Susceptibilidad antimicrobiana en cepas de Haemophilus influenzae no tipables aisladas de niños sanos

Lic. Kiomy Fuentes Gort,¹ Lic. Isis Tamargo Martínez² y Lic. Gilda Toraño Peraza³

Resumen

Se estudió la susceptibilidad antimicrobiana de 79 aislamientos de Haemophilus influenzae no tipables obtenidos de niños sanos, que asistieron a 2 círculos infantiles del municipio Marianao. Se encontró resistencia frente al trimetoprim/sulfametoxazol (41,77 %), tetraciclina (18,99 %), ampicilina (17,72 %), amoxicilina/ácido clavulánico (7,59 %) y el cloranfenicol (6,33 %). Se observó multirresistencia en 25,81 % de los aislamientos. De las cepas estudiadas, 100 % fue sensible a ceftriaxona, cefuroxima y norfloxacina; 28,57 % de los aislamientos resistentes a ampicilina produjeron la enzima beta lactamasa. La resistencia a cloranfenicol estuvo mediada por la producción de la enzima cloranfenicol acetil transferasa.

Palabras clave: Haemophilus influenzae no tipable, portadores nasofaríngeos, susceptibilidad antimicrobiana, beta lactamasa, cloranfenicol acetil transferasa.

Haemophilus influenzae no tipable (HiNT) es considerado como parte de la microbiota normal del tracto respiratorio superior (TRS) de los seres humanos con una frecuencia que varía entre 50-80 %; pero también pueden encontrarse en la vagina y el intestino como comensal.¹ Si bien el significado de su presencia en la nasofaringe se desconoce, la existencia de tasas de portadores inusualmente elevadas se ha asociado con un mayor riesgo de desarrollar infecciones respiratorias o sistémicas entre otras, pues se ha descrito que estas cepas suelen extenderse desde la nasofaringe colonizada y producir cuadros de otitis media, sinusitis, bronquitis y neumonía.² Los estudios realizados en países donde se ha llevado a cabo la implementación de la vacunación contra este agente, han enfatizado el protagonismo de HiNT como patógeno en casos esporádicos y brotes de enfermedades invasivas.³

Algunos autores han llegado a la conclusión, de que en los países donde existen altas tasas de portadores, también se reportan altas tasas de resistencia por el empleo de los agentes antimicrobianos, lo que pudiera estar asociado con diferencias en cuanto a la disponibilidad de antimicrobianos, la vía de administración y la dosis.⁴

El uso previo de antibióticos se ha correlacionado más con el nivel de resistencia antimicrobiana en las cepas aisladas del TRS de niños sanos, que con el propio porcentaje de colonización, no obstante la relación es muy estrecha, porque los agentes antimicrobianos eliminan cepas susceptibles favoreciendo una colonización selectiva por cepas resistentes, las que reemplazan la microbiota nasofaríngea normal.⁵ Ello puede ser la base de la hipótesis acerca del posible incremento de las infecciones por cepas de H. influenzae resistentes, debido a la selección de estas cepas en portadores.

Se estudiaron 79 cepas de HiNT, aisladas de exudados nasales y faríngeos obtenidos de niños de la comunidad, menores de 5 años de edad, pertenecientes a 2 círculos infantiles del municipio Marianao. Estas cepas fueron obtenidas de un estudio previo realizado en el laboratorio del IPK en enero de 1998.

La susceptibilidad antimicrobiana fue estudiada por el método de difusión en discos.⁷ Se comprobó además la producción de la enzima beta lactamasa por el método de la cefalosporina cromogénica (Nitrocefinasa, BBL) en láminas portaobjetos.⁸ La producción de la enzima cloranfenicol acetil transferasa (CAT) se determinó según el método de Azemun y otros.⁹

La resistencia encontrada en este estudio fue la siguiente: trimetoprim/sulfametoxazol (TMP-SMT): 41,77 %, tetraciclina: 18,99 %, ampicilina: 17,72 %, amoxicilina/ácido clavulánico: 7,59 %, cloranfenicol: 6,33 %. Se observó multirresistencia (resistencia a más de 3 antimicrobianos) en 25,81 % de las cepas, siendo importante destacar que 93,75 % de estos aislamientos multirresistentes fueron resistentes a ampicilina en combinación con tetraciclina, cloranfenicol, TMP-SMT y amoxicilina/ácido clavulánico. De las cepas estudiadas 100 % fue sensible a las cefalosporinas probadas (ceftriaxona y cefuroxima) y a la norfloxacina.

Tan sólo en 28,57 % de los aislamientos resistentes a ampicilina se observó producción de beta lactamasa, lo cual infiere el desarrollo de otros mecanismos de resistencia como pueden ser aquellos que involucran “rearreglo” genético en una o varias proteínas fijadoras de la penicilina o en otras que intervienen en la función de permeabilidad de la membrana externa. Esta resistencia denominada también de tipo intrínseca, se ha observado fundamentalmente en cepas aisladas de secreciones bronquiales, de oído, nariz y garganta, las cuales en su mayoría son no capsuladas.¹⁰ En la opinión de los autores del trabajo este mecanismo de resistencia pudiera ser también el responsable del comportamiento en los aislamientos, siendo necesarios estudios futuros en este sentido.

En el caso de los aislamientos resistentes al cloranfenicol, 100 % fue productor de la enzima cloranfenicol acetil transferasa. Estos resultados están en concordancia con los obtenidos por Howard y otros,¹¹ quienes reportaron que 100 % de los aislamientos de Hi resistentes a cloranfenicol, estudiados por ellos respectivamente, eran productores de esta enzima.

Los resultados obtenidos en este trabajo, constituyen el primer reporte acerca de la susceptibilidad antimicrobiana de cepas de HiNT aisladas en Cuba, pues hasta la fecha no existe información publicada en ese sentido. Estos permitieron comprobar, que la resistencia en este tipo de cepas no constituye un problema en los 2 círculos infantiles estudiados, a excepción de la observada frente al TMP-SMT, para el cual los valores de resistencia sí fueron elevados. Este agente antimicrobiano es de uso frecuente entre la población infantil en Cuba, siendo ampliamente indicado en afecciones respiratorias en niños pequeños, lo cual permite explicar tan altos valores de resistencia. Estos resultados además son similares a los reportados internacionalmente en otras áreas geográficas.^12,13

Teniendo en cuenta que H. influenzae tipo b no constituye un problema grave actualmente en los países donde se ha llevado a cabo la vacunación contra este agente, por la eficacia de las vacunas existentes en el mercado, el estudio de las cepas no b resulta cada vez más importante, debido a su incremento en infecciones invasivas graves en la actualidad.^3,14

Summary

Antimicrobial susceptibility of 79 non-typable Haemophilus influenzae isolations obtained from healthy children that attended two day-care centers in Marianao municipality. It was found resistance to trimetoprim/sulfamethoxazole (41,77 %), tetracycline (18,99), ampicilline (17,72 %), amoxicillin/clavulanic acid (7,59 %) and chloramphenicol (6,33 %). 25,81 % of isolates showed multiresistance. 100 % of studied cases was sensitive to ceftriaxone, cefuroxime and norfloxacin. 28,57 % of ampicilline-resistent isolates produced beta-lactamase enzyme. Chloramphenicol resistance was mediated by the production of chloramphenicol acetyltransferase enzyme.

Key words: Non-typable Haemophilus influenzae, nasopharyngeal carriers, antimicrobial susceptibility, beta-lactamase, chloramphenicol acetyl transferase.

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