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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[Efecto in vitro de la Matricaria recutita L. sobre la respuesta de linfocitos y neutrófilos]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[Castilla Chamomile, sweet, or maroon (Matricaria recutita or Matricaria chamomilla) is an annual herbaceous plant of the Asteraceae family, native to Europe and temperate zones of Asia, which has become naturalized in parts of America, Africa, and Australia. It has been used by man for thousands of years with different medicinal purposes. We studied the in vitro effect of an extract fluid of this plant on lymphocytes from 20 blood donors and 20 patients with a diagnosis of cellular immunodeficiency. We quantified T lymphocytes by the techniques of spontaneous and active rosette formation, and the immunocytochemical ultramicromethod (UMICIQ) as well as the phagocytic function (opsonophagocytic index) of neutrophils. There were no statistically significant differences in the studied parameters between experimental conditions with Matricaria and without it.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[ <div class=Section1>      <p align=right style='text-align:right'><b><span style='font-size:10.0pt; font-family:Verdana'>ART&Iacute;CULO ORIGINAL</span></b> </p>      <p align=right style='text-align:right'>&nbsp; </p>      <p><b><span style='font-size:13.5pt;font-family:Verdana'>Efecto <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vitro</i> de <st1:PersonName ProductID="la Matricaria" w:st="on">la <i style='mso-bidi-font-style:normal'>Matricaria</i></st1:PersonName><i style='mso-bidi-font-style:normal'> recutita L</i>. sobre la respuesta de linfocitos y neutr&oacute;filos</span></b> </p>      <p>&nbsp; </p>      <p><b><span lang=EN-GB style='font-family:Verdana;color:black;mso-ansi-language: EN-GB'>In vitro effect of <i>Matricaria recutita L</i>. on Lymphocytes and Neutrophils response </span></b><span lang=EN-GB style='mso-ansi-language:EN-GB'><o:p></o:p></span></p>      <p><span lang=EN-GB style='mso-ansi-language:EN-GB'>&nbsp; <o:p></o:p></span></p>      <p><b><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Lic. L&aacute;zaro del Valle-P&eacute;rez, DraCs. Consuelo Mac&iacute;as-Abraham, Lic. Bertha Beatriz Socarr&aacute;s-Ferrer, Dra. Vianed Mars&aacute;n-Su&aacute;rez, Dra. Miriam S&aacute;nchez-Segura, Lic. Lourdes Palma-Salgado, Dra. Rosa Mar&iacute;a Lam-D&iacute;az</span></b><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'> </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Instituto de Hematolog&iacute;a e Inmunolog&iacute;a. <st1:PersonName ProductID="La Habana" w:st="on">La Habana</st1:PersonName>, Cuba. </span></p>      <p>&nbsp; </p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>&nbsp; </p>      <div class=MsoNormal align=center style='text-align:center'>  <hr size=1 width="100%" noshade color="#aca899" align=center>  </div>      <p><b><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>RESUMEN </span></b></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>La manzanilla de Castilla, dulce o cimarrona (<i style='mso-bidi-font-style:normal'>Matricaria recutita</i> o <i style='mso-bidi-font-style:normal'>Matricaria chamomilla</i>), es una planta herb&aacute;cea anual de la familia de las aster&aacute;ceas, nativa de Europa y de regiones templadas de Asia, que se ha naturalizado en algunas regiones de Am&eacute;rica, &Aacute;frica y Australia. Ha sido utilizada por el hombre desde hace miles de a&ntilde;os con diferentes fines medicinales. Se estudi&oacute; el efecto <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vitro</i> de un extracto fluido de esta planta sobre los linfocitos de 20 donantes voluntarios de sangre y de 20 enfermos con diagn&oacute;stico de inmunodeficiencia celular, mediante la cuantificaci&oacute;n de los linfocitos T por las t&eacute;cnicas de formaci&oacute;n de roseta espont&aacute;nea y activa y el ultramicrom&eacute;todo inmunocitoqu&iacute;mico (UMICIQ), as&iacute; como la funci&oacute;n fagoc&iacute;tica (&iacute;ndice opsonofagoc&iacute;tico) de los neutr&oacute;filos. No se hallaron diferencias estad&iacute;sticamente significativas en los par&aacute;metros estudiados entre las condiciones experimentales con Matricaria y sin esta. </span></p>      <p><b><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Palabras clave:</span></b><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'> Manzanilla, <i style='mso-bidi-font-style: normal'>Matricaria recutita L</i>., roseta activa y espont&aacute;nea, &iacute;ndice opsonofagoc&iacute;tico, UMICIQ, CD2, CD3. </span></p>      <div class=MsoNormal align=center style='text-align:center'>  <hr size=1 width="100%" noshade color="#aca899" align=center>  </div>      <p><b><span lang=EN-GB style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana;mso-ansi-language: EN-GB'>ABSTRACT</span></b><b><span lang=EN-GB style='mso-ansi-language:EN-GB'> </span></b><span lang=EN-GB style='mso-ansi-language:EN-GB'><o:p></o:p></span></p>      <p><span lang=EN-GB style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana;mso-ansi-language: EN-GB'>Castilla Chamomile, sweet, or maroon (<i style='mso-bidi-font-style: normal'>Matricaria recutita</i> or <i style='mso-bidi-font-style:normal'>Matricaria chamomilla</i>) is an annual herbaceous plant of the Asteraceae family, native to Europe and temperate zones of Asia, which has become naturalized in parts of America, Africa, and Australia. It has been used by man for thousands of years with different medicinal purposes. We studied the <i>in vitro </i>effect of an extract fluid of this plant on lymphocytes from 20 blood donors and 20 patients with a diagnosis of cellular immunodeficiency. We quantified T lymphocytes by the techniques of spontaneous and active rosette formation, and the immunocytochemical ultramicromethod (UMICIQ) as well as the phagocytic function (opsonophagocytic index) of neutrophils. There were no statistically significant differences in the studied parameters between experimental conditions with Matricaria and without it. </span><span lang=EN-GB style='mso-ansi-language:EN-GB'><o:p></o:p></span></p>      <p><b><span lang=EN-GB style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana;mso-ansi-language: EN-GB'>Key words: </span></b><span lang=EN-GB style='font-size:10.0pt; font-family:Verdana;mso-ansi-language:EN-GB'>Chamomile, <i>Matricaria recutita L</i>., spontaneous and active rosette, opsonophagocytic index, UMICIQ, CD2, CD3. </span><span lang=EN-GB style='mso-ansi-language:EN-GB'><o:p></o:p></span></p>      <div class=MsoNormal align=center style='text-align:center'>  <hr size=1 width="100%" noshade color="#aca899" align=center>  </div>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>&nbsp; </p>      <p>&nbsp; </p>      <p><b><span style='font-family:Verdana'>INTRODUCCI&Oacute;N </span></b></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>La manzanilla de Castilla, dulce o cimarrona (<i style='mso-bidi-font-style:normal'>Matricaria recutita</i> o <i style='mso-bidi-font-style:normal'>Matricaria chamomilla</i>) (MR), es una planta herb&aacute;cea anual de la familia de las aster&aacute;ceas, nativa de Europa y de regiones templadas de Asia y se ha naturalizado en algunas regiones de Am&eacute;rica, &Aacute;frica y Australia. Es una planta con tallo cil&iacute;ndrico, erguido, ramoso, de hasta 50 o <st1:metricconverter ProductID="60 cm" w:st="on">60 cm</st1:metricconverter> de altura. Presenta hojas alternas y s&eacute;siles. En posici&oacute;n terminal, presenta en verano una inflorescencia en forma de cap&iacute;tulo paniculado. Las flores radiales son unas 20, con la l&iacute;gula blanca, mientras que las del disco son numerosas, hermafroditas; el recept&aacute;culo es hueco y carece de escamas. Las flores son un poco amargas y fragantes. Desde hace miles de a&ntilde;os, ha sido utilizada por el hombre con diferentes fines medicinales.<sup>1,2</sup> </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Se emplea medicinalmente como antiinflamatoria, antiespasm&oacute;dica ansiol&iacute;tica sin relajaci&oacute;n muscular. El aceite esencial se halla entre el 0,4 y el 1,0 % de la planta fresca. Contiene sesquiterpenoides (1-alfa-bisabolol y derivados: bisabol&oacute;xidos A, B y C, bisabonol&oacute;xido A), antecotulide, camazuleno, lactosas sesquiterp&eacute;nicas, carburos terp&eacute;nicos, (cadineno, cis-espiro-&eacute;ter y trans-espiro-&eacute;ter, farneseno), flavonoides (apigenina, luteolina, quercetina y patuletina), cumarinas (dioxicumarina, herniarina, umbeliferona), resinas (triacontano, fitosterina), &aacute;cido valeri&aacute;nico y fenoles.<sup>2-10</sup> </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Se ha informado en la literatura m&eacute;dica de una serie de efectos beneficiosos de <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> en animales y en ensayos <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vitro</i>, pero los ensayos cl&iacute;nicos en humanos deben continuarse para llegar a resultados concluyentes.<sup>11</sup> </span></p>      <p><st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on"><span style='font-size:10.0pt;  font-family:Verdana'>La MR</span></st1:PersonName><span style='font-size:10.0pt; font-family:Verdana'> lleg&oacute; a Cuba como droga seca desde Europa hasta que en 1939, el sabio bot&aacute;nico <i style='mso-bidi-font-style:normal'>Juan Tom&aacute;s Roig</i> inici&oacute; su cultivo de forma experimental para su posterior cultivo en la isla. <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">La MR</st1:PersonName> ha sido empleada en la fabricaci&oacute;n de cosm&eacute;ticos, jabones, champ&uacute;s y tintes, a los que a&ntilde;ade sus propiedades espec&iacute;ficas, sus potencialidades colorantes y bactericidas. Puede provocar dermatitis de contacto en personas sensibles y se han informado casos de anafilaxis entre al&eacute;rgicos, as&iacute; como interacciones con la warfarina.<sup>1,12-14</sup> </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Los estudios de respuesta de genotoxicidad en ensayos <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vivo</i> e <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vitro</i> con <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> han sido negativos.<sup>15</sup> </span></p>      <p><st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on"><span style='font-size:10.0pt;  font-family:Verdana'>La MR</span></st1:PersonName><span style='font-size:10.0pt; font-family:Verdana'> aparece entre las especies de plantas medicinales aprobadas por el Ministerio de Salud P&uacute;blica de Cuba y se le reconocen propiedades terap&eacute;uticas como sedante, antiinfeccioso, antif&uacute;ngico y antiinflamatorio, tanto en aplicaci&oacute;n t&oacute;pica como oral.<sup>2</sup> </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Este trabajo se realiz&oacute; para determinar el efecto <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vitro</i> de una tintura de MR sobre los linfocitos y neutr&oacute;filos humanos en individuos sanos y con diagn&oacute;stico previo de inmunodeficiencia o d&eacute;ficit celular. </span></p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>&nbsp; </p>      <p><b><span style='font-family:Verdana'>M&Eacute;TODOS </span></b></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Se estudi&oacute; el efecto <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vitro</i> de <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> sobre los linfocitos procedentes de 20 donantes voluntarios de sangre y 20 enfermos con d&eacute;ficit de la inmunidad celular que no hab&iacute;an recibido medicamento en el mes anterior a la obtenci&oacute;n de la muestra. Los 20 pacientes seleccionados para este estudio hab&iacute;an sido diagnosticados previamente en el Instituto de Hematolog&iacute;a e Inmunolog&iacute;a con un d&eacute;ficit de la inmunidad celular, por presentar en el cuadro cl&iacute;nico infecciones frecuentes y alteraciones de los valores normales de linfocitos T y del &iacute;ndice opsonofagoc&iacute;tico (FF) de los neutr&oacute;filos a la <i style='mso-bidi-font-style:normal'>Candida albicans</i>. </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>A cada paciente se les extrajeron 15 mL de sangre heparinizada (15 UI/mL) con jeringuillas pl&aacute;sticas desechables. El aislamiento de c&eacute;lulas mononucleares se efectu&oacute; seg&uacute;n el m&eacute;todo de B&ouml;yum modificado, sobre un gradiente de Ficoll-Paque Plus (densidad 1,077 g/mL) (GE Healthcare, Suecia).<sup>16</sup> </span></p>      <p><o:p>&nbsp;</o:p></p>      <p><b><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Preparaci&oacute;n de la soluci&oacute;n de MR </span></b></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Tintura de manzanilla 20 %, (Lote 509006, Centro de Producci&oacute;n Local de Medicina del Cerro. Se esterilizaron 10 mL de la tintura (filtro <st1:metricconverter ProductID="0,2 m" w:st="on">0,2 m</st1:metricconverter>, NALGENE, EE. UU.). </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Para evaluar la respuesta de <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> sobre la viabilidad de los linfocitos y neutr&oacute;filos se utiliz&oacute; la t&eacute;cnica de exclusi&oacute;n del azul trip&aacute;n sin exposici&oacute;n a las diluciones de MR y con diluciones dobles de este producto desde 1:2 hasta 1:4096, durante 24 horas a <st1:metricconverter ProductID="4 C" w:st="on">4 C</st1:metricconverter>. La viabilidad celular estuvo disminuida hasta la diluci&oacute;n 1:128 y a partir de ella fue superior al 95 %. Se ensayaron todos los experimentos con <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName>, diluci&oacute;n 1:256, que se consider&oacute; como &oacute;ptima. </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>La determinaci&oacute;n de la expresi&oacute;n de los ant&iacute;genos de membrana linfocitaria CD2 y CD3, la formaci&oacute;n de roseta espont&aacute;nea (RE) y activa (RA) y el estudio de la funci&oacute;n fagoc&iacute;tica (FF) frente a la <i style='mso-bidi-font-style:normal'>Candida albicans</i>, se realiz&oacute; sin la estimulaci&oacute;n de MR (diluci&oacute;n &oacute;ptima 1:256) y con esta, durante 24 horas previas a su evaluaci&oacute;n mediante el ultramicrom&eacute;todo inmunocitoqu&iacute;mico (UMICIQ) introducido y modificado en nuestro laboratorio con el uso de anticuerpos monoclonales espec&iacute;ficos, y las t&eacute;cnicas de formaci&oacute;n de RE y RA e &iacute;ndice opsonofagoc&iacute;tico, respectivamente.<sup>17</sup> </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>El estudio de la acci&oacute;n de <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> se realiz&oacute; sin incubaci&oacute;n y con incubaci&oacute;n con <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> (diluci&oacute;n 1:256) a <st1:metricconverter ProductID="4 C" w:st="on">4 C</st1:metricconverter>, durante las 24 horas previas al estudio.<sup>18,19</sup> </span></p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Para comparar los resultados obtenidos entre las muestras que se expusieron a <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> y aquellas en que no se us&oacute; este producto, se utiliz&oacute; la prueba estad&iacute;stica t de Student para muestras pareadas. Se utiliz&oacute; como nivel de significaci&oacute;n una p &lt; 0,05. </span></p>      <p><o:p>&nbsp;</o:p></p>      <p><b><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Bio&eacute;tica </span></b></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>A los pacientes y a los donantes se les explic&oacute; el objetivo del estudio, los posibles beneficios derivados de los resultados y la ausencia de riesgos asociados. Se confeccion&oacute; una planilla para el consentimiento informado de los donantes y enfermos que participaron en el estudio.</span> </p>      <p>&nbsp; </p>      <p><b><span style='font-family:Verdana'>RESULTADOS </span></b></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Al comparar la formaci&oacute;n de RE y RA, as&iacute; como el porcentaje de los niveles de expresi&oacute;n de los ant&iacute;genos de membrana CD2 y CD3 entre los linfocitos estimulados con MR y sin esta, no se hallaron diferencias estad&iacute;sticamente significativas de los donantes ni en los enfermos con diagn&oacute;stico de inmunodeficiencia celular (<a href="/img/revistas/hih/t0108212.gif">tablas 1</a> y <a href="/img/revistas/hih/t0208212.gif">2</a>). Similares resultados fueron hallados con la prueba de FF de los neutr&oacute;filos de los donantes y enfermos (<a href="/img/revistas/hih/t0308212.gif">tabla 3</a>). </span></p>      <p>&nbsp; </p>      <p><b><span style='font-family:Verdana'>DISCUSI&Oacute;N </span></b></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Se han realizado estudios con MR en animales que han demostrado su efecto como antiinflamatorio, espasmol&iacute;tico, ansiol&iacute;tico, y su efecto sobre los linfocitos y como inmunomodulador.<sup>20-22</sup> </span></p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>En nuestro estudio se observ&oacute; que en las condiciones experimentales utilizadas, <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> no ejerce efecto inmunomodulador <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vitro</i> sobre los linfocitos y neutr&oacute;filos de individuos sanos y en enfermos con inmunodeficiencia celular. </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Estos resultados no coinciden con lo hallado en estudios <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vivo</i> en animales a los que se les inyect&oacute; un extracto de MR e indujo el aumento de leucocitos en sangre perif&eacute;rica y de la celularidad de la m&eacute;dula &oacute;sea. Tambi&eacute;n la administraci&oacute;n oral o parenteral de heteropolisac&aacute;ridos de MR en animales de experimentaci&oacute;n, parece normalizar la respuesta inmune despu&eacute;s de la inmersi&oacute;n o el enfriamiento. Se ha reportado que <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> aumenta la formaci&oacute;n de roseta T en pacientes inmunodeficientes.<sup>20-22</sup> </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>La diferencia observada en nuestros resultados podr&iacute;a deberse a que nuestro estudio explora la acci&oacute;n del MR <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vitro</i> y los resultados referidos fueron obtenidos <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vivo</i>. </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>En la literatura revisada no hemos hallado el estudio del efecto <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vitro</i> de <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> sobre los linfocitos y neutr&oacute;filos de enfermos con diagn&oacute;stico de inmunodeficiencia celular e individuos sanos. </span></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Teniendo en cuenta que <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> es una planta medicinal que puede constituir una alternativa m&aacute;s de tratamiento como inmunomodulador, consideramos que se debe continuar trabajando en estudios precl&iacute;nicos y cl&iacute;nicos <i style='mso-bidi-font-style:normal'>in vitro</i> mediante citometr&iacute;a de flujo, para el estudio de otras mol&eacute;culas de activaci&oacute;n y la proliferaci&oacute;n linfocitaria, as&iacute; como realizar ensayos cl&iacute;nicos que permitan conocer el papel de <st1:PersonName ProductID="la MR" w:st="on">la MR</st1:PersonName> sobre otros elementos de la respuesta inmunol&oacute;gica y su potencial terap&eacute;utico como inmunomodulador. </span></p>      <p><o:p>&nbsp;</o:p></p>      <p><b><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Agradecimientos </span></b></p>      <p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>A la Lic. <i style='mso-bidi-font-style:normal'>Ana Iris Gonz&aacute;lez</i> y a las t&eacute;cnicas <i style='mso-bidi-font-style:normal'>Martha Ponce Sandoval</i> y <i style='mso-bidi-font-style:normal'>Yamila Junco Gonz&aacute;lez</i>, por la colaboraci&oacute;n brindada en la realizaci&oacute;n de este trabajo. </span></p>      <p>&nbsp; </p>      <p><b><span style='font-family:Verdana'>REFERENCIAS BIBLIOGR&Aacute;FICAS </span></b></p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>1. Roig JT. Plantas medicinales, arom&aacute;ticas o venenosas de Cuba. 2 ed. <st1:PersonName ProductID="La Habana" w:st="on">La Habana</st1:PersonName>: Ciencia y T&eacute;cnica; 1988. p. 614-9.     </span></p>      <!-- ref --><p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>2. Plantas medicinales. Fitomed II. <st1:PersonName ProductID="La Habana" w:st="on">La Habana</st1:PersonName>: Ciencias M&eacute;dicas; 1991. p. 21-3.     </span></p>      <!-- ref --><p><span lang=EN-GB style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana;mso-ansi-language: EN-GB'>3. Rodr&iacute;guez L, Reyes J, Burchield S, Herrera D, Torres E. Risks and benefits of Commonly used Herbal Medicines in Mexico. </span><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>Toxicol Appl Pharmacol. 2008 Feb;227(1):125-35.     </span></p>        <!-- ref --><p><span style='font-size:10.0pt;font-family:Verdana'>4. 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