ARTÍCULO ORIGINAL
Efecto hepatoprotector del Noni-C® en la intoxicación experimental inducida por tetracloruro de carbono
Noni-C® hepatoprotective effect in experimental intoxication induced by carbon tetrachloride
MSc. María del Carmen Jiménez Martínez, DraC. Teresita Montero González, MSc. Sara M. Martínez Martín, MSc. Maura García Sánchez, DrC. José Luis Pérez de Alejo
Hospital Militar Central " Dr. Luis Díaz Soto". La Habana, Cuba.
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RESUMEN
Introducción: las enfermedades hepáticas son un serio problema de salud y la carencia de un tratamiento efectivo en la medicina moderna hace que aumenten los esfuerzos por hallar medicamentos naturales apropiados.
Objetivo: determinar el efecto hepatoprotector del producto natural Noni-C® en la intoxicación experimental por tetracloruro de carbono (CCl4).
Métodos: estudio experimental en ratas Wistar macho; se emplearon cuatro grupos de trabajo, uno control negativo, uno control positivo tratado con CCl4 y dos experimentales tratados con Noni-C® a las dosis 200 y 400 mg/kg de peso corporal durante 21 días, más CCl4 postratamiento con Noni-C® por 3 días a la dosis 0,5 mL/kg intraperitoneal. Se determinaron los niveles de transaminasa glutámico pirúvica y glutámico oxalacética. Se realizó análisis histopatológico para determinar lesión hepática y renal de diferente grado.
Resultados: se obtuvo reducción significativa de la transaminasa glutámico pirúvica al comparar las dosis de 200 y 400 mg/kg. Se observó disminución de las lesiones histopatológicas hepáticas y renales, de esteatosis hepática severa a leve y moderada, y de necrosis tubular aguda a tumefacción celular moderada, respectivamente, a la dosis 400 mg/kg de Noni-C®.
Conclusión: el tratamiento preventivo con Noni-C® a la dosis 400 mg/kg reduce la gravedad del daño hepático resultante de la intoxicación por CCl4. Por las características químico-físicas del producto y la variedad de compuestos identificados en el fruto, entre ellos vitaminas y minerales que contribuyen con su capacidad antioxidante, se recomienda su estudio en la prevención de enfermedades hepáticas.
Palabras clave: Noni-C®, transaminasa glutámico oxalacética, transaminasa glutámico pirúvica, CCl4, hígado, riñón, modelo experimental.
ABSTRACT
]]> Introduction: liver diseases are a serious health problem and the lack of effective treatment in modern medicine drives up efforts to find suitable natural medicines.Keywords: Noni-C®, glutamic oxaloacetic transaminase, glutamic pyruvic transaminase, CCl4, liver, kidney, experimental model.
INTRODUCCIÓN
Las enfermedades hepáticas son un serio problema de salud y la carencia de un tratamiento efectivo en la medicina moderna hace que aumenten los esfuerzos por hallar medicamentos naturales apropiados. Se ha prestado especial interés a agentes hepatoprotectores de origen natural, pues muchas plantas medicinales ya son utilizadas como tales en el folclor médico.1
]]> La planta medicinal Morinda citrifolia Linn, de la clase Magnoliopsida y la familia Rubiaceae, tiene amplia distribución en el mundo y es una de las numerosas plantas medicinales que se han usado desde hace más de 2 000 años. Aunque el nombre noni es el más popular, otras culturas le dan diversas denominaciones, por ejemplo: nhau, mengkudum, manzana de los cerdos, nonu, fruta del queso, nono, mora India, lada, árbol que quita el dolor, nigua, entre otros.2,3Se han identificado variedad de compuestos, fundamentalmente en el fruto: terpenos, alcaloides (xeronina, proxeronina), enzimas (proxeronasa, broncalina), flavonoides (quercitin), polisacáridos (damnacanthal), morindona, morindina, antraquinonas, aminoácidos, fitonutrientes, selenio, escopoletina, acubina, alzarina, ácido caproico, ácido caprílico, norepinefrina, 5 vitaminas y 3 minerales, antibióticos naturales, 17 aminoácidos de los 20 conocidos (incluidos los 9 esenciales), entre otros,3-5 a los que se le han atribuido numerosos efectos beneficiosos.
Estudios etnomédicos revelan muchas cualidades beneficiosas del fruto del noni y un amplio rango de propiedades medicinales, entre estas: actividades antibacterianas; para afectaciones pulmonares como asma; inhibe la formación de coágulos en la sangre; antihelmíntico, analgésica, úlceras gástricas, dolores menstruales, antitumoral (cáncer) y alergias; disuelve cálculos en riñón; reversa los efectos del envenenamiento de pescado e intoxicación de otras hierbas; ayuda contra la tuberculosis; ha disminuido los síntomas de VIH, esclerosis múltiple y parálisis.2,3
La presencia de estudios de toxicidad de Morinda citrifolia (noni) en ratas Sprague Dawley6,7 y del producto Noni-C® (no se encontraron signos de toxicidad a las dosis de 2 g/kg),8 demuestra la reducción del daño hepático como resultado de la administración de tetracloruro de carbono (CCl4).9 Estos hallazgos constituyen la principal motivación para realizar otro estudio con el objetivo de determinar el efecto hepatoprotector del Noni-C® ante el daño causado por CCl4, en modelo experimental en ratas.
MÉTODOS
Se realizó un estudio experimental en el Departamento de Investigaciones Médico Militares del Hospital Militar Central “Dr. Luis Díaz Soto”, entre enero y junio de 2013.
Se utilizó el producto natural Noni-C®, un preparado en polvo 100 % puro obtenido a partir del fruto maduro del noni (Morinda citrifolia), por la Planta Procesadora Especial ubicada en la carretera al Dique y Rotonda Naval, en Habana del Este, Habana, con número de lote 61103.
El análisis de varias muestras de lotes del producto reveló poca variación entre estas y mostró que el producto Noni-C® posee una composición químico-física adecuada para sus características. Se expone como promedio una humedad de 7,44 ± 0,10; el contenido de sólidos totales en %: 92,57 ± 0,10; de sólidos insolubles: 91,72 ± 0,12 y de sólidos solubles: 0,85 ± 0,04; así como pH (10 %): 3,87 ± 0,08 y pH (1 %): 4,08 ± 0,03. Los resultados microbiológicos de muestras de lotes del producto reflejaron conteo de mesófilos en el orden de 102; y de levaduras, mohos y coliformes menores que 10 ufc/g.
Se utilizó como animal de experimentación 24 ratas Wistar macho, producidas por el Centro Nacional de Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB), con un peso promedio de 230 ± 15 g.
]]> Los animales se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos de trabajo. Los animales de los grupos de experimentación se trataron por un período de 21 días con el producto natural (Noni-C®) y posteriormente se expusieron a una intoxicación por el CCl4 intraperitoneal durante 3 días.El daño hepático se indujo por CCl4 a la dosis de 0,5 mL/kg de peso por vía intraperitoneal según Procedimientos Normalizado de Operación del Departamento de Investigaciones del Hospital Militar Central “Dr. Luis Díaz Soto”.
Se administró 1 mL por vía oral de una preparación que contenía agua estéril para inyección y la dosis de 200 y 400 mg de Noni-C® por kg de peso corporal, según grupo.
Los grupos de trabajo se formaron por seis animales cada uno:
I control negativo, tratado con agua estéril para inyección.
La sangre se recolectó en tubos de 13 x 10 sin anticoagulante, para la obtención de suero mediante centrifugación a 3 000 rpm durante 15 min en centrífuga MLW 54. El suero obtenido fue separado y cuantificado para la determinación de transaminasa glutámico pirúvica (TGP) y transaminasa glutámico oxalacética (TGO) en el equipo analizador automático de química clínica Hitachi modelo 705.
Para el estudio histopatológico los órganos fueron recortados en bloques pequeños de ± 1 cm, colocados en un procesador de tejido, lavados e incluidos en parafina para realizar cortes más finos. Se utilizó la tinción de hematoxilina-eosina y finalmente las láminas se observaron en un microscopio óptico marca Leica; las lesiones a evaluar fueron: presencia de tumefacción celular, esteatosis y necrosis en hígado; tumefacción celular y necrosis tubular aguda (NTA) en riñón.
Los datos se recolectaron en una base de datos elaborada en Excel. Se procesaron mediante el paquete estadístico SPSS 11.5 para Windows. Para detectar diferencias significativas entre grupos se utilizó la prueba no paramétrica de Mann-Whitney. El nivel de significación se fijó en p< 0,05.
RESULTADOS
Entre los valores de las TGP de los grupos de estudio no se encontró diferencia significativa al comparar el grupo de intoxicación por CCl 4 a la dosis de 0,5 mL/kg de peso con los grupos tratados con Noni-C®. Sin embargo, se obtuvo reducción significativa de este parámetro al comparar las dosis de 200 y 400 mg/kg. (Fig. 1).
Al comparar los valores de las TGO de los grupos de estudio tampoco se observó disminución significativa de este parámetro en los grupos tratados con Noni-C® (Fig. 2).
]]> Los resultados obtenidos en el estudio histopatológico de los grupos II, III y IV (tabla) son:DISCUSIÓN
El daño hepático causado por CCl4 (halógeno alifático) en animales de experimentación simula la hepatitis viral en el humano. El efecto tóxico del CCl4 es debido a su conversión en radicales libres de ticlorometilo (CCl3) altamente tóxicos por el sistema citocromo P450, que inician la peroxidación lipídica cuando se combinan con los lípidos y proteínas de la célula en presencia de oxígeno para formar el radical triclorometil peroxil (CCl3O-), el cual ataca a las células.10-12
]]> La liberación de productos de la peroxidación lipídica causa daño de la membrana plasmática a causa del incremento de su permeabilidad. Seguido de la hinchazón progresiva de la célula con entrada masiva de calcio que conduce a la célula a la muerte. El incremento de los niveles de TGP y TGO es una clara expresión de presencia de células dañadas y pérdida de la integridad funcional de la membrana celular,10-13 lo cual se observó en el grupo tratado con CCl4.Estudios encaminados a determinar el efecto hepatoprotector de derivados de productos naturales señalan que esta propiedad en modelo de daño hepático inducida por CCl4, está relacionada con la propiedad antioxidante o inhibición de la generación de radicales libres.12,14
En estudio realizado por Wang y otros15 se encontró necrosis micro-centrilobular en daño hepático inducido por CCl4, así como disminución significativa de los niveles de transaminasas y de las lesiones hepáticas con la administración de un jugo de noni posintoxicación.
Los flavonoides, compuestos fenólicos, polifenoles, vitaminas C y E, entre otros son sustancias aisladas en productos naturales con capacidad antioxidante y hepatoprotectora y que sugieren protección tisular frente al estrés oxidativo.16 En la fruta de noni se destaca su alto contenido en vitamina C, así como minerales (manganeso, selenio), flavonoides, alcaloides (proxeronina), entre otros.17 Estos compuestos son importantes en los mecanismos que involucran radicales libres como es el daño hepático inducido por CCl4 y en la regeneración tisular posterior.
A pesar que la TGP tiene un elevado grado de especificidad hepática ante el daño celular, la TGO responde a la agresión celular en otros tejidos y órganos como músculo cardiaco, cerebro, riñones y músculo esquelético, de aquí sus valores más elevados. Es por esto que también se realiza estudio histopatológico de los riñones para el efecto protector del Noni-C® sobre este órgano y la evolución de las lesiones ocasionadas por CCl4.
A partir del ensayo realizado se concluye que el tratamiento preventivo con Noni-C® a la dosis 400 mg/kg reduce la gravedad del daño hepático resultante de la intoxicación por CCl4.
Al conocer las características químico-físicas del producto y la variedad de compuestos identificados en el fruto, entre ellos vitaminas y minerales que contribuyen con su capacidad antioxidante, se recomienda su estudio en la prevención de enfermedades hepáticas.
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]]>17. West Brett J, Deng S, Jarakae Jensen C. Nutrient and phytochemical analyses of processed noni puree. References and further reading may be available for this article. To view references and further reading you must purchase this article. Food Research International. 2011 August;44(7):2295-301.
Recibido: 1 de octubre de 2014.
Aprobado: 11 de octubre de 2014.
María del Carmen Jiménez Martínez. Departamento de Investigaciones Médico Militares. Hospital Militar Central " Dr. Luis Díaz Soto". Ave. Monumental y Carretera del Asilo, CP 11700, La Habana, Cuba. Correo electrónico: navaldimm@infomed.sld.cu, mcarmenjm@infomed.sld.cu
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