0034-7531 0034-7531 S0034-75311999000400003 Cuba España 00 12 1999 00 12 1999 71 4 205 210

Experiencia y resultados Hospital Pediátrico Docente "William Soler", Ciudad de La Habana

Expresión fenotípica de una sordera familiar con deleción del gen POU3F4

Dra. Ibis Menéndez,1 Dra. Manuela Villamar,2 Dra. Blanca Carrillo,1 Dr. Ignacio del Castillo,2 Téc. Lourdes Romero,2 Dra. Maribel Ponce de León1 y Dr. Felipe Moreno2

RESUMEN

Se presenta una familia cubana con 5 miembros afectados por una hipoacusia bilateral, congénita, severa, mixta con componente neurosensorial predominante y sin alteraciones morfológicas de oído interno. El patrón de transmisión era compatible con la herencia recesiva ligada al cromosoma X. Los estudios moleculares detectaron una deleción en la región Xq21.1 que implica el gen POU3F4, responsable de la sordera de tipo DFN3. Se hacen comentarios sobre la evidente variabilidad clínica de las sorderas tipo DFN3.

Descriptores DeCS: PERDIDA AUDITIVA BILATERAL/genética; PERDIDA AUDITIVA BILATERAL/etiología; TRASTORNOS DEL LENGUAJE/etiología; PERDIDA AUDITIVA BILATERAL/complicaciones; FONDO DE OJO.

Las sorderas ligadas al cromosoma X representan entre el 1 al 5 % de las sorderas hereditarias no sindrómicas.1 Son heterogéneas, tanto desde el punto de vista clinicoaudiológico (congénitas o progresivas; neurosensoriales, conductivas o mixtas) como del genético con 4 loci actualmente mapeados.2-4 La forma más frecuente de sordera ligada al cromosoma X, el tipo DFN3, se describió inicialmente en individuos con características clinicoaudiológicas bien definidas (MIM 304400): sordera mixta progresiva con fijación del estapedio y "gusher" de perilinfa durante la estapedectomía.5,6 Esta sintomatología tan característica facilitó el abordaje desde el punto de vista molecular. Sin embargo, se han descrito deleciones del gen POU3F4 en pacientes con reordenamientos cromosómicos del brazo largo del cromosoma X;7-9 mutaciones puntuales del gen POU3F4 en pacientes con hipoacusias neurosensoriales o mixtas asociadas con anomalías de oído interno con "gusher" o sin éste;10 por último se han descrito pacientes con sordera tipo DFN3 en los cuales el gen POU3F4 está presente y sin alteración de su secuencia.10,11

En este trabajo se reportan los hallazgos clínicos y genético-moleculares en una familia cubana con una sordera congénita severa que afecta sólo a varones y se hacen algunas consideraciones sobre la evidente variabilidad clínica interfamiliar de las DFN3.

MÉTODOS

Investigaciones clínicas

Se estudiaron 19 individuos que pertenecían a la familia, de ellos, 5 afectados con una sordera congénita severa con afectación del lenguaje. A los hipoacúsicos se les realizó examen de fondo de ojo, investigaciones endocrinas (determinación de niveles de FSH, LH y testosterona basal), tests psicométricos y tomografía axial computadorizada (TAC) de oído interno. Se realizaron investigaciones citogenéticas en los individuos III:11, III:13, IV:3 y IV:6 (2 portadoras obligadas, un afectado y un varón normal respectivamente).

Investigaciones genético-moleculares

Se obtuvo ácido desoxirribonucleico (DNA) de sangre periférica de los 19 individuos por métodos estándares.13 Se realizaron amplificaciones PCR con un termociclador Perkin-Elmer 9 600 de los siguientes marcadores microsatélites: DXS1225, DXS995, DXS8076, otros marcadores no microsatélites como el DXS169, DXS26, DXS232, DXS355, DXS326 y las STS 71:3, 24:17, 34:2, y 24:5 en todos los miembros de la familia. Las condiciones de amplificación fueron las descritas por Robinson y otros y Dahl y otros.14,15

Para determinar la presencia/ausencia del gen POU3F4 se amplificó la ORF completa del gen en todos los varones afectados y se visualizó en geles de agarosa; en las portadoras obligadas y posibles éste se determinó mediante hibridación, con la utilización como sonda del producto amplificado del gen completo marcado con 32P.

RESULTADOS

Al examen físico no se apreciaron síntomas o signos acompañantes de la sordera. Los resultados de las investigaciones que se realizaron para descartar coroideremia, anomalías cromosómicas, anomalías de oído interno, endocrinopatías y retraso mental fueron normales.

Características de la pérdida auditiva

El estudio audiométrico en los 5 afectados destacó una hipoacusia bilateral severa que afectó a todas las frecuencias, con reflejo estapedial abolido y gran reserva coclear. En el timpanograma se observó una marcada disminución de la compliancia en ambos oídos, con la consiguiente disminución de la movilidad de las membranas timpánicas. En algunas hembras el reflejo estapedial estaba abolido, sin afectación de la audición.

Estudio genético-molecular

El patrón de transmisión de la sordera era característico de la herencia recesiva ligada al cromosoma X (fig.1).

Figura1
FIG. 1. Árbol genealógico de la familia.

Los afectados de esta familia mostraron una deleción delimitada por los marcadores DXS26 y DXS232, ambos presentes y flanqueantes al gen POU3F4; de los marcadores microsatélites DXS995 y DXS8076, así como de la ORF completa del gen POU3F4 no se obtuvieron productos amplificados (fig. 2). El estado de portador se determinó por análisis de Southern blot (análisis genético directo) que permitió comprobar la presencia del gen en doble dosis en las hembras sanas y en monodosis en las hembras portadoras. Simultáneamente se configuró el haplotipo para los marcadores microsatélites DXS1225, DXS995, DXS8076 y CHM (análisis genético indirecto).

]]> Figura2

FIG. 2. Mapa físico de la región crítica del locus DFN3. En la parte superior se señala la localización del gen POU3F4 y de los marcadores utilizados en el estudio. En la parte inferior se muestra con líneas de puntos la deleción detectada en los pacientes. Las rayas verticales corresponden a la posición de los marcadores.

DISCUSIÓN

La pérdida auditiva fue bastante homogénea en todos los afectados. El componente neurosensorial predominó y enmascaró el conductivo. No se encontraron anomalías del oído interno, ni se ha verificado progresión de la sordera en las evaluaciones realizadas; tampoco se observó la presencia de otros signos o síntomas que hicieran sospechar del tipo de sordera DFN3, con excepción de la herencia ligada al cromosoma X. Es de destacar el hallazgo de reflejo estapedial abolido, sin pérdida auditiva, en todas las portadoras obligadas confirmadas molecularmente, lo cual será motivo de un estudio ulterior.

Los estudios moleculares se iniciaron investigando el locus DFN3, porque las mutaciones en esta región explican aproximadamente el 50 % de las hipoacusias ligadas al cromosoma X.7,10-12,14 Deleciones de la región Xq21.1 como la encontrada en esta familia son el tipo de mutación más frecuente entre las sorderas DFN3.7,10,11

La asociación entre sordera de tipo DFN3 y mutaciones puntuales del gen POU3F4 fue descrita por de Kok y otros.10 Bitner Glindzin y otros encontraron deleciones del gen POU3F4 en sorderas neurosensoriales con anomalía ósea de oído interno, que ampliaron el espectro clínico de las DFN3,11 y nosotros la reportamos en esta sordera no sindrómica, bilateral, congénita, severa, conductivo-neurosensorial sin anomalías tomográficas demostrables del oído interno. En general entre las sorderas tipo DFN3 se observan diferencias importantes en relación con el tipo de hipoacusia, anomalías morfológicas del oído interno y la edad de comienzo de la pérdida auditiva,7,10-12,16 sin que se haya podido establecer una estricta correlación genotipo-fenotipo por el momento. En ausencia de "gusher", la sordera DFN3 suele sospecharse en un paciente masculino con hipoacusia y malformaciones del oído interno tomográficamente detectadas, o con coroideremia, o retraso mental o con alteraciones cromosómicas que incluyan a la región Xq21.1. Nuestra experiencia con esta familia sugiere comenzar los estudios moleculares en las sorderas ligadas al cromosoma X por el locus DFN3, porque son las más frecuentes y además muy heterogéneas clínicamente.

Aunque Cremers y otros han hallado pacientes DFN3 en los que el gen POU3F4 está intacto,10,12,16 está claramente demostrado que las mutaciones del gen POU3F4 y/o de sus zonas adyacentes causan sorderas.10,12,16 En un futuro próximo las investigaciones en las DFN3 deberán centrarse en identificar a los genes que regulan este factor transcripcional. Ello debe contribuir a la explicación de la variabilidad clínica de las DFN3.

AGRADECIMIENTOS

Los autores desean dejar constancia de su agradecimiento al programa Fondo de Expertos de la AECI y a la Consejería de Educación y Cultura de la Comunidad de Madrid, por financiar este trabajo, así como a los miembros de la familia V.T. por su extraordinaria colaboración en las investigaciones realizadas.

SUMMARY

A Cuban five-member family affected by a severe congenital bilateral mixed deafness with predominant sensorineural component and without morphological changes in the internal hearing is presented in this study. The transmission pattern was compatible with X-linked recessive heritage. The molecular studies detected a deletion of Xq 21 region involving POU3F4 gene which is responsible for DFN3-type deafness. Comments are made on the obvious clinical variability of DFN3-type deafness.

Subject headings: HEARING LOSS, BILATERAL/genetic; HEARING LOSS, BILATERAL/etiology; HEARING LOSS, BILATERAL/complications; LANGUAGE DISORDERS/etiology; FUNDUS OCULI.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Recibido: 15 de febrero de 1998. Aprobado: 12 de febrero de 1999.
Dra. Ibis Menéndez. Hospital Pediátrico Docente "William Soler", 100 y Perla, municipio Boyeros, Ciudad de La Habana, Cuba.
 
 

1 Hospital Pediátrico Docente "William Soler". Ciudad de La Habana, Cuba.
2 Unidad de Genética Molecular. Hospital "Ramón y Cajal", Madrid, España.
 
 
  ]]> 1995 9-21 1997 60 758-64 1996 14 385-91 1996 5 1383-7 1990 9th 1584 1971 4 64-9 1994 3 1151-4 1995 4 1465-6 1995 3 207-18 1995 267 685-8 1995 4 1467-9 1995 4 2145-50 1988 16 1215 1992 90 316-8 1995 56 999-1001 1997 106 320-25