RESUMEN

INTRODUCCION

En los pacientes con FQ, debido a la viscosidad de las secreciones, las bacterias inhaladas pueden adherirse y multiplicarse, sin que haya una respuesta por parte del organismo (respuesta inflamatoria) ni manifestaciones clínicas de la enfermedad, a esto se le denomina colonización, pero si hay una elevación de anticuerpos antiPseudomona aeruginosa como respuesta inflamatoria, estamos en presencia de una infección por esta bacteria. Los mecanismos inmunológicos tanto específicos como inespecíficos desempeñan un papel en relación tanto con la colonización como con la infección de los pacientes con FQ que se ponen en contacto con Pseudomonas aeruginosa.² Las precipitinas contra Pseudomonas aeruginosa se elevan cuando la infección es causada por la variedad mucoide y en pacientes con pobre pronóstico se han observado títulos altos.¹ También se han observado pacientes con títulos elevados de IgG contra Pseudomonas aeruginosa en pacientes con infección reciente y que al recibir tratamiento antiPseudomonas los títulos retornaron a la normalidad³ Cordon, et al.⁴ señalan que títulos de IgG antiPseudomonas elevados po-drían ser usados para detectar infección en pacientes que son incapaces de espectorar y como posible indicador de efectividad de un tratamiento antiPseudomona.

La respuesta inmune a los distintos componentes antigénicos de Pseudomonas aeruginosa ha sido estudiada desde los años 60 por diversos autores. Los métodos utilizados han sido múltiples, entre éstos los que detectan precipitinas y aglutininas. En los últimos años, distintos métodos donde se aplica alta tecnología como es el radioinmunoensayo y el ELISA se han aplicado en estos enfermos con el propósito de estudiar los anticuerpos específicos a Pseudomonas aeruginosa.¹

La hemoaglutinación pasiva es uno de los métodos inmunológicos más sensibles capaz de detectar una cantidad mínima de anticuerpos de 0,001 a 0,006 mg de N/mL.

Nos proponemos con este trabajo comenzar el estudio de la respuesta inmune a los componentes antigénicos de Pseudomona aeruginosa en pacientes con FQ, en las distintas etapas de su enfermedad.

MATERIAL Y METODO

Los pacientes fueron atendidos durante su etapa de internación en el Hospital y en la consulta de seguimiento de esta enfermedad, la cual está establecida con una frecuencia semanal.

El diagnóstico se realizó por las manifestaciones clínicas, electrólitos en sudor por iontoforesis y estudios genéticos. La edad de los pacientes osciló entre 1 y 12 años.

A todos los pacientes se les aisló Pseudomonas aeruginosa durante 1 año o más por esputo o exudado faríngeo con hisopado profundo.

Se consideró que la infección pulmonar crónica por Pseudomonas aeruginosa se agudizaba cuando aparecían las siguientes manifestaciones: fiebre, aumento de la espectoración, aumento de la frecuencia respiratoria (FR), tiraje intercostal, estertores húmedos, disminución del apetito, disminución de su actividad física y pérdida o pobre ganancia de peso. ]]> Se consideró estable cuando no existían las manifestaciones anteriores y el paciente mantenía estable los parámetros pulmonares de acuerdo con el score de Shwanman y mantenía un desarrollo físico normal.

Se realizó el método de hemaglutinación pasiva mediante la utilización de glóbulos rojos de carnero formolizados y sensibilizados con antígeno crudo de Pseudomonas aeruginosa. Se prepararon antígenos de los serotipos del 01 al 020. El método seguido para la obtención del antígeno fue el descrito por Pitt y Erdman⁶ por extracción por calor (100^o C). En placas de microtitulación se realizaron diluciones del suero del paciente a estudiar desde 1:5 hasta 1:2 560. Se dio como título del suero la más alta dilución de éste, donde se observó aglutinación de los glóbulos rojos.^5,6 Las muestras se tomaron con diferencias de tiempo entre la primera, la segunda y la tercera de 6 meses a un año.

RESULTADOS

Al paciente 4 se le realizó el primer suero en una fase aguda de su enfermedad respiratoria y digestiva y después de un tratamiento antipseudomona intenso mejoró de forma importante clínicamente y los títulos de la mayoría de los serotipos se normalizaron.

Los pacientes 5 y 6 mantenían manifestaciones respiratorias crónicas estables sin grandes cambios, lo que se relaciona bien con sus títulos elevados, con poca variación entre el primero y el segundo suero.

El paciente 7 al principio mantuvo manifestaciones clínicas respiratorias agudas con pocos cambios. Se le puso tratamiento antiPseudomona cada 3 meses por 1 año y mejoró notablemente su cuadro respiratorio, lo cual se relaciona con la caída de los títulos de la mayoría de los serotipos en el tercer suero.

El paciente 8 sólo presentó manifestaciones respiratorias crónicas estables y se le realizó el estudio de un solo suero, donde la mayoría de los títulos de aglutininas estaban elevados (dicha paciente era de otra provincia).

El paciente 9 presentó manifestaciones respiratorias crónicas y digestivas, que en el segundo suero tuvo una agudización de su proceso infecciosopulmonar y como se puede ver tenía títulos altos durante el primer suero y que aumentaron de forma importante durante el segundo.

DISCUSION

Cordon, et al.⁴ observaron que 24 pacientes con esputos positivos por Pseudomonas aeruginosa no tenían al inicio anticuerpos antiPseudomonas elevados, éstos se siguieron y 7 pacientes tuvieron anticuerpos elevados en un período que ocurrió entre 6 y 25 meses y los 17 pacientes restantes se mantenían con anticuerpos normales, lo cual demuestra que pueden estar colonizados, pero no infectados e infectarse posteriormente.

Brett, et al.³ plantean que un grupo de 12 pacientes que tenían títulos altos de anticuerpos antiPseudomonas llevaron tratamiento antiPseudomonas por intervalos de 4 meses, hasta que los títulos se normalizaron. También lo relacionaron con la mejoría clínica y de pruebas funcionales respiratorias. En nuestros pacientes 4 y 7 esto se comportó de forma semejante.

Grimwood, et al.⁸ observaron que 9 pacientes hospitalizados tenían altos niveles de exoenzimas de Pseudomonas aeruginosa al ingreso, y después de un tratamiento con antibióticos el 53 % mejoró las pruebas funcionales respiratorias y disminuyó los niveles de exoenzimas.

Elborn, et al.⁹ señalan que en un estudio de 6 pacientes que fallecieron por FQ, la intensidad de la respuesta inflamatoria a la infección pulmonar por Pseudomonas aeruginosa estaba incrementada en los 7 días previos a la muerte. En nuestros pacientes fallecidos (1 y 6) los segundos sueros se realizaron en el ingreso cuando fallecieron (1 a 2 semanas previas) y como podemos observar tenían anticuerpos elevados. ]]> Cowan y Winnie¹⁰ encontraron en 13 pacientes con FQ con infección por Pseudomonas aeruginosa que tenían títulos elevados de anticuerpos Ig3 antiPseudomona y éstos tenían pobre condición clínica, porque habían incrementado su inflamación pulmonar con daño pulmonar consecuente. Esto es comparable con lo que hallamos en nuestros pacientes 8 y 9.

 SUMMARY

Key words: PULMONARY FIBROSIS/microbiology; CYSTIC FIBROSIS/microbiology; PSEUDOMONAS AERUGINOSA/isolation and purification.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Stenvang Pedersén S. Hoiby N. Shand GH, Pressler T. Antibody response to pseudomonas aeruginosa antigens in cystic fibrosis. Antibiot Chemother 1989;82:130-53.
2. Hoiby N. Microbiology of the cisty fibrosis lung Newsl IACFA 1994;(35):3-7.
3. Brett MM, Simmonds EJ. Ghoneim AT, Littlewood JM. The value of serum IgG titres against Pseudomonas aeruginosa in the management of early pseudomonal infection in cystic fibrosis Arch Dis Child 1992;67(9):1086-8.
4. Cordon SM Elborn JS. Rayner RJ, Hiller EJ. Shale DJ. IgG antibody in early Pseudomona aeruginosa infection in cystic fibrosis. Arch Dis Child 1992;67(6):737-40.
5. Cáceres A, Mata L. Hemaglutinación indirecta para investigación de anticuerpos a enterobacterias. Rev Latinoam Microbiol 1970;12:137.
6. Pitt TL, Erdman YJ. The specificity of agglutination reactions of Ps aeruginosas with "O" antisera. J Med Microbiol 1977;11:16.
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8. Grimwood K, Semple RA, Rabin HR, Sokol PA. Woods DE. Elevated exoenzyme expression by Ps. aeruginosas is correlated with exacerbations of lung disease in cystic fibrosis. Pediatr Pulmonol 1993;15(3):135-9.
9. Elborn JS, Cordon SM.; Parker D, Delamere FM, Shale DJ. The host inflamatory response prior to death in patients with cystic fibrosis and chronic Ps. aeruginosas infection. Respir Med 1993;87(8):603-7.
10. Cowan RG, Winnie GB Antipseudomona aeruginosa IgG subclass titres in patients with cystic fibrosis. Correlations with pulmonary function. Neutrophil chemotaxis and phagocytosis. J Clin. Immunol 1993;13(5):359-70.

1. Especialista de II Grado en Pediatría. Servicio de Enfermedades Respiratorias. Asistente del Instituto Superior de Ciencias Médicas de Ciudad de La Habana (ISCM-CH).
2. Doctora en Ciencias Médicas. Jefa del Servicio de Microbiología. Profesora Titular del ISCM-CH. Presidenta del Consejo Científico.
3. Especialista de I Grado en Microbiología. Jefa del Laboratorio de Infecciones Respiratorias.
4. Doctor en Ciencias Médicas. Especialista de II Grado en Pediatría. Servicio de Enfermedades Respiratorias. Profesor Titular de Pediatría.
5. Licenciado en Microbiología. Jefe del Laboratorio de Serología. Especialista Principal de Microbiología.
6. Licenciado en Microbiología. Jefe del Laboratorio de Micología. Jefe del Laboratorio de Infecciones Tractourinarias. Especialista A en Microbiología.
]]> ]]> 1989 82 130-53 1994 (35) (35) 3-7 1992 67 (9) (9) 1086-8 1992 67 6 6 737-40 1970 12 137 1977 11 16 1977 ^s(Suppl 262) ^s(Suppl 262) (Suppl 262) 3-96 1993 15 3 3 135-9 1993 87 8 8 603-7 1993 13 5 5 359-70