0375-0760 0375-0760 S0375-07601995000200012 Cuba 00 12 1995 00 12 1995 47 2 135 136

Identificación de cepas de Mycobacterium tuberculosis utilizando tiras de papel para la técnica de niacina

Comunicación Breve

Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí"

Identificación de cepas de Mycobacterium tuberculosis utilizando tiras de papel para la técnica de niacina

Dr. ERNESTO MONTORO CARDOSO,1 Téc. MIGUEL ECHEMENDIA FONT,2 Lic. RAUL DIAZ RODRIGUEZ,3 Lic. HILDA ROQUE DE ESCOBAR4 y Dr. JOSE A. VALDIVIA ALVAREZ5

RESUMEN

Se identificaron cepas de Mycobacterium tuberculosis con la utilización de tiras de papel para la técnica de niacina, elaboradas en el Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis y Micobacterias del IPK. Se compararon los resultados obtenidos con la técnica de niacina convencional y se obtuvo el 100 % de coincidencia, se reportan las ventajas, sensibilidad y estabilidad de las tiras.

Palabras clave: MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS/aislamiento y purificación; NIACINA/uso diagnóstico.

INTRODUCCION

La técnica de niacina descrita por Konno, en 1956, es la más utilizada en los laboratorios para la identificación y diferenciación de Mycobacte rium tuberculosis. Se ha demostrado que los bacilos tuberculosos aislados de muestras clínicas son capaces de producir ácido nicotínico en grado suficiente para poder diferenciar- se de otros microorganismos ácido-alcohol-resistentes.1-3

Se han hecho diferentes modificaciones a esta técnica con el fin de aumentar su sensibilidad y fácil realización, pero todas se basan en la reacción de la niacina con el bromuro de cianógeno en presencia de una amina primaria.1

El procedimiento descrito por Runyon es utilizado en la actualidad en todos los laborato rios de nuestro país para la identificación de Mycobacterium tuberculosis, los productos que se utilizan (bencidina y bromuro de cianógeno) presentan una alta toxicidad al ser manipula dos.1,2,4

En este trabajo se utilizaron tiras de papel de filtro impregnadas en reactivos para la técnica de niacina, fueron elaboradas en nuestro laboratorio según reportes descritos por Kilburn y Kubica.1 Se realizó la identificación y diferenciación de 200 cepas de micobacterias recibidas en el Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis y Micobacterias del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí! (IPK). Los resultados obtenidos fueron comparados con la técnica convencional usual.5,6

DESARROLLO

De las 200 cepas de micobacterias analiza das, se logró identificar 97 como Mycobacterium tuberculosis (niacina +) y 103 como micobacterias no tuberculosas (niacina -), y se obtuvo el 100 % de coincidencia al ser comparadas con la técnica de niacina convencional. Para la realiza ción de esta técnica por ambos métodos se utilizaron cepas controles: Mycobacterium tuberculosis H37Rv (niacina +) y Mycobacterium intracellulare TMC 1403 (niacina -).

La sensibilidad de la técnica de niacina al utilizar las tiras se determinó con la preparación de soluciones de ácido nicotínico a un rango de concentración desde 1 a 10 mg/mL,1,2 resultó capaz de detectar una concentración aproxima- da de 5 mg/mL.

Las tiras resultaron ser estables hasta un período de 4 meses, la determinación de niacina se realizó con una periodicidad de 7 días en las cepas controles mencionadas anteriormente.

Estudios realizados por Kilburn y Kubica reportaron iguales resultados a los obtenidos en el presente trabajo al comparar ambos métodos de la técnica de niacina (100 % de coincidencia).1 ]]> La importancia de este resultado está dada por la posibilidad de disponer de un método de diagnóstico sencillo, económico y eficaz para la identificación de Mycobacterium tuberculosis en la búsqueda de casos en la red de laboratorios, además elimina el riesgo que significa el uso de reactivos de alta toxicidad del método anterior.

AGRADECIMIENTO

Este trabajo recibió ayuda financiera de la agencia Sueca SAREC.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

  1. Kilburn JO, Kubica GP. Reagent impregnated papel strips for detection of niacin. Am J Clin Pathol 1969;38(9):530-2.
  2. Young WD, Maslansky A, Lefar MS, Kronish DP. Develop ment of a paper strip for detection of niacin produced by Mycobacteria. Appl Microbiol 1970;20(6):939-45.
  3. Konno K. New chemical method to differentiate human type tubercle bacilli from other mycobacteria. Science 1956; 124(9):85.
  4. Runyon EH, Selin MJ, Harris HW. Distinguishing mycobacte ria by the niacin test. Am Rev Tuberc 1959;79:663.
  5. Kent PT, Kubica GP. Public health mycobacteriology: a guide for the level III laboratory. US Departament of Health and Human Services. CDC. 1985:91-6.
  6. Runyon EH, Karlson AG, Kubica GP, Wayne LG. Mycobacte ria. En: Lennette EH, Balows A, Hausler WJ, Truant JP, eds. Microbiología Clínica. 3 ed. 1982;t1:219-20.
Recibido: 28 de junio de 1994. Aprobado: 20 de noviembre de 1994.

Dr. Ernesto Montoro Cardoso. Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí". Apartado 601, Marianao 13, Ciudad de La Habana, Cuba.

1Especialista de I Grado en Microbiología. Investigador Agregado. Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" (IPK). ]]> 2Técnico en Microbiología. IPK.
3Licenciado en Bioquímica. Aspirante a Investigador. IPK.
4Licenciada en Microbiología. Centro Provincial de Higiene y Epidemiología de Villa Clara.
5Doctor en Ciencias. Especialista de II Grado en Microbiología. Investigador Titular. IPK. ]]> 1969 38 9 9 530-2 1970 20 6 6 939-45 1956 124 9 9 85 1959 79 663 1985 91-6. 1982 3 219-20