Validación clínica del inmunoensayo rápido BioLine-hCG para el diagnóstico precoz del embarazo BioLine-hCG

RESUMEN

Descriptores DeCS: TESTS INMUNOLOGICOS DEL EMBARAZO/métodos; GONADOTROPINAS CORIONICAS/orina.

La detección de la hormona gonadotropina coriónica humana (hCG) en muestras de suero y en orina es actualmente un método bien establecido para la confirmación bioquímica del embarazo. La hCG, es una glicoproteína de aproximadamente 39,5 kD de peso molecular, que comienza a ser secretada por las células del sincitiotrofoblasto a los 7 d de haber ocurrido la concepción, desplegando su principal función sobre el cuerpo amarillo para incrementar la secreción de las hormonas ováricas; estrógeno y progesterona. Su concentración se incrementa de forma exponencial con los días de gestación, alcanza su mayor pico durante el primer trimestre por lo que se convierte en un excelente marcador del diagnóstico precoz del embarazo.^1,2

En la actualidad se han desarrollado diferentes tipos de inmunoensayos para este diagnóstico, con sensibilidades que oscilan entre 10 y 50 UI/L de hCG, tanto en muestras de suero como en orina, que se registran generalmente un día antes de pérdida de la menstruación. Dentro de estos sistemas diagnósticos se encuentran desde los más sensibles como el radioinmunoensayo (RIA), hasta el uso de técnicas rápidas, sencillas y fáciles de realizar como son las obtenidas con las tecnologías de la aglutinación³ y el Dipstick cromatográfico.⁴ Este último se basa en una migración capilar de los reactantes realizada sobre membrana de nitrocelulosa como soporte sólido, en la que se encuentran dispuestos los anticuerpos específicos anti-hCG. De estar presenta la hormona específica en la muestra de orina que se analiza, el sistema nos revela finalmente la reacción con un color determinado, apreciable a simple vista en forma de línea en el lugar donde se depositó el anticuerpo de captura.

En este trabajo presentamos los resultados alcanzados en la validación clínica del ensayo BioLine-hCG realizada por el Hospital Ginecoobstétrico de la provincia de Sancti Spiritus (HGOPSS), el cual se basa en la tecnología del dipstick cromatográfico reseñado anteriormente, con evidencias de sensibilidad y especificidad similares a los reportados por los sistemas existentes en el mercado internacional.

MÉTODOS

Examinamos los resultados de 150 muestras de orina de pacientes que asistieron a la consulta de RM con el ensayo BioLINE-hCG y los comparamos con el diagnóstico comercial ABBOTT-TestPack + Plus hCG (ABBOTT Laboratories, II. 60064, USA) utilizado como diagnóstico cromatográfico de referencia (registrado y aprobado por la FDA; USA, 1990); también registramos la valoración inferida por el ginecólogo de acuerdo con el interrogatorio, el examen físico de la paciente y los resultados histológicos de las biopsias del contenido aspirado en cada regulación. Estas últimas fueron recogidas con el equipamiento de la propia operación de regulación menstrual (Cánulas de Karman) y colocadas en frascos limpios de 5 mL de volumen, rotuladas según el orden de registro de cada paciente y enviadas al Laboratorio de Anatomía Patológica del propio hospital.

Analizamos además, 127 muestras de orina de pacientes de las consultas de interrupción (78) del HGOPSS y de Genética de la FCMSS (49) como muestras positivas y 120 muestras de orina procedentes de estudiantes y trabajadoras de la FCMSS que no presentaban síntomas de embarazo (muestras negativas).

Para ejecutar el ensayo BioLINE-hCG colocamos la tira reactiva en la muestra de orina y visualizamos el resultado transcurridos los 5 min necesarios o menos. Este era apreciable en forma de 2 líneas rosadas de ser positivo o 1 sola línea (correspondiente al control del ensayo) de ser negativo (fig.1). Así mismo para ejecutar el ensayo ABBOTT-TestPack + Plus hCG, solamente dispensamos 5 gotas de orina en el pocillo, correspondiente a la muestra y esperamos el mismo tiempo que para el ensayo BioLINE-hCG, al final del cual se apreciaba el resultado en la ventana de los resultados en forma de un signo (+) de ser positivo, o(-) de ser negativo.

El material de biopsia lo colectamos mediante la aspiración al vacío de un aspirador eléctrico modelo VACUUM, llevándola hasta 600 mm Hg de mercurio entre 2 y 6 min (según el caso tratado en el procedimiento de regulación menstrual) y lo analizamos por el método convencional de inclusión de la muestra en parafina, teñidas posteriormente con hematoxilina y eosina.⁶ Todas las muestras montadas en láminas las diagnosticamos histológicamente con microscopios de luz y posteriormente, las clasificamos según los protocolos técnicos descritos.⁶

RESULTADOS

TABLA 1. Exactitud del método diagnóstico BioLINE-hCG respecto al juego diagnóstico comercial ABBOTT

En las muestras analizadas de las pacientes que asistían a la Consulta de Interrupción y Genética, las cuales presentaban un desarrollo gestacional más avanzado, todas alcanzaron resultados positivos con el ensayo BioLINE-hCG. Así mismo todas las muestras de orina analizadas en la FCMSS a la población abierta que allí estudia o trabaja, aportaron los resultados negativos esperados para el 100 % de especificidad del ensayo.

La valoración clínica tuvo un 87,9 % de sensibilidad de este método diagnóstico, con lo cual se señala que el diagnosticador clínico es muy subjetivo ya que depende fundamentalmente de la experiencia del ginecólogo, máxime si las pacientes asisten con un proceso gestacionario muy temprano que dificulta aún más precisar el diagnóstico final.^5,7,8 Del mismo modo, el porcentaje más bajo de muestras positivas diagnosticadas fue registrado por el método del análisis histopatológico de las biopsias (tabla 2), lo cual, independientemente de las 11 muestras que no fueron viables, se reporta que ocurre por el propio acto de la regulación menstrual,⁹ ya que el óvulo fecundado se implanta en el endometrio alrededor del séptimo día de la fecundación y en estos casos la aspiración realizada recoge fundamentalmente parte del endometrio listo para recibir el embarazo, o el saco gestacional puede ser tan pequeño que no sea extraido conjuntamente con el material de estudio, por lo que se escapan muchas muestras positivas^5,9 (fig. 2). Se puede apreciar también como 11 muestras de biopsias recogidas (7,3 %) no fueron útiles para su análisis histopatológico, lo cual se corresponde con lo descrito por diferentes autores cuando se realiza la regulación en la primera consulta a todas las pacientes sin mediar prueba de embarazo.

DISCUSIÓN

Con los resultados obtenidos, demostramos la efectividad del inmunoensayo BioLINE-hCG para el diagnóstico precoz del embarazo, con el cual se puede prevenir el proceso de regulación menstrual, ya que de ser negativo el resultado, puede ser interpretado por la propia interesada de una forma rápida y sencilla y con ello evitar los riesgos que el evento puede acarrear como:

1. En la mayoría de los casos el embrión es tan pequeño que probablemente no se evacue en el primer raspado; se ha observado que el embarazo continúa en un porcentaje que varía del 1 al 5 % de las pacientes atendidas.^5,7-9
2. La infección es un riesgo en todas las operaciones obstétricas.
3. Posibles traumas en el útero o en el cérvix.¹²
4. Si la aspiración es incompleta, el sangrado puede continuar.¹³
5. Desde el punto de vista económico, el promedio de gastos por paciente es de 8,90 pesos y en los casos de legrados uterinos, el gasto es de 17,66 pesos.⁵

SUMMARY

Subject headings: PREGNANCY TESTS, IMMUNOLOGIC/methods; GONADOTROPINS, CHORIONIC/urine.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Braunstein G, Rasor J, Adler D, Danzer H, Wade M. Serum human chorionic gonadotropin levels throughout normal pregnancy. Am J Obstet Gynecol 1976;126:678-81.
]]> Hussa R. Human chorionic gonadotropin, a clinical marker: review of its biosynthesis. Ligand Rev 1981;3(Suppl 2):6-43.
2. Nurit R, Imbar M, Hexter C. Monoclonal antibody especific to the beta subunit of human chorionic gonadotropin (hCG) and capable of agglutinating hCG-coated red blood cells. Hybridoma 1984;3:49-55.
3. Davis P, Prior M, May K. Solid phase analytical device. International application published under the patent cooperation treaty (PCT). World Intellectual Property Organization. 1990;WO 90/09592.
4. Nieto A, Pérez E. Método de regulación menstrual. Análisis de un año. Tesis de Grado. 1988. Facultad de Ciencias Médicas de Sancti Spíritus.
5. Libro de Texto de Citohistopatología. 1982; t2:
6. Austin J. Diagnóstico de la patología endometrial, mediante legrado por aspiración. Actas Ginecol 1982;39:3.
7. Botella Llusiá J, Clavero Núñez J. Ginecología 13 ed. Barcelona:1984;2-3.
8. Harvey K, Potts M. Early ambulatory termination of pregnancy techniques and results. 1974. Paris.
9. Registro de Diagnosticadores. Centro para el Control Estatal de la Calidad de los Medicamentos. Ministerio de Salud Pública. 1996;No.D9708-11.
10. Daylily S, Sherry L, Paul Claman, Henry F. Serum human chorionic gonadotrophin levels in early pregnancy. Clin Chem Act 1989;181:282-92.
]]> Dawn C. Menstrual regulation; a new procedure for fertility control. Dawn Books, 1985:
11. Miller E, Fortney J. Early vacuum aspiration. Minimizing procedures to non pregnant women. Fam Plann Perspect 1976;8:33-8.

Lic. Edel Torres Gómez. Guairo No. 13 entre Plácido y San Miguel, Sancti Spíritus, Cuba. ]]> 1976 126 678-81 1981 3 ^s2 ^s2 2 6-43 1984 3 49-55 1990 1982 1982 39 3 1984 13 2-3 1974 1996 1989 181 282-92 1985 1976 8 33-8