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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[A study was made on the antiulcer activity of a new flavonoid isolated from Piper ossanum leaves through extraction with ethyl alcohol, then purified with ethyl acetate, separated per polyamide column and re-crystallized. This flavonoid solution was orally administered to ten male Wistar rats weighing 150-200 mg. Also, a negative control group (water) and a group which was given sucralfato, a well-known anticulcer drug, were analyzed. Immobilization and cold stress pattern were used to cause gastric damage. The flavonoid solution showed an obvious antiulcer action expressed by injure index and percentage of lesion formation inhibition. It was concluded that this flavonoid performed comparable to sucralfato as an antiulcer substance.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[ <p>Instituto Superior de Medicina Militar "Dr. Luis D&iacute;az Soto". Laboratorio  de Medicina Herbaria </p><h2> Evaluaci&oacute;n de la actividad antiulcerosa del  2"-0-ramnosil 4"-0-metil-vitexina de las hojas de P<i>iper Ossanum</i></h2><i><a href="#*">Lic.  Marta Rosa Apecechea Coffigny,<sup>1</sup> Ing. Mar&iacute;a Larionova,<sup>2</sup>  Dra. Sirced Salazar Rodr&iacute;guez <sup>3</sup> y Dr. Gonzalo Ab&iacute;n Montalb&aacute;n  <sup>4</sup></a></i> <h4> RESUMEN</h4>Se estudi&oacute; la actividad antiulcerosa  de un flavonoide nuevo aislado de las hojas de <i>Piper ossanum</i>, mediante  extracci&oacute;n con alcohol et&iacute;lico al 70 %; posteriormente se purific&oacute;  con acetato de etilo; luego fue separado por columna de poliamida y recristalizado.  Esta soluci&oacute;n de flavonoides se administr&oacute; por v&iacute;a oral a  10 ratas Wistar machos con peso entre 150 y 200 g. Se consideraron adem&aacute;s  un grupo control negativo (agua) y un grupo al cual se le suministr&oacute; sucralfato,  f&aacute;rmaco de reconocida acci&oacute;n antiulcerosa. Se emple&oacute; el modelo  de estr&eacute;s por inmovilizaci&oacute;n y fr&iacute;o para producir el da&ntilde;o  g&aacute;strico. La soluci&oacute;n de flavonoides mostr&oacute; una evidente  actividad antiulcerosa expresada por el &iacute;ndice de lesi&oacute;n y el porcentaje  de inhibici&oacute;n de formaci&oacute;n de lesiones. Se concluy&oacute; que este  flavonoide actu&oacute; como un antiulceroso similar al sucralfato.     <p><i>Descriptores  DeCS:</i> ULCERA PEPTICA; FLAVONAS/uso terap&eacute;utico.     <p>Los flavonoides  son compuestos fen&oacute;licos encontrados en muchas plantas, entre ellas el  <i>Piper ossanum</i> conocido popularmente como Platanillo de Cuba y perteneciente  a la familia de las Piperaceas.<sup>1,2</sup> A esta especie que crece en Cuba,  la Medicina Popular le ha atribuido propiedades diur&eacute;ticas, hemost&aacute;ticas,  astringentes y antiulcerosa.<sup>3</sup>     <p><i>&Aacute;lvarez A</i> (1994), valor&oacute;  la actividad antiulcerosa de varias plantas medicinales utilizadas en Cuba popularmente  con efecto favorable sobre el aparato gastrointestinal, y demostr&oacute; que  solamente 2 de ellas, incluyendo al <i>Piper ossanum</i> (decocci&oacute;n de  hojas) present&oacute; el efecto antiulceroso, mientras que las otras lesionaban  o potenciaban el da&ntilde;o a la mucosa g&aacute;strica. Este resultado demostr&oacute;  a&uacute;n m&aacute;s la importancia de comprobar cient&iacute;ficamente el efecto  farmacol&oacute;gico que se le atribuye a las plantas.<sup>4</sup>     <p>Los flavonoides  poseen efectos farmacol&oacute;gicos como antiinflamatorios, antimicrobiano, antial&eacute;rgicos,  antitromb&oacute;ticos y antineopl&aacute;sicos entre otros.<sup>5</sup>     <p>Es  importante destacar la actividad antiulcerosa g&aacute;strica que presentan algunos  flavonoides comprobada en animales de experimentaci&oacute;n.<sup>6</sup>     <p>El  objetivo de este trabajo fue evaluar la actividad antiulcerosa de un flavonoides  nuevo aislado de las hojas de <i>Piper ossanum</i> e identificado como 2"-0-ramnosil  4"-0-me- til-vitexina en un modelo de estr&eacute;s por inmovilizaci&oacute;n  y fr&iacute;o.<sup>7</sup> <h4> M&Eacute;TODOS</h4>Las hojas de <i>Piper ossanum</i>  C. dc Trel se colectaron en un &aacute;rea anexa al Laboratorio de Fitoqu&iacute;mica  del Instituto Superior de Medicina Militar (ISMM) "Dr. Luis D&iacute;az Soto"  (La Habana). La planta fue clasificada con el No. 220 en el herbario del Instituto  Nacional de Investigaciones Tropicales "Alejandro Humbolt".     <p>Las hojas secas  y molidas fueron desengrasadas y despigmentadas con n-hexano y cloroformo, despu&eacute;s  extra&iacute;das con alcohol al 70 %. El extracto etan&oacute;lico concentrado  se extrajo sucesivamente con acetato de etilo. El flavonoide fue separado por  una columna de poliamida y purificado mediante repetidas precipitaciones con metanol  (Hern&aacute;ndez FG, Larionova M. Estudio fitoqu&iacute;mico del <i>Piper ossanum</i>  C. dc Trel (Platanillo de Cuba). Trabajo de Diploma. Universidad de La Habana.  Facultad Farmacia-Alimentos. Ciudad de La Habana, 1989).     <p>Se prepar&oacute;  una soluci&oacute;n con el flavonoides a una concentraci&oacute;n de 0,5 mg/mL  en agua destilada, as&iacute; como una soluci&oacute;n de sucralfato (Urbal suspensi&oacute;n  Merck) a una concentraci&oacute;n de 200 mg/mL en agua destilada como control  positivo por su reconocida actividad antiulcerosa.     <p>Se usaron ratas Wistar machos  con peso entre 150 y 200 g procedentes de CENPALAB     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Para realizar el ensayo  se hicieron 3 grupos de 10 ratas cada uno. Al primer grupo se le administr&oacute;  2 mL de la soluci&oacute;n de flavonoide, al segundo grupo agua, y al tercero  200 mg/mL de sucralfato, 2 veces al d&iacute;a y durante 5 d. Al tercer d&iacute;a  del experimento las ratas se pusieron en ayuno con libre acceso al agua y posteriormente  al cuarto d&iacute;a se ataron a una tabla por las patas y la cabeza para restringirles  el movimiento, y se pusieron en un refrigerador a una temperatura entre 5 y 10  &deg;C durante 2 h seg&uacute;n modificaci&oacute;n del m&eacute;todo de Senay  y Levine.<sup>7</sup>     <p>     <center>TABLA. <i>Protecci&oacute;n por 2"-0-ramnosil  4"-metil-vitexina y sucralfato frente al da&ntilde;o g&aacute;strico producido  por estr&eacute;s por inmovilizaci&oacute;n y fr&iacute;o</i></center>    <center><table CELLPADDING=5 >  <tr> <td VALIGN=TOP WIDTH="25%">&nbsp;</td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">&nbsp;</td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">      <center>&Iacute;ndice de</center></td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">     <center>% de</center></td></tr>  <tr> <td VALIGN=TOP WIDTH="25%">Grupo&nbsp;</td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">     <center>N</center></td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">      <center>lesi&oacute;n (mm<sup>2</sup>)</center></td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">      <center>inhibici&oacute;n</center></td></tr> <tr> <td VALIGN=TOP WIDTH="25%">Agua</td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">      <center>10</center></td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">     ]]></body>
<body><![CDATA[<center>4,95</center></td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">      <center>0</center></td></tr> <tr> <td VALIGN=TOP WIDTH="25%">Sulcralfato</td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">      <center>10</center></td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">     <center>0,38<sup>*</sup></center></td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">      <center>97</center></td></tr> <tr> <td VALIGN=TOP WIDTH="25%">Flavonoide</td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">      <center>10</center></td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">     <center>0,47<sup>**</sup>  ns</center></td><td VALIGN=TOP WIDTH="25%">     <center>95 ns</center></td></tr> </table></center>    <center><sup>*  </sup>p&lt;0,05 <i>vs</i> agua.     <br><sup>** </sup>p&lt;0,05 <i>vs</i> agua.     ]]></body>
<body><![CDATA[<br>ns  p>0,05 <i>vs</i> sucralfato.</center>    <p>El quinto d&iacute;a se repiti&oacute;  la misma operaci&oacute;n, inmediatamente despu&eacute;s del segundo per&iacute;odo  de estr&eacute;s las ratas se anestesiaron profundamente y los est&oacute;magos  se abrieron con tijera a lo largo de la curvatura mayor, despu&eacute;s &eacute;stos  se lavaron con agua destilada y se fijaron en placas para su inspecci&oacute;n  microsc&oacute;pica.     <p>El da&ntilde;o se expres&oacute; por el &iacute;ndice  de lesi&oacute;n que se consider&oacute; como la sumatoria del &aacute;rea en  mil&iacute;metros cuadrados de las lesiones producidas en cada est&oacute;mago,  lo cual da un &iacute;ndice de &aacute;rea da&ntilde;ada.     <p>Se determin&oacute;  el porcentaje de inhibici&oacute;n en la formaci&oacute;n de lesiones por la f&oacute;rmula  siguiente:     <p><img SRC="/img/revistas/mil/v29n2/f0107200.gif" height=72 width=274>      
<p>En cada grupo de animales se calcul&oacute; la X &plusmn; DE y la evaluaci&oacute;n  de la significaci&oacute;n estad&iacute;stica se realiz&oacute; por la prueba  t de Student para el &iacute;ndice de lesi&oacute;n y una prueba de proporciones  para el porcentaje de inhibici&oacute;n.     <p>Posteriormente los est&oacute;magos  se fijaron en formol al 10 % separados por grupos con su identificaci&oacute;n  respectiva y sin previa informaci&oacute;n. Las muestras se procesaron por el  m&eacute;todo habitual y fueron coloreadas con hematoxilina-eosina. Las l&aacute;minas  fueron vistas en un microscopio OLIMPUS BH2. <h4> <b>RESULTADOS</b></h4>En la  tabla se puede apreciar que la 2"-0-ramnosil 4"-0-metil-vitexina y el sucralfato  utilizado como control positivo y de reconocida acci&oacute;n antiulcerosa, disminuyeron  de manera significativa (p&lt;0,05) el &iacute;ndice de lesi&oacute;n con respecto  al agua, en las ratas sometidas al estr&eacute;s. Ambos compuestos mostraron afecto  protector de la mucosa g&aacute;strica, lo cual es corroborado tambi&eacute;n  con los resultados del porcentaje de inhibici&oacute;n expresado en la misma tabla.  <h4> DISCUSI&Oacute;N</h4>La soluci&oacute;n de flavonoide a una concentraci&oacute;n  de 0,5 mg/mL y el sucralfato a una concentraci&oacute;n de 200 mg/mL disminuyeron  el &iacute;ndice de lesi&oacute;n de forma significativa con respecto al agua  en las ratas sometidas al estr&eacute;s experimental; entre ambas soluciones no  se encontr&oacute; diferencias significativas (p > 0,05).     <p>En relaci&oacute;n  con el porcentaje de inhibici&oacute;n de formaci&oacute;n de lesiones, el grupo  sometido al tratamiento con la soluci&oacute;n de flavonoide se comport&oacute;  de forma similar al sucralfato, este &uacute;ltimo de reconocida acci&oacute;n  antiulcerosa por incremento en la producci&oacute;n de <i>mucus.</i><sup>6</sup>  Cuando se compar&oacute; con el grupo agua hubo un 0 % de inhibici&oacute;n. Ambos  compuestos mostraron un efecto citoprotector de la mucosa g&aacute;strica, aunque  el modelo no permite definir si es por formaci&oacute;n de un complejo con las  prote&iacute;nas del tejido del nicho ulceroso que protege frente a los factores  agresivos, si es aumentando la s&iacute;ntesis y liberaci&oacute;n de prostaglandinas  en la mucosa g&aacute;strica estimulando la secreci&oacute;n de <i>mucus </i>y  bicarbonato o sobre compuestos comunes a ambos procesos.     <p>Esta investigaci&oacute;n  es el primer informe de la acci&oacute;n farmacol&oacute;gica para este nuevo  flavonoide, aunque la literatura refiere otros flavonoides con estas propiedades.<sup>8,9</sup>      <p>Se concluy&oacute; que el flavonoide aislado de las hojas de <i>Piperossanum</i>  (2"-0-ramnosil 4"-0-metil-vitexina) actu&oacute; como un antiulceroso similar  al sucralfato en el modelo experimental utilizado.     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><b>SUMMARY</b>     <p>A study  was made on the antiulcer activity of a new flavonoid isolated from Piper ossanum  leaves through extraction with ethyl alcohol, then purified with ethyl acetate,  separated per polyamide column and re-crystallized. This flavonoid solution was  orally administered to ten male Wistar rats weighing 150-200 mg. Also, a negative  control group (water) and a group which was given sucralfato, a well-known anticulcer  drug, were analyzed. Immobilization and cold stress pattern were used to cause  gastric damage. The flavonoid solution showed an obvious antiulcer action expressed  by injure index and percentage of lesion formation inhibition. It was concluded  that this flavonoid performed comparable to sucralfato as an antiulcer substance.      <p><i>Subject headings:</i> PEPTIC ULCER; FLAVONES/therapeutic use. <h4> REFERENCIAS  BIBLIOGR&Aacute;FICAS</h4><ol>     <!-- ref --><li> Calle JA. Contribuci&oacute;n al estudio de  algunas especies de la familia Piperaceae. Rev Colomb Cienc Qu&iacute;mico-farm  1983;4(1):47-57.</li>    <!-- ref --><li> Achembach H, Calle JA, Maussa OO, Poveda GN. Phytochemical  study of <i>Piper aduncum </i>L. Rev Mex Cienc Farm 1984;14(1):2-3.</li>    <!-- ref --><li> Roig  y Mesa JT. Plantas medicinales arom&aacute;ticas o venenosas de Cuba. La Habana:  Editorial Ciencia y T&eacute;cnica; 1974:</li>    <!-- ref --><li> Alvarez A, Larionova M. Valoraci&oacute;n  de la actividad antiulcerosa de varias plantas medicinales. Rev Cubana Farm 1994;28(2):138-41.</li>    <!-- ref --><li>  Havstein B. Flavonoids a class of natural products of high pharmacological potency.  Biochem Pharmacol 1983;32(7):1141-8.</li>    <!-- ref --><li> Alarc&oacute;n de la Lastra C, L&oacute;pez  A, Motilva V. Gastroprotection and prostaglandin E2 generation in rats by flavonoids  of Dittrichia viscosa. Planta Med 1993;59:497-501.</li>    <!-- ref --><li> Senay C, Levine RJ.  Sinergism betwen cold and restrain for by rapid production of stress ulcers in  rats. Proc Exp Biol Med 1967;21(2):1124-221.</li>    <!-- ref --><li> Villar A, Gasco MA, Alcaraz  MJ. Antiinflamatory and antiulcer properties of hypolactin-8-glucoside, a novel  plant flavonoid ed. J Pharma Pharmacol 1984;36:820-3.</li>    <!-- ref --><li> Beil W, Birkholz  C, Sewing KidFR. Effects of flavonoids in parietal cell acid secretion, gastric  mucosal prostaglandin production and helicobacter pylori growth. Arzneim forsch/drug  Ress 1995;45(1):12-4.</li>    </ol>    <p>    <br>Recibido: 10 de febrero del 2000. Aprobado:  11 de marzo del 2000.     <br>Lic<i>.</i> <i>Marta Rosa Apecechea Coffigny</i>. Instituto  Superior de Medicina Militar "Dr. Luis D&iacute;az Soto". Avenida Monumental,  Habana del Este, CP 11700, Ciudad de La Habana, Cuba.     <br>&nbsp; <a NAME="*"></a><sup>1  </sup>Licenciada en Bioqu&iacute;mica. Investigadora Agregada.     <br><sup>2 </sup>Ingeniera  Qu&iacute;mica. Investigadora Agregada.     <br><sup>3 </sup>Especialista de I Grado  en Anatom&iacute;a Patol&oacute;gica.     <br><sup>4 </sup>Doctor en Medicina Veterinaria.  Aspirante a Investigador.      ]]></body>
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