Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”
Lic.
Se estudió el efecto de diferentes agentes alcalinizantes de la orina sobre el aislamiento de leptospiras. Se obtuvieron mejores resultados al emplear la solución básica de NaOH 1N y en la orina inoculada 1 h después de haber sido alcalinizada.
Palabras clave: Leptospira, aislamiento, orina.
El aislamiento de leptospiras por cultivo constituye un método de alta sensibilidad y una prueba irrefutable de la etiología de la enfermedad, a pesar de las dificultades que se pueden presentar para su realización, como es la fácil contaminación por otros microorganismos y la baja velocidad de multiplicación de las leptospiras.1,2 Es considerado como método de referencia al evaluar otras pruebas de diagnóstico directo,1 por lo que en ocasiones al trabajar con muestras de orinas infectadas experimentalmente se hace necesario alcalinizar estas para poder comparar los resultados, porque las leptospiras son sensibles al pH ácido. En el presente trabajo sus autores se propusieron estudiar el efecto de diferentes agentes alcalinizantes de la orina sobre el aislamiento de leptospiras.
Se tomó una muestra de orina de un voluntario supuestamente sano y se alicuotó en 6 fracciones; 5 de estas se alcalinizaron con diferentes soluciones básicas (NaOH 4N, 2N, 1N, 0.5N y NaHCO3) y la otra se dejó en su estado ácido normal. Cada una de estas calidades de orina se separaron en 2 nuevas fracciones; la primera se infectó inmediatamente a partes iguales con un cultivo fresco de Leptospira interrogans Icterohaemorrhagiae copenhageni M-20, mientras que la otra se dejó reposar durante 1 h para después realizar igual procedimiento. También se preparó una mezcla con medio de cultivo (control). Cada mezcla se inoculó en medio de cultivo EMJH/SAVAT, y se realizó chequeo microscópico periódico y determinación de la densidad óptica. Se confeccionaron curvas de crecimiento.
Al observar periódicamente los cultivos y determinar las densidades ópticas de cada uno, se obtuvo que el crecimiento máximo de leptospiras en la orina alcalinizada e inoculada inmediatamente se alcanzó a los 15 d, mientras que en la orina inoculada 1 h después fue a los 10 d. En ambos casos se obtuvieron mejores resultados al emplear la solución básica de NaOH 1N, por lo que se recomienda utilizar este agente para alcalinizar la orina humana experimentalmente, y es preferible dejar en reposo durante 1 h antes de proceder a la infectación con leptospiras.
Key words: Leptospira, isolation, urine.
Levett PN. Leptospirosis. Clin Microbiol Rev 2001;14(2):296-326.
Recibido: 27 de diciembre de 2004. Aprobado: 10 de marzo de 2005.
Lic.
1 Máster en Bacteriología-Micología. Licenciado en Microbiología. Investigador Agregado.
2 Técnico en Microbiología.
3 Máster en Ciencias. Doctora en Medicina Veterinaria. Investigadora Auxiliar.