Caridad M. García Peña,1Rafael Diego León,2 Mirta Castiñeira Díaz,3 Mirna Fernández Cervera3 y Vivian Martínez Espinosa4
Se desarrolló el estudio de estabilidad de las tabletas de clonazepam 2 mg sin lactosa y se determinó su fecha de vencimiento. Este estudio se realizó por los métodos de vida de estante y de estabilidad acelerada mediante cromatografía líquida de alta eficiencia, desarrollados y validados en el Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos. El estudio de vida de estante se desarrolló por un periodo de 24 meses a temperatura ambiente; mientras que el estudio de estabilidad acelerada se efectuó sometiendo el producto a la influencia de la luz, la humedad y la temperatura; se realizó el análisis durante 3 meses, para los 2 primeros y durante 6 meses para el estudio de la temperatura. La formulación de clonazepam tabletas 2 mg sin lactosa cumplió con las especificaciones de calidad descritas en la farmacopea. Los resultados del estudio de estabilidad por vida de estante después de transcurridos los 24 meses indican que el producto mantiene los parámetros que determinan su calidad durante ese tiempo, y en los estudios acelerados no se observó degradación significativa del producto. Se establece 2 años como fecha de vencimiento en las condiciones señaladas.
Palabras clave: Clonazepam, estudio acelerado, vida de estante, cromatografía líquida de alta eficiencia.
El clonazepam es una benzodiazepina que actúa en general como depresores del sistema nervioso central (SNC), y produce todos los niveles de depresión de este, desde una leve sedación hasta hipnosis o coma en dependencia de la dosis. Está indicado para el tratamiento solo o, como coadyuvante en la mayoría de las formas clínicas de la epilepsia, particularmente las ausencias típicas y atípicas. Útil en el tratamiento de la epilepsia infantil, crisis mioclónicas y de ausencia. En las encefalopatías epilépticas crónicas del niño: llámese síndrome de West o síndrome de Lennox-Gastaut, así como en la epilepsia crónica parcial; las crisis focales y las crisis complejas del adulto. Se indica también para el tratamiento del desorden o trastorno de pánico.1-3
Su nombre genérico del principio activo, pero el nombre químico es 2H-1,4 benzodiazepin-2-ona-5-(2-clorofenil)-1,3-dihidro-7nitro, la fórmula global y el peso molecular son C15H10ClN3O3 y 315,72, respectivamente. En la figura se muestra la fórmula estructural del principio activo, este producto debido a su estructura química es susceptible a degradaciones por hidrólisis y por exposición a la luz.4-6
Fig. Fórmula estructural del clonazepam.
La estabilidad de los productos farmacéuticos representa un importante eslabón en el desarrollo y formulación de toda forma terminada. De esta manera podemos definir las condiciones de almacenamiento en el envase propuesto y establecer la vida útil del producto farmacéutico. Estos estudios contemplan la conservación de la potencia, pureza, características organolépticas y su efectividad.7
El Centro para el Control Estatal de los Medicamentos (CECMED) exige para el registro un nuevo medicamento la realización de los estudios de estabilidad. En el presente estudio se empleó un método analítico desarrollado y validado en el Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos (CIDEM) para el estudio de estabilidad del producto debido a que en la USP 27 se realiza el análisis de valoración y disolución con condiciones cromatográficas diferentes; aunque existen otros métodos cromatográficos reportados para el análisis de clonazepam en diferentes formas farmacéuticas.8
Dado que en nuestro país existen pacientes que necesitan el clonazepam para su tratamiento pero son intolerantes a la lactosa, por este motivo se decidió realizar la formulación de tabletas de clonazepam que no contengan como excipiente esta sustancia auxiliar, el presente trabajo tuvo como objetivo realizar el estudio de estabilidad de una formulación de tabletas de clonazepam 2 mg sin lactosa y determinar su fecha de vencimiento.
Para el desarrollo de este estudio se empleó como materia prima el clonazepam, perteneciente al lote 20010203 del fabricante Nuzhou shwa, la cual fue analizada siguiendo las especificaciones de calidad descritas en la monografía de la USP 27.9
Este estudio se realizó por los métodos de vida de estante y estabilidad acelerada. Se emplearon muestras de los lotes 3001, 3002 y 3003, producidos en el Laboratorio de Formas Terminadas del CIDEM y envasados en frascos plásticos de polietileno de alta densidad, Formato F-6, con cierre hermético y anillo de inviolabilidad.
En el estudio se empleó un cromatógrafo (KNAUER) con detector UV/VIS (KNAUER) ajustado a 254 nm, un dosificador (Loop) de 50 μL e integrador (SHIMADZU CR 8 A). La separación se realiza isocráticamente sobre una columna Lichrospher 100, RP-18 (5 µm). La fase móvil consistió en una mezcla desgasificada de solución de fosfato de amonio anhidro dibásico a pH= 8,0:metanol:tetrahidrofurano (60:52:13) con una velocidad de flujo de 1,0 mL/min.9
En los estudios de estabilidad acelerada, se almacenaron las muestras de los lotes estudiados en un horno a temperatura controlada de 40 ºC y 75 % de humedad relativa, se valoraron al inicio, al mes, a los 2, 3 y 6 meses. Además se realizaron los estudios de humedad (frascos cerrados, 98 % humedad relativa) y de la luz (frascos cerrados a luz natural); se analizaron al inicio y a los 3 meses, con el objetivo de determinar la estabilidad del medicamento ante el efecto de la luz y la humedad, así como la efectividad del envase empleado.7
En el estudio de estabilidad por vida de estante, los lotes estudiados se almacenaron a temperatura ambiente (30 ºC) y protegidos de la luz; se valoraron al inicio, a 3, 6, 9, 12, 18 y 24 meses de fabricados.7
Los resultados del estudio de estabilidad acelerada a 40 ºC y 75 % de humedad relativa (HR), correspondientes a los lotes 3001, 3002 y 3003, se reportan en la tabla 1.
]]> Tabla 1. Estudio de estabilidad acelerada a 40 ºC y 75 % de HR| Parámetros | Tiempo | LOTES | Límites | ||
| 3001 | 3002 | 3003 | |||
| ]]> Características organolépticas | 0 | Responde | Responde | Responde |
Tabletas ranuradas de color blanco |
| 1 | Responde | Responde | ]]> Responde | ||
| 2 | Responde | Responde | Responde | ||
| 3 | Responde | Responde | Responde | ||
| 6 | ]]> Responde | Responde | Responde | ||
|
Disolución |
| 106,9 105,9 | ]]>
105,4 106,3 106,2 106,1 105,9 107,1 | 106,0 102,9 |
Debe disolverse no menos del 80 % de la cantidad teórica declarada en 60 min |
|
| 101,3 103,1 | 102,1 103,1 | 102,1 103,1 | ||
| ]]>
2 | 103,4 101,6 | 103,0 103,0 | 103,0 103,0 | ||
|
| 104,1 103,9 | 103,9 102,2 | 104,3 105,2 | ||
|
| 102,6 104,3 | ]]>
103,4 105,6 99,8 99,3 97,4 98,2 | 98,7 99,4 | ||
|
Valoración | 0 | 107,1 | 106,4 | 104,4 |
90,0-110,0 % |
| ]]> 1 | 107,0 | 106,0 | 103,9 | ||
| 2 | 106,6 | 104,9 | 102,1 | ||
| 3 | 104,9 | ]]> 103,2 | 101,8 | ||
| 6 | 104,8 | 102,3 | 100,5 | ||
Los resultados del estudio de humedad en frasco cerrado y a 98 % de HR, que se realizaron a temperatura controlada, se reflejan en la tabla 2.
Tabla 2. Estudio de humedad del producto en frascos cerrados y a 98 % de humedad relativa
| Parámetros | Tiempo | ]]> Lotes | ||
| 3001 | 3002 | 3003 | ||
| Características | 0 | Responde | Responde | Responde |
| 3 | ]]> Responde | Responde | Responde | |
|
Disolución |
| 106,9 105,9 | 105,4 106,3 | 106,0 102,9 |
|
| ]]>
105,1 100,3 104,7 102,3 103,7 104,2 | 104,8 105,3 | 105,9 104,3 | |
| Valoración | 0 | 107,1 | 106,4 | 104,4 |
| 3 | 104,9 | ]]> 105,4 | 103,2 | |
Los resultados del estudio de la influencia de la luz, se reportan en la tabla 3.
Tabla 3. Estudio a la luz natural
| Parámetros | Tiempo | Lotes | ||
| 3001 | 3002 | 3003 | ||
| ]]>
Características organolépticas | 0 | Responde | Responde | Responde |
| 3 | Responde | Responde | Responde | |
| ]]> Disolución (%) |
| 106,9 105,9 | 105,4 106,3 | 106,0 102,9 |
|
| 106,3 104,9 | 104,1 105,2 | 104,9 102,3 | |
| Valoración | ]]> 0 | 107,1 | 106,4 | 105,4 |
| 3 | 104,9 | 105,4 | 104,4 | |
Los resultados del estudio de vida de estante, al inicio, 3, 6, 9, 12, 18 y 24 meses, se muestran en la tabla 4.
Tabla 4. Estudio de vida de estante
| ]]> Parámetros | Tiempo | Lotes | ||
| 3001 | 3002 | 3003 | ||
|
Características | 0 | Responde | ]]> Responde | Responde |
| 3 | Responde | Responde | Responde | |
| 6 | Responde | Responde | Responde | |
| ]]> 9 | Responde | Responde | Responde | |
| 12 | Responde | Responde | Responde | |
| 18 | Responde | ]]> Responde | Responde | |
| 24 | Responde | Responde | Responde | |
|
]]> Disolución |
| 106,9 105,9 | 105,4 106,3 | 106,0 102,9 |
|
| 104,1 106,1 | 103,1 104,9 | 100,9 102,3 | |
| ]]>
6 | 104,7 105,3 | 100,9 102,3 | 100,2 99,7 | |
|
| 105,1 105,8 | 105,9 105,4 | 100,7 104,8 | |
|
| 97,3 103,3 | ]]>
98,9 100,4 97,4 105,8 105,3 102,8 | 103,6 97,3 | |
|
| 100,4 99,2 | 99,4 100,9 | 99,1 99,9 | |
|
| 1034 101,9 | 103,0 102,0 | 94,3 102,3 | |
| ]]>
Valoración | 0 | 107,1 | 106,4 | 104,4 |
| 3 | 105,4 | 104,3 | ]]> 104,1 | |
| 6 | 104,8 | 103,9 | 103,6 | |
| 9 | 103,8 | 103,6 | 101,6 | |
| 12 | ]]> 100,9 | 101,9 | 100,4 | |
| 18 | 99,7 | 100,2 | 99,4 | |
| 24 | 99,3 | 99,4 | ]]> 99,1 | |
La selección del envase utilizado se realizó teniendo en cuenta las características del producto y el envase empleado en las tabletas de clonazepam con lactosa que actualmente se fabrican en nuestro país y que fueron desarrolladas en el CIDEM, a las cuales se le realizó un estudio de estabilidad en frascos plásticos y en blister, para lo cual se sometió el producto envasado en estas condiciones, como: luz, humedad y temperatura por un periodo de 3 meses.
El conjunto de los resultados obtenidos en el estudio de estabilidad acelerada a 40 ºC y 75 % de humedad relativa, demuestran la estabilidad del producto. Durante el período evaluado, los 3 lotes analizados mantienen las características organolépticas, la disolución y la valoración. Se demostró la estabilidad térmica del producto ya que después de transcurridos 6 meses se mantuvo la concentración conforme con los límites establecidos en las especificaciones de calidad del producto terminado.
En el tiempo de duración del estudio de humedad, los 3 lotes analizados del producto mantienen los parámetros analizados dentro de los límites establecidos, por lo que se demuestra la estabilidad de la formulación ante estos efectos y la efectividad del envase seleccionado para la formulación.
Por otra parte, los resultados obtenidos de la valoración de las muestras sometidas al efecto de la luz probaron que el tratamiento no alteró el contenido de principio activo en las tabletas a los 3 meses de realizado el estudio, ya que como se observa en la tabla 3, el medicamento no presentó cambios en los valores de valoración, disolución ni en las características organolépticas.
De los resultados mostrados en la tabla 4 se infiere que el producto mantiene los parámetros que determinan su calidad, tanto en su etapa inicial como transcurridos 3, 6, 9, 12, 18 y 24 meses. Además, no se observan cambios en los aspectos organolépticos, la disolución y la valoración durante el tiempo de almacenamiento estudiado. A partir de estos resultados se proponen 2 años de validez, como tiempo de expiración, para la formulación de tabletas de clonazepam 2 mg sin lactosa empleando como material de envase los frascos plásticos de polietileno de alta densidad.
Los resultados obtenidos de los estudios de estabilidad acelerada y de vida de estante, así como de los estudios específicos realizados de humedad y de fotosensibilidad, reportados en la Regulación 16-2000 del CECMED para Buenas Prácticas de Fabricación de Productos Farmacéuticos, demostraron la estabilidad física, química y microbiológica del producto por espacio de 24 meses a temperatura ambiente, ya que en todos los casos los resultados obtenidos se encontraron dentro de los límites establecidos en las especificaciones de calidad de las tabletas de clonazepam 2 mg sin lactosa.
Study of 2 mg Clonazepam tablets without lactose was performed, and due date was determined. This study was performed by support-life method and accelerated stability by high-performance liquid chromatography, developed and validated in Drugs Research and Development Center. Support-life study was developted during 24 months to a room-temperature; whereas accelerated stability study as performed with product undergoes light, humidity, and temperature. Analysis was carried out during 3 months for two above first, and during 6 months for temperature-study. Formulation of 2 mg tablets Clonazepam meets quality specifications described in Pharmacopeia. Results of stability study for support-life after 24 months, showed that product maintains parameters determining its quality during that period, and in accelerated studies there wasn’t a significant degradation of product. Two years are stablished as due date in above mentioned conditions.
Key words: Clonazepam, accelerated study, support-life, high-performance liquid chromatography.
1. Goodman A, Gilman, A. Las bases farmacológicas de la terapéutica. Tomo II. 3ra ed. La Habana: Editorial Científico Técnica; 1994. p. 466-7. (Edición Revolucionaria).
2. AHFS Drugs Information. Geneva. 1993. p. 567-9.
3. Medical Consultant Ronald Arky MD, Charles S Dawdson CS. Pharmaceutical Drugs Reference. 49 ed. 1995. p. 1095.
4. PDR. Physicians´ Desk Reference. 57 ed. 2003. p. 332, 2905, 2193, 3270.
5. Martindale W. The extra pharmacopoeia. 28 ed. London: Pharmaceutical Press; 343.3; 1999.
6. Spell, JC. Analysis of Clonazepam in a tablet dosage form using smalbore HPLC. J Pharm Biomed Anal. 1998;18(3):453-60.
7. Regulación No. 16-2000: Buenas Prácticas de Fabricación de Productos Farmacéuticos. La Habana: Centro Estatal para el Control de Medicamentos (CECMED); 2000.
8. Spell JC. Analysis of Clonazepam in a tablet dosage form using smalbore HPLC. J Pharm Biomed Anal. 1998;18(3);453-60.
9. United States Pharmacopoeial Convention, USP 29. Validation of Compendial Methods. 29 ed. Rockville: Mack Printing; 2006. p. 1256-8, 1982-4.
Recibido: 8 de enero de 2007. Aprobado: 9 de febrero de 2007.
MC. Caridad M. García Peña. Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos (CIDEM). Ave. 26 No. 1605 entre Boyeros y Puentes Grandes. CP. 10 600. Plaza de la Revolución, La Habana, Cuba. Correo electrónico: caridad@cidem.quimefa.cu
1 Master en Tecnología y Control de Medicamentos.
2 Licenciado en Farmacia.
3 Doctora en Ciencias Farmacéuticas.
4 Técnica en Tecnología Farmacéutica.