)2 de la mezcla de sales, al observarse una solución transparente, sin presencia de precipitado. La pérdida por desecación mostró resultados satisfactorios, con valores inferiores al 7 %.
Determinar la humedad fue un paso fundamental, debido al efecto que tiene la misma para mantener la calidad del producto, además que influye directamente en el costo de producción, 27,28,29 lo que garantiza una mayor estabilidad durante la conservación y evita la interacción química y la degradación de sus componentes 30.
Evaluación de la funcionalidad microbiológica de la base de sales
La inclusión de la base de sales en el MTCB experimental evidenció, luego de la preparación y esterilización por vapor fluente, un medio semisólido de apariencia homogénea y ausencia de precipitado. No se observó diferencias significativas, en cuanto a características organolépticas y fisicoquímicas, con el medio de referencia empleado como control (MTCB de OXOID, Alemania).
Se observó crecimiento abundante de S. Typhimurium, S. Enteritidis, S. sonnei y S. flexneri en placas de ATS, luego de ser conservadas las cepas en el MTCB de BioCen (Cuba) y el medio control (OXOID, Alemania), por un período de uno, 16 y 49 días a temperatura ambiente.
No se observó deterioro ni pérdida de las características macroscópicas típicas de los microorganismos en ninguna de las siembras realizadas, mostrando las respuestas bioquímicas y serológicas esperadas en las pruebas de identificación presuntiva y confirmatoria. No se observó diferencias cualitativas significativas, en cuanto a número y características culturales de las colonias desarrolladas, de los microorganismos provenientes del MTCB de BioCen (Cuba) y de OXOID (Alemania).
Los resultados en esta etapa evidencian la efectividad de la metodología y de los procedimientos empleados en todo el proceso productivo, para eliminar la sedimentación, originada por el producto de incompatibilidad de la mezcla de sales, sin afectar la funcionalidad microbiológica del producto final.
Conclusiones
Se definió una metodología para producir una base de sales, como producto intermedio, que eliminó el producto de incompatibilidad (Ca3(PO4)2) que se produce al mezclar las sales CaCl2 y Na2HPO4 presentes en la formulación del Medio Transporte de Cary-Blair.
La concentración de ambas sales, el orden de adición, la temperatura de trabajo, el tiempo de mezclado, pH de la mezcla y la presencia de otros elementos constitutivos del producto final, son factores que influyen en la solubilidad del Ca con las sales inorgánicas de HPO4.
Las interacciones fisicoquímicas de los elementos y materias primas que conforman la formulación del medio de cultivo, los materiales empleados y el ambiente donde se realizan los procesos de producción, inciden en la compatibilidad de la mezcla de ambas sales.
El método para el proceso de secado por aspersión de la mezcla de sales resultó reproducible, con valores aceptables en el rendimiento.
La Base de Sales para el Medio Transporte de Cary-Blair cumple con los requisitos de calidad establecidos, en cuanto a las características fisicoquímicas y organolépticas evaluadas, y responde a las exigencias de rendimiento microbiológico del producto final.
El producto intermedio, una vez incorporado a la formulación final del medio, logra una correcta conservación de los microorganismos objeto de estudio por un período de más de 49 días a temperatura ambiente, sin que estas cepas sufran cambios en sus características fisiológicas y bioquímicas, lográndose un buen desarrollo en los medios de cultivo habituales y una correcta interpretación de los resultados.
