ARTÍCULO ORIGINAL

Staphylococcus aureus y la detección de portadores entre el personal que labora en la producción de parenterales

^I Laboratorios Liorad. La Habana, Cuba.
^II Laboratorio de Control Microbiológico. La Habana, Cuba.

En la producción de medicamentos estériles el personal se considera la principal fuente de contaminación, teniendo en cuenta los microorganismos y las partículas no vivientes que esparcen. El objetivo de nuestro trabajo es la detección de portadores de Staphylococcus aureus entre el personal que labora en la producción de parenterales, a quienes se les realizaron exudados nasofaríngeos. Se aislaron 50 cepas, de las cuales 6 fueron identificadas como este microorganismo, lo que representa el 12 %. Se aislaron además otros microorganismos a los que se les considera gérmenes patógenos por alojarse en esa zona. Los resultados obtenidos corroboran que es de suma importancia realizar este tipo de muestreo como parte del monitoreo del personal que labora en las áreas clasificadas de producción de formulaciones inyectables.

Palabras clave: Staphylococcus aureus, exudados nasofaríngeos, gérmenes patógenos.

Staff is the main cause of contamination in aseptic drug production process, due to microorganism and non viable particles. The goal of this paper is to isolate staphylococcus aureus strain from the staff working in clean rooms. Nasopharyngeal swabs were performed on this staff. 50 strains were isolated. Six were sthaphylococcus aureus, (12 %). Other microorganisms were isolated which are considered pathogen germens since they are located in the area. Results express how important personnel monitoring is as parts of the Environmental Monitoring Program in the Pharmaceutical Industry, mainly in aseptic process.

Key words: Staphylococcus aureus, nasopharyngeal swabs, pathogen germens. ]]>

INTRODUCCIÓN

Las infecciones causadas por Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SARM) viene observándose desde la década de 1960.¹ Aunque en un principio este patógeno estaba relacionado casi exclusivamente con infecciones de origen nosocomial o asociadas a contactos con el sistema sanitario, en los últimos años ha habido un incremento de este tipo de infecciones adquiridas en la comunidad en pacientes sin factores de riesgo conocidos.^2-5

El estado de portador facilita la persistencia de S. aureus en el organismo. La localización más frecuente es el vestíbulo nasal, que constituye el reservorio de S. aureus en el individuo.^6,7 Es importante considerar la presencia de estas cepas de origen comunitario, con el fin de elaborar estrategias para su correcto tratamiento.^8,9 Esta situación se ha informado en varios países, donde las infecciones por Staphylococcus aureus meticilina resistente adquiridas en la comunidad (SAMR-C) se presentaron principalmente en jóvenes sin patologías previas.^10,11

En Cuba se realizó un estudio descriptivo puntual para la búsqueda de portadores nasales de cepas de Staphylococcus aureus resistentes a la meticilina (SARM), entre niños hospitalizados y niños sanos de la comunidad.¹² Los resultados obtenidos son similares a los descritos en la literatura en estudios realizados en niños y en personas en edades geriátricas.^13-15

El incremento de los reportes de SARM en la comunidad pone en evidencia cambios en la epidemiología de estas cepas,^16,17 y ante estos, las instituciones de salud deben perfeccionar la vigilancia y las medidas de control para prevenir las infecciones producidas por cepas de SARM, dentro de las cuales la búsqueda activa y la localización de los portadores nasales contribuyen significativamente a la prevención.^18-20

La producción de medicamentos estériles requiere de un alto grado de rigor técnico para prevenir la introducción de contaminantes en los lotes de productos.²¹ Es completamente esencial que el personal que trabaja en áreas clasificadas de producción de medicamentos estériles, el cual se considera la principal fuente de contaminación, no sea portador de agentes patógenos, para evitar así la contaminación cruzada hombre-producto.²²

Es por eso de suma importancia conocer la prevalencia de portadores nasales de S. aureus entre el personal que labora en la producción de parenterales y analizar el espectro de sensibilidad de los aislamientos a diferentes antimicrobianos, para confirmar la presencia de SARM mediante técnicas de detección rápida.^23-26

El objetivo de este trabajo es la detección de portadores de Staphylococcus aureus entre el personal que labora en la producción de parenterales en los laboratorios Liorad.
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MÉTODOS

Para la realización del trabajo se tuvo en cuenta a todo el personal que labora en las áreas de producción. El período de estudio abarcó un año y la toma de muestra se realizó con una frecuencia semestral. Se emplearon hisopos estériles, que se frotaron suavemente contra las paredes de las fosas nasales y en ambos lados, y en la parte superior de la faringe.²³

Para el análisis de las muestras tomadas se siguió lo establecido en las regulaciones vigentes. Se sembraron en placas petri que contenían medio Agar Base Sangre, estriando con el asa para obtener colonias aisladas para su identificación. Se observaron las características morfológicas de los distintos aislamientos y a las presuntas colonias de Staphylococcus se les realizó una coloración de Gram, buscando sus características tintoriales.²³

Se procedió a la identificación, para lo cual se empleó un test de diagnóstico e identificación Liofilchem de Italia System Stafilococchi; se resuspendieron las colonias a identificar en 5 mL de solución salina estéril al 0,85 % y de esa suspensión se trasfirió 0,2 mL (200 UL) a los pocitos del test de identificación, donde se encuentran las pruebas bioquímicas y se procedió a su incubación de 18-24 horas a una temperatura de 35 ± 2 ^oC.²⁴

Una vez transcurrido el período de incubación se procedió a la lectura por cambios de coloración. Los resultados se dividieron en grupos, según indican el test diagnóstico. A las primeras pruebas de respuestas positivas de cada grupo se le dio valor 1; a las segundas valor 2 y a los terceros valores 4, así como valor 0 a las respuestas negativas hasta formar un código numérico, que se introdujo en un programa informático, lo que permitió de modo rápido y efectivo llegar a la identificación hasta especie.²⁴

Para la determinación de la susceptibilidad a antibióticos, a todas las cepas identificadas como S. aureus se les determinó la susceptibilidad a diferentes antimicrobianos, mediante el método de difusión en agar. Se utilizaron en la prueba los antibióticos siguientes: penicilina (10 U), tetraciclina (30 µg), eritromicina (15 µg), gentamicina (10 µg), oxacilina (4 µg), ciprofloxacina (5 µg), ceftriaxona (30 µg). Como control se utilizó una cepas S. aureus de referencia. Se confirmó la presencia de SARM mediante la técnica de aglutinación de látex.^25,26

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RESULTADOS

Como muestra la figura, los resultado de los exudados nasales tomados al personal que labora en las áreas de producción reflejan que se obtuvieron 50 cepas aisladas, de las cuales 6 fueron identificadas como S. aureus (12 %); 40 respondían a flora normal, es decir, las personas a las que se les realizó la toma de muestra no eran portadoras de gérmenes patógenos, lo que representa el (80 %). Se aislaron además otras cepas de microorganismos, a los que se les considera patógenos por alojarse en la zona nasofaríngea; 2 cepas de Streptococcus ß hemolítico (4 %), 1 de Haemophilus influenzae (2,0 %) y 1 cepa de Klebsiella pneumoniae (2,0 %).

Los resultados de la determinación del carácter de drogo-sensibilidad o drogo-resistencia (susceptibilidad a antimicrobianos) que poseen los microorganismos aislados evidenciaron que del total de las cepas de S. aureus aisladas a partir de exudados nasales obtenidos de personas sanas que laboran en el área de producción, todas y cada una de las cepas aisladas presentaron una resistencia elevada para la penicilina y todas fueron productoras de ß-lactamasa; 3 de las cepas, además, mostraron resistencia a la eritromicina y a la tetraciclina y una susceptibilidad intermedia para la ciprofloxacina y la ceftriaxona. Se observó también en este grupo 1 cepa con susceptibilidad intermedia para ceftriaxona, pero no para ciprofloxacina y, aunque en menor proporción, también mostraron resistencias a otros antimicrobianos probados, como a la gentamicina; 1 cepa mostró una tolerancia elevada hasta 4 µg/mL de oxacilina, y se confirmó mediante la técnica de aglutinación de látex el aislamiento de SARM.

En los casos que resultaron positivos se comunicó por escrito el germen aislado y la sensibilidad de los microorganismos a los antibióticos probados. Se les orientó acudir a su médico de familia para la elección del tratamiento bajo prescripción médica.

DISCUSIÓN

De acuerdo con la información ofrecida por los exudados nasofaríngeos, se determinó que de forma asintomática se presentó un número de personas portadoras de este germen patógeno aislados del exudado nasal. Este resultado coincide con otros autores que reportan que la localización más frecuente es el vestíbulo nasal.^{6, 7}

El mayor porcentaje se corresponde con cepas de Staphylococcus aureus y una pequeña proporción de ellos eran resistentes a la meticilina (1,6 %) resultado que se encuentra en el rango inferior de casi todos las estudios revisados.^8-10 Sin duda, esto se corresponde con la población estudiada, que resultó pequeña en proporción con los grupos de estudios reportados en la literatura que incluyen estudios poblacionales.^1-3

Aunque muchos autores sugieren que para identificar SARM es más conveniente detectar directamente el gen determinante que codifica la resistencia a la meticilina (mecA) o bien su producto (PBP2a), el procedimiento empleado para el aislamiento e identificación de este microorganismo^23,24 nos permitió de forma presuntiva plantear que nos encontrábamos frente este tipo de cepa. La susceptibilidad a diferentes antimicrobianos, mediante el método de difusión en agar,²⁵ fue un paso determinante en el diagnóstico de esta cepa. La prueba de aglutinación de látex sobre soporte resultó una técnica sencilla que aportó resultados de fácil interpretación en un tiempo máximo de 20 minutos, con una sensibilidad y una especificidad del 100 %. De manera confirmativa se pudo plantear que nos encontrábamos frente a un aislamiento SARM, por lo que se concluye que la aplicación de esta técnica resultó válida.²⁶

Los elevados valores de resistencias encontradas frente a estos antibióticos coinciden con lo reportado por otros autores para cepas aisladas a partir de exudados obtenidos de personas sanas que se encuentran fuera del personal asociado a contactos con el sistema sanitario, es decir, en personas de las distintas comunidades estudiadas sin factores de riesgo conocidos.^4,5,11

El incremento de SARM en la comunidad se ha notificado en diferentes países y áreas geográficas.^16-18 Resulta de interés señalar que en nuestro estudio una posible causa de aparición de este tipo de cepa puede relacionarse con que el portador de esta había recibido antibióticos previamente, lo que coincide con criterios de otros autores que refieren que S. aureus es más prevalente entre las personas que han sido tratadas con estos. Independientemente de los resultados obtenidos no se debe dejar de hacer referencia a lo que señalan algunos estudios en cuanto al incremento de esta cepa, que está siendo cada vez más importante en la población sana.^19,20

Por otro lado, en este estudio no se obtuvo ninguna cepa de S. aureus a partir de los exudados faríngeos. Algunos autores consideran que es necesaria la obtención de más de un tipo de exudado cuando se realizan estudios para la localización de portadores de SARM. En menor cuantía se aislaron otras cepas de microorganismos patógenos, resultado a tener en cuenta también para la incorporación de este personal a las áreas limpias de producción de medicamentos estériles, porque pueden ser fuentes de contaminación a los productos, lo cual pudiera acarrear consecuencias fatales, ya que los medicamentos deben contener únicamente los ingredientes que figuran en su formulación.^23,26

Los resultados obtenidos en este trabajo se suman a las evidencias que señalan que las cepas de estafilococos no se pueden ver como un patógeno limitado al ambiente hospitalario;^12-15 por tanto, es de suma importancia realizar como parte del monitoreo del personal que labora en las áreas clasificadas de producción de medicamentos parenterales exudados nasofaríngeos en busca de portadores de esta cepa.²⁴

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Recibido: 14 de abril de 2011.
Aprobado: 20 de septiembre de 2011.



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MSc. Nancy Burguet Lago. Laboratorios Liorad. Ave 27A entre 264 y 268, San Agustín, Municipio La Lisa, La Habana, Cuba. Correo electronico: nburguet@liorad.quimefa.cu