Estudio de un método de desadsorción de los componentes de VA–MENGOC–BC® para el control de calidad por HPLC.

Recovery of Salmonella sp. preserved by a simple method at room temperature.

Aida Yaima Merchán Milia y Matilde Cuevas Valdespino

Instituto Finlay. Centro de Investigación-Producción de Vacunas y Sueros. Ciudad de La Habana. Cuba. E-mail: mcuevas@finlay.edu.cu

RESUMEN

En estos momentos en que la vacunación masiva se impone como la alternativa más promisoria en la práctica médica para el control de la enfermedad meningocócica, la caracterización exhaustiva de cada uno de los componentes que conforman la vacuna VA–MENGOC–BC®, ofrece una información de extraordinaria importancia para enfocar las estrategias de producción y mejoramiento de la misma. Recientemente se ha promovido una tendencia mundial de eliminar el tiomersal de las formulaciones vacunales, por lo que en este trabajo se propone una metodología de desadsorción, que permite el posterior análisis cromatográfico y comparación de muestras del producto final VA–MENGOC–BC® con y sin tiomersal para estudiar la posible afectación de sus componentes activos. Se estudiaron tres lotes de vacuna en tiempo 0, almacenadas de 2°C a 8°C, a los cuales se les aplicaron diferentes variantes de desadsorción. Se demostró que la solubilización del gel de hidróxido de aluminio con HCL para la liberación del complejo vacunal nativo no es posible, y que el método de desadsorción más eficiente para el estudio cromatográfico de los antígenos constituyentes de la vacuna, con el cual se logra un 20% de desadsorción, queda establecido de la forma siguiente: el precipitado obtenido de 3 mL de vacuna se resuspende en 2 mL de solución amortiguadora de fosfato 5 mM, pH 7,2–7,3, se incuba 2 h a 4°C, se centrifuga y se colecta el sobrenadante.

Palabras claves: desadsorción; antígenos; vacuna

Thirty environmental strains of Salmonella sp., maintained as secondary reference strains in the Microbial Culture Collection of the National Institute of Hygiene, Epidemiology and Microbiology of Cuba, were studied in order to verify their viability and phenotypic characteristics after preservation in semisolid media since 1980. Of these strains, 96,7% were found viable, showing a survival of more than 12 years with good viability levels (106-108 ufc/mL) and 95,2% of their physiological properties preserved. This media allowed the preservation of Salmonella sp. strains with good results, suggesting its use as a simple method in laboratories with limited resources.

Keywords: Salmonella, room temperature, semisolid conservation media, viability.

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REFERENCIAS

1. Ortiz E., Alvarez DM., Riverón L., Frías M. Influencia del sexo y el peso de ratones BALB/c en la obtención de Anticuerpos Monoclonales. Revista Salud Animal. 1996; 18: 83-85.

2. Perryman LE., Mason PH. Production of Monoclonal Antibodies in Horses. Monoclonal Antibody. Current Protocols in Immunology. 1995, l:45.

3. Abbas AK., Lichtman, AH and Pober JS. Anticuerpos y Antígenos. Capítulo 3 en: Inmunología Celular y Molecular. Segunda Edición. Madrid. Interamericana. McGraw-Hill 1995:38-71.

4. Statistical Package Scientific System, SPSS for Windows, Released 5.0.1, License # 651544. October 9, 1992. SPSS Inc.

5. Sinkovics JG., Dreesman GR. Monoclonal antibodies of hybridomas. Review of Infectious Diseases. 1983; 18:9-34.

6. Potter M., Robertson CL. Development of plasma-cell neoplasm in BALB/c mice after intraperitoneal injection of paraffin-oil adyuvant, heat-killed Staphylococcus mixture. J. Nat. Cancer Inst.1960; 25:847-861.

7. Mc Guill, MW.; Rowan AN.. Refinement of Monoclonal Antibody Production and Animal Wellbeing. ILAR NEWS.1989; 31:7-11.

8. Gavilondo J. Aspectos básicos y avances recientes en la tecnología de producción de Anticuerpos Monoclonales. Interferón y Biotecnología. 1987; 4:1-16.

9. IFFA CREDO. Animaux de Laboratories. Institute Francais de la Fievre aphteuse-Centre de recherche et d'elevage du domaine des oncins Lyon, France. 1986.

10. Fuentes D., González R., Arroyo R. Influencia del sexo y la edad de ratones BALB/c en la producción de líquido ascítico rico en Anticuerpos Monoclonales. Revista Salud Animal. 2002; 23:62-64.

11. Gavilondo J.V. Anticuerpos Monoclonales. Ciudad de la Habana. Editorial Elfos Scientiae. 1995.

12. Castillo R. y Gavilondo JV. Producción in vivo de Anticuerpos Monoclonales. En: Curso postcongreso Tecnología de Obtención y Producción de Anticuerpos Monoclonales Murinos. La Habana, 1989.

13. Robbins SL., Cotrans RS. Patología estructural y funcional. Segunda parte. Tercera Edición. Edición Revolucionaria 1988.

14. Rowlatt C., Chesterman FC. Tumours of the intestines and peritoneum. In: Turusov, V.S., ed., Pathology of tumours in Laboratory Animals Vol. 2 (Tumours of the mouse), International Agency for Research on Cancer, Lyon.1990: 169-192.