Aplicaciones de las lectinas

RESUMEN

Descriptores DeCS: LECTINAS.

El estudio de las lectinas fue iniciado por Stillmark en 1888 al describrir el fenómeno de hemaglutinación con extractos de semillas de castor (Ricinus communis). La pro-teína responsable de la aglutinación de los eritrocitos la denominó Ricina.^1,2 Más tarde, Hellin² descubrió que el extracto tóxico de semillas de Abrus precatorius también pro-ducía aglutinación de las células rojas, la proteína responsable se denominó Abrina.

A fines de los años 40 William C. Boyd y Rose M. Reguera^2,3 reportaron que ciertas semillas contenían aglutininas específicas para antígenos de los grupos sanguíneos humanos.

La primera lectina que fue obtenida en forma cristalina fue la concanavalina A del frijol Canavalia ensiformis en 1919 por James B. Sumner.³

El término lectinas fue introducido por Boyd y otros en 1954.⁴ Su interpretación no ha sido uniforme debido al desconocimiento acerca de las funciones fisiológicas de éstas. Existen diferentes proposiciones para definirlas, pero la más aceptada es la siguiente: las lectinas son proteínas o glicoproteínas de origen no inmune, fijadoras de carbohidratos con capacidad para aglutinar células y precipitar glicoconjugados.⁵

Cualquier definición deberá tener en cuenta los aspectos siguientes:⁶

• Las lectinas son glicoproteínas.
• No son de origen inmunológico.
• La relación de las lectinas con varias glicoproteínas que contienen sitios de combinación.
]]> Las lectinas están presentes en casi todo lo vivo, pues se han encontrado en el reino vegetal, animal y en microorganismos. En las plantas se han detectado, principalmente en los cotiledones y endospermos de las semillas y constituyen del 2 al 10 % del total de las proteínas de éstas. En el reino animal se han encontrado en invertebrados, tales como cangrejos, camarones, caracoles, lombrices y moluscos. Están presentes fundamentalmente en la hemolinfa y órganos sexuales.^1,3

La gran importancia de las lectinas se debe fundamentalmente a sus propiedades biológicas, tales como aglutinación de eritrocitos y otras células como linfocitos, espermatozoides, plaquetas y bacterias, inducción de mitosis en linfocitos, efectos citotóxicos sobre linfocitos, aglutinación de virus y otras.^2-4

APLICACIONES

Las lectinas se consideran armas valiosas en el campo de la Genética, la Biomedicina y la Inmunología. Su utilidad está basada en la propiedad que tienen de combinarse con varios tipos de glicoconjugados presentes en las superficies celulares y fluidos corporales.

Sus propiedades mitogénicas permiten que se utilicen en estudios que tienen como base la proliferación de linfocitos en cultivos, como son:

• La evaluación de la producción de citoquinas (interferón e interleuquinas) y la expresión de sus receptores en sobrenadantes de cultivos de linfocitos provenientes de pacientes con enfermedades de alto impacto social como el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), la tuberculosis y la leishmaniasis, entre otras.^7-12
• La caracterización de algunos aspectos relacionados con la respuesta inmune y fenómenos asociados con ellas como la inmunosupresión.^13,14
• La interacción entre virus, como por ejemplo entre el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) y el virus de la hepatitis B, así como la susceptibilidad y resistencia a éstos^15-18
• Evaluación de la efectividad de terapias antirretrovirales de acuerdo con la respuesta de los linfocitos a la estimulación con las lectinas antes y después de la terapia, como por ejemplo en terapias contra el VHI.¹⁹
• Análisis de funciones linfoproliferativas y citotóxicas en células mononucleares causadas por algunas drogas.²⁰
• Estudios acerca de la influencia nutricional en la proliferación de linfocitos y su cinética de proliferación.^12,21
• La inducción de genes en linfocitos.²²
]]> La detección de anormalidades cromosómicas.²³
Actualmente se han estudiado en detalle 9 lectinas con efecto mitogénico sobre los linfocitos, entre las que se destacan las provenientes de Phaseolus vulgaris (PHA), Canavalia ensiformis (Con A), Pisum sativum (PSA) y Fitolaca americana (PWM).

Estos mitógenos pueden activar de forma diferente los linfocitos T y B, por ejemplo la PHA y Con A inducen mitogenicidad en células T, mientras que el mitógeno de carmín (PWM) estimula ambos tipos de células. No se conoce lectina alguna que estimule sólo a los linfocitos B humanos.^2,3,12,16,19

Las lectinas forman parte de conjugados como lectina-lectina, lectina-enzimas y lectina-anticuerpos, lo que ha permitido el desarrollo de técnicas cromatográficas como la cromatografía de afinidad para la purificación de glicoproteínas. Ejemplo de ellas es la purificación de IgG utilizando anti-IgG acoplada a la Con A-Sepharose y la purificación de IgM usando Con A-Sepharose,²⁴ así como también la purificación de enzimas y de las propias lectinas.

Las interacciones de estas proteínas con células pueden ser inhibidas en muchos casos por azúcares, por lo que se ha llegado a la conclusión de que ellas se enlazan a sacáridos de la superficie celular, lo que ha provisto a los científicos de útiles marcadores para emplearlos en técnicas histoquímicas y en la microscopia electrónica para estudiar la estructura y función de la membrana plasmática. Generalmente se utilizan lectinas conjugadas con marcadores fluorescentes como la biotina y las más usadas para estos fines son la PHA-L, PHA-E y las provenientes de Pisum sativum (PSA), Triticum vulgare (WGA), Solanum tuberisum (STL), Arachis hypogae (PNA), Datura strmonium (DSL), Lens culinaris (LCA) y de Griffonia simplicifolia (GSL).¹

Dentro de los estudios de membrana se ha reportado en la literatura el uso de lectinas para estudiar cambios estructurales en los glicoconjugados presentes en las superficies celulares²⁵ y en ocasiones de esta forma detectar cambios morfológicos ocurridos, para analizar la distribución subcelular de epitopes y terminales glico-proteicos,^26-28 además para detectar alteraciones en la expresión de moléculas presentes en la superficie celular.^29-31

Otra área importante en la cual se emplean las lectinas es la detección de trans-formaciones malignas en células, a través de la aglutinación preferencial que muestran las lectinas con células transformadas. Además se han realizado investigaciones para utilizar las lectinas y polímeros sintéticos enlazados a ellas como agentes anticancerígenos in vivo e in vitro, ya que se ha visto que disminuyen el crecimiento de las células tumorales. Se utilizan también para la inmunización contra virus productores de inmunodeficiencia y algunos tumores^32-34 y como medicamentos para prevenir metástasis.³⁵ Las propiedades citotóxicas de algunas lectina como la Ricina y Abrina hacen también que éstas brinden interés como potenciales armas terapéuticas en el tratamiento del cáncer humano.³⁵

Las lectinas se emplean igualmente en la caracterización de grupos sanguíneos humanos, así como en la identificación de nuevos grupos sanguíneos.

Algunas de las lectinas son específicas en sus reacciones con los grupos sanguíneos ABO, MN, A₁ y A₂ de humanos,² por esto han sido utilizadas en la determinación del tipo de sangre de los individuos. La mayoría de las lectinas aglutinan los eritrocitos de todos los grupos sanguíneos en humanos y actúan a similares concentraciones, éstas son lectinas no específicas (no significa que no sea específica a los azúcares); el resto son lectinas específicas.

SUMMARY

Lectins are an interesting group of proteins of nonimmune origin that have the common property of binding in a specific and reversible way to carbohydrates, whether they are free or part of more complex structures. They have at least 2 binding sites that allow them to bind first to a specific sugar and then to a glycosylated molecule. They have interesting properties that turn this type of proteins into very valuable tools for biological laboratories, since they may be used in several investigations including the study of membrane structure, the detection of malignant transformations, the purification of glycoconjugates and the cytogenetic studies. They are also utilized in histochemical and enzymatic assays and in blood typing.

Subject headings: LECTINS.

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