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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[Caracterización de la calidad nutritiva de 53 accesiones del género Leucaena en condiciones tropicales]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[Through the descriptive analysis, main component analysis and automatic classification, a trial was conducted to characterize the nutritional composition of the foliage of 53 accessions from the Leucaena genus (37 L. leucocephala, 7 L. macrophylla, 5 L. lanceolata, 2 L. diversifolia, 1 L. glauca and 1 L. esculenta) established in Matanzas, Cuba. The chemical composition, levels of secondary metabolites and ruminal degradability were determined. In general, the accessions showed excellent chemical composition to be used as supplement in ruminant feeding (CP: 25,71 ±3,94%; NDF: 46,91±2,09; Ash: 7,48 ± 0,96%; DMD: 60,24 ± 9,90%). The indicators that better accounted for the variations between accessions were the components of the fibrous and polyphenolic fraction, mimosine concentration and ruminal degradability. However, protein fraction, dry matter and phytate rates, minerals and ash showed little fluctuation. By means of the ACA three groups were identified with differentiated nutritional characteristics among themselves. The accessions of L. macrophylla, L. diversifolia and L. esculenta showed higher concentration of secondary metabolites and lower ruminal degradability than the ones belonging to L. leucocephala, L. lanceolata and L. glauca, which showed the best results. DM, CP and NDF degradation was affected by fiber, total polyphenol, precipitable tannin and condensed tannin contents.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[ <p align="right"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>ART&Iacute;CULO    DE INVESTIGACI&Oacute;N</b></font></p>     <p><B><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="4">Caracterizaci&oacute;n    de la calidad nutritiva de 53 accesiones del g&eacute;nero <I>Leucaena </I>en    condiciones tropicales </font> </B></p> <B>     <P>&nbsp;     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3">Characterization    of the nutritional quality of 53 accessions from the <I>Leucaena</I> genus under    tropical conditions</font> </B>      <P>&nbsp;     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>D.E. Garc&iacute;a<SUP>1</SUP>,    Hilda B. Wencomo<SUP>2</SUP>, Mar&iacute;a G. Medina<SUP>1</SUP>, P. Moratinos    y L.J. Cova<SUP>3 </SUP></b></font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><SUP>1</sup>Instituto    Nacional de Investigaciones Agr&iacute;colas (INIA), Pampanito, Estado Trujillo,    Venezuela </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">E-mail: <a href="mailto:dagamar8@hotmail.com">dagamar8@hotmail.com</a>    </font>      <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><SUP>2</SUP>Estaci&oacute;n    Experimental de Pastos y Forrajes &uml;Indio Hatuey&uml;, Matanzas, Cuba </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><SUP>3 </SUP>N&uacute;cleo    Universitario &#171;Rafael Rangel&#187;, Universidad de los Andes, Trujillo,    Venezuela</font> <hr>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><B>Resumen</B>    </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Mediante el an&aacute;lisis    descriptivo, de componentes principales y de clasificaci&oacute;n autom&aacute;tica    (ACA), se llev&oacute; a cabo un experimento para caracterizar la composici&oacute;n    nutricional del follaje de 53 accesiones del g&eacute;nero <I>Leucaena </I>(37    <I>L. leucocephala</I>, 7 <I>L. macrophylla</I>, 5 <I>L. lanceolata</I>, 2 <I>L.    diversifolia</I>, 1 <I>L. glauca</I> y 1 <I>L. esculenta</I>) establecidas en    Matanzas, Cuba. Se determin&oacute; la composici&oacute;n qu&iacute;mica, los    niveles de metabolitos secundarios y la degradabilidad ruminal. En general,    las accesiones presentaron excelente composici&oacute;n qu&iacute;mica para    ser utilizadas como suplemento en la alimentaci&oacute;n de rumiantes (PC: 25,71    &#177;3,94%; FDN: 46,91 &#177;2,09%; cenizas: 7,48 &#177;0,96%; DMS: 60,24 &#177;9,90%).    Los indicadores que explicaron mejor las variaciones entre las accesiones fueron    los componentes de la fracci&oacute;n fibrosa y la polifen&oacute;lica, la concentraci&oacute;n    de mimosina y la degradabilidad ruminal. Sin embargo, la fracci&oacute;n proteica,    los niveles de materia seca, de fitatos, minerales y las cenizas presentaron    pocas fluctuaciones. Mediante el ACA se identificaron tres grupos con caracter&iacute;sticas    nutricionales diferenciadas entre s&iacute;. Las accesiones de <I>L. macrophylla</I>,    <I>L.</I> <I>diversifolia</I> y <I>L. esculenta</I> presentaron mayor concentraci&oacute;n    de metabolitos secundarios y menor degradabilidad ruminal que las pertenecientes    a <I>L. leucocephala</I>, <I>L. lanceolata</I> y <I>L. glauca, </I>las cuales    mostraron los mejores resultados. La degradaci&oacute;n de la MS, PC y FDN se    vio afectada por los contenidos de fibra, polifenoles totales, taninos precipitantes    y taninos condensados. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><i>Palabras clave</i>:<B>    </B>Calidad, metabolitos, <I>Leucaena</I></font> <hr>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><B>Abstract</B>    </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Through the descriptive    analysis, main component analysis and automatic classification, a trial was    conducted to characterize the nutritional composition of the foliage of 53 accessions    from the Leucaena genus (37 L. leucocephala, 7 L. macrophylla, 5 L. lanceolata,    2 L. diversifolia, 1 L. glauca and 1 L. esculenta) established in Matanzas,    Cuba. The chemical composition, levels of secondary metabolites and ruminal    degradability were determined. In general, the accessions showed excellent chemical    composition to be used as supplement in ruminant feeding (CP: 25,71 &#177;3,94%;    NDF: 46,91&#177;2,09; Ash: 7,48 &#177; 0,96%; DMD: 60,24 &#177; 9,90%). The    indicators that better accounted for the variations between accessions were    the components of the fibrous and polyphenolic fraction, mimosine concentration    and ruminal degradability. However, protein fraction, dry matter and phytate    rates, minerals and ash showed little fluctuation. By means of the ACA three    groups were identified with differentiated nutritional characteristics among    themselves. The accessions of L. macrophylla, L. diversifolia and L. esculenta    showed higher concentration of secondary metabolites and lower ruminal degradability    than the ones belonging to L. leucocephala, L. lanceolata and L. glauca, which    showed the best results. DM, CP and NDF degradation was affected by fiber, total    polyphenol, precipitable tannin and condensed tannin contents. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><i>Key words</i>:    Quality, metabolites, Leucaena </font> <hr>     <P>&nbsp;     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><B>INTRODUCCI&Oacute;N</B></font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">En los pa&iacute;ses    latinoamericanos las especies del g&eacute;nero <I>Leucaena </I>son las m&aacute;s    utilizadas para la alimentaci&oacute;n de los rumiantes en las &aacute;reas    de pastoreo-ramoneo, los bancos de prote&iacute;nas y los sistemas de corte    y acarreo, debido fundamentalmente a su r&aacute;pida adaptaci&oacute;n a condiciones    contrastantes de clima y suelo, sobresaliente composici&oacute;n nutricional,    adem&aacute;s de presentar buena persistencia al pastoreo (Clavero, 1998). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Considerando la    amplia base de germoplasma del g&eacute;nero en Am&eacute;rica Latina y la apremiante    necesidad de caracterizar especies que provean al ganado de alimento suplementario    con elevados contenidos de prote&iacute;nas y minerales, sobre todo en el per&iacute;odo    de menor disponibilidad de pastos, en los &uacute;ltimos a&ntilde;os se han    realizado numerosos estudios con accesiones de <I>Leucaena leucocephala</I>    Lam. de Wit., e incluso, se ha llegado a caracterizar las potencialidades nutritivas    de otras integrantes del g&eacute;nero. </font>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">No obstante, la    mayor&iacute;a de los estudios se han desarrollado en per&iacute;odos de evaluaci&oacute;n    cortos o se ha estudiado un n&uacute;mero restringido de variables, con las    cuales no se ha podido caracterizar, de forma integral, las especies de mejores    perspectivas agron&oacute;micas, nutricionales y de mayor aceptabilidad por    parte de los animales (Stewart y Dunsdon, 1998). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Adicionalmente,    los m&eacute;todos multivariados constituyen una herramienta imprescindible    para evaluar, de forma concisa, la variabilidad dentro de las colecciones con    potencial forrajero (Hidalgo, 2003). Mediante estos an&aacute;lisis se pueden    determinar las particularidades de grupos de individuos con comportamientos    sobresalientes, prescindiendo del uso de an&aacute;lisis estad&iacute;sticos    rutinarios que no brindan informaci&oacute;n sobre las potencialidades interespec&iacute;ficas    de forma integrada (Hidalgo, 2003). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Teniendo en cuenta    que a&uacute;n existen muchas accesiones de Leucaena en el &aacute;rea tropical    de las cuales no se conocen las potencialidades nutritivas de su biomasa, el    objetivo de esta investigaci&oacute;n fue caracterizar el follaje de 53 accesiones    de este g&eacute;nero, basado en las variaciones de la composici&oacute;n nutricional    utilizando el an&aacute;lisis descriptivo (AD), el de componente principales    (ACP) y el de clasificaci&oacute;n autom&aacute;tica (ACA). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><B>MATERIALES Y    M&Eacute;TODOS</B></font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><I>Ubicaci&oacute;n    y caracter&iacute;sticas del &aacute;rea de muestreo</I> </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La investigaci&oacute;n    se realiz&oacute; en terrenos de la Estaci&oacute;n Experimental de Pastos y    Forrajes &uml;Indio Hatuey&uml;, perteneciente al municipio Perico, provincia    Matanzas, Cuba, ubicada a 20&#186; 50' de latitud Norte y 79&#186; 32' de longitud    Oeste, a una altitud de 19,9 msnm. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Las accesiones    objeto de estudio fueron plantadas sobre un suelo Ferral&iacute;tico Rojo lixiviado    (tipo H&uacute;mico nodular ferruginoso hidratado) de r&aacute;pida desecaci&oacute;n.<B>    </B>La fertilidad natural se considera buena, con un pH ligeramente &aacute;cido    (6,4) a neutro (7,3) y presenta un contenido bajo a medio de materia org&aacute;nica    (Hern&aacute;ndez <I>et al</I>., 1999). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El r&eacute;gimen    de lluvias se enmarca en dos per&iacute;odos anuales: uno lluvioso entre mayo    y octubre, y otro seco que abarca desde noviembre a abril. La temperatura oscila    entre 16,2 y 28,5&#186;C, con una humedad relativa elevada (60-70%). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><I>Siembra y establecimiento    de las accesiones</I> </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Las accesiones    de leucaena<I> </I>se sembraron en julio de 1996 en un &aacute;rea experimental    de 0,75 ha, en cinco parcelas simples distribuidas al azar (cuatro plantas de    cada accesi&oacute;n). La distancia de siembra fue de 6 x 3 m. </font>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Despu&eacute;s    del a&ntilde;o de establecimiento, a la plantaci&oacute;n se le realiz&oacute;    un corte de homogenizaci&oacute;n a 1,5 m sobre el nivel del suelo, para posteriormente    someterla a un r&eacute;gimen de cortes continuos cada 90 d&iacute;as a la misma    altura. En el &aacute;rea no se aplic&oacute; riego, fertilizaci&oacute;n ni    herbicidas. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><I>Accesiones evaluadas</I>    </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Se estudiaron cincuenta    y tres accesiones de leucaena pertenecientes a la colecci&oacute;n de la EEPFIH.    Estas fueron: <I>L. leucocephala</I> (cv. Cunningham, cv. CNIA-250, cv. Ipil-Ipil,<I>    </I>cv. Per&uacute;,<I> </I>K-8, K-28, K-67, 7,<I> </I>cv.<I> </I>M&eacute;xico,<I>    </I>cv.<I> </I>Am&eacute;rica, CIAT-751, CIAT-871, CIAT-932, CIAT-937, CIAT-7384,    CIAT-7884, CIAT-7929, CIAT-7985, CIAT-7988, CIAT-8069, CIAT-8815, CIAT-9119,    CIAT-9383, CIAT-9411, CIAT-9438, CIAT-9441, CIAT- 9442, CIAT-9993, CIAT-17480,    LPIII-187, IH-164, IH-449, IH-1069, IH-1140, Ecotec, IRI-3164, IRI-3219), <I>L.    macrophylla</I> (CIAT-17231,<B> </B>CIAT-17233, CIAT-17237, CIAT-17240, CIAT-17241,    CIAT-17243 y CIAT-17245), <I>L. lanceolata</I> (CIAT-17223, CIAT-17501, CIAT-17252,    CIAT-17255, CIAT-17256), <I>L. diversifolia</I> (CIAT-17270, CIAT-17485), <I>L.    esculenta</I> (CIAT-17225) y <I>L. glauca</I>. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><I>Per&iacute;odo    de evaluaci&oacute;n</I> </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Se evalu&oacute;    la calidad de la biomasa por un per&iacute;odo de tres a&ntilde;os consecutivos    (2000-2003). Se realizaron dos muestreos anuales, uno en cada &eacute;poca:    el de la seca en enero y el de la lluvia en julio. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">En esta investigaci&oacute;n    no se incluy&oacute; la evaluaci&oacute;n del efecto de la &eacute;poca, ya    que en investigaciones previas se demostr&oacute; el efecto marginal de los    per&iacute;odos clim&aacute;ticos en las variables m&aacute;s representativas    de la calidad nutricional de esta colecci&oacute;n (Garc&iacute;a, 2009). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><I>Recolecci&oacute;n    y preparaci&oacute;n del material vegetal </I> </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Las muestras de    biomasa comestible de 90 d&iacute;as de edad (800 g de hojas y tallos tiernos    con di&aacute;metros inferiores a 5 mm) fueron recolectadas seis veces durante    el per&iacute;odo evaluado. El material vegetal de cada planta se proces&oacute;    de forma independiente y cada muestra de follaje constituy&oacute; una r&eacute;plica.    Para evitar la variabilidad inducida por la metodolog&iacute;a de colecta, siempre    se tom&oacute; material vegetal de la regi&oacute;n media, apical y basal de    los &aacute;rboles, evitando los rebrotes m&aacute;s j&oacute;venes, seg&uacute;n    lo recomendado por Stewart y Dunsdon (1998) en evaluaciones similares realizadas    en numerosas accesiones de leucaena. Cada lote de biomasa se llev&oacute; de    forma inmediata al laboratorio y fueron secados por cinco d&iacute;as a temperatura    ambiente en ausencia de luz. Posteriormente se molieron hasta un tama&ntilde;o    de part&iacute;cula de 1 mm y se colocaron en frascos &aacute;mbar de vidrio    hasta el momento del an&aacute;lisis. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><I>Mediciones anal&iacute;ticas</I>    </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los contenidos    de materia seca (MS), prote&iacute;na cruda (PC), prote&iacute;na verdadera    (PV), fibra detergente neutro (FDN), fibra detergente &aacute;cido (FDA), fibra    cruda (FC), lignina detergente &aacute;cido (LDA), celulosa, calcio (Ca), f&oacute;sforo    (P), potasio (K) y cenizas se determinaron mediante las metodolog&iacute;as    propuestas por la AOAC (1990). </font>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La cuantificaci&oacute;n    de los polifenoles totales (FT) se realiz&oacute; mediante el m&eacute;todo    de Folin-Ciocalteu (Makkar, 2003); los taninos precipitantes (TPP) se determinaron    con el uso de la alb&uacute;mina de suero bovino (Makkar <I>et al</I>., 1988)    y los taninos condensados (TC) basado en el ensayo de <I>n</I>-butanol, mediante    las modificaciones propuestas para la cuantificaci&oacute;n de proantocianidinas    en el follaje de especies de Leucaena (Dalzell y Kerven, 1998; Dalzell, 2000).    El f&oacute;sforo f&iacute;tico (P. f&iacute;tico) se determin&oacute; a trav&eacute;s    de las modificaciones realizadas al m&eacute;todo original propuesto por Early    y Turk (1944). Los contenidos de mimosina se cuantificaron mediante el desarrollo    de color (Matsumoto y Sherman, 1951). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">En la estimaci&oacute;n    de la degradabilidad <I>in situ </I>de la MS<I> </I>(DMS), degradabilidad <I>in    situ </I>de la PC (DPC) y degradabilidad <I>in situ</I> de la FDN (DFDN) se    utiliz&oacute; 48 h como tiempo de incubaci&oacute;n. Se evaluaron cinco muestras    por accesi&oacute;n. El experimento se llev&oacute; a cabo en per&iacute;odos    continuos de 15 d&iacute;as. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La degradabilidad    se estim&oacute; mediante el procedimiento de las bolsas de nailon en rumen    (Mehrez y &Oslash;rskov, 1977), empleando dos bolsas por cada muestra y tres    repeticiones, para un total de 30 incubaciones por accesi&oacute;n. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Aproximadamente    2,5 g de biomasa comestible fueron incubados en el rumen de tres ovinos Criollos    (38,2 &#177;3,32 kg de peso vivo) con c&aacute;nula permanente; antes y durante    de la incubaci&oacute;n de cada tratamiento, estos fueron adaptados a consumir    una dieta constante formada por heno <I>ad libitum</I> (<I>Cynodon nlemfluensis</I>),    170 g de concentrado comercial por animal por d&iacute;a (PC: 18,5%, FDN: 65,3%;    cenizas: 5,9%) y agua a voluntad. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><I>Dise&ntilde;o    experimental, tratamientos y m&eacute;todos estad&iacute;sticos</I> </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Se emple&oacute;    un dise&ntilde;o totalmente aleatorizado donde la cantidad de r&eacute;plicas    fue dependiente de cada variable, y las accesiones evaluadas constituyeron los    tratamientos. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">En el procesamiento    de la informaci&oacute;n se utiliz&oacute; el paquete estad&iacute;stico SPSS    versi&oacute;n 10.0 para Windows&#174; (Visauta, 1998). Para llevar a cabo el    ACP se emple&oacute; la opci&oacute;n Data Reduction y mediante la matriz de    covarianza se obtuvieron las relaciones entre las variables (Philippeau, 1986).    En el ACA se utiliz&oacute; el m&eacute;todo de Ward y la distancia Euclidiana    como medida cuantitativa de diferenciaci&oacute;n entre los casos. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><B>RESULTADOS Y    DISCUSI&Oacute;N</B></font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">En la tabla 1 se    muestran los resultados del AD para la composici&oacute;n qu&iacute;mica y el    valor nutritivo. De acuerdo con sus valores medios y el rango de variaci&oacute;n,    en sentido general la colecci&oacute;n en estudio se caracteriz&oacute; por    presentar elevadas concentraciones de prote&iacute;na y proporci&oacute;n de    cenizas, as&iacute; como una degradabilidad ruminal alta, aun cuando los contenidos    de f&oacute;sforo se consideran bajos. Este &uacute;ltimo resultado coincide    con lo informado en evaluaciones de forrajes tropicales, ya que este macroelemento    se encuentra en d&eacute;ficit en la mayor&iacute;a de los follajes de &aacute;rboles    y arbustos tropicales, que sirven para la alimentaci&oacute;n de los rumiantes    (Baldiz&aacute;n, 2003). </font>     <P align="center"><img src="/img/revistas/pyf/v32n1/t0106109.gif" width="484" height="508">     
]]></body>
<body><![CDATA[<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El contenido promedio    de polifenoles y TC fue inferior a la concentraci&oacute;n m&iacute;nima informada    por Makkar (2003) en la cual se comienza a afectar la fermentaci&oacute;n en    el rumen (FT: 4,2% y TC: 6,0%). No obstante, este resultado no es extrapolable    a todas las condiciones experimentales y especies vegetales, ya que depende    de la estructura qu&iacute;mica de los compuestos, su actividad biol&oacute;gica,    el m&eacute;todo por el cual se cuantifican y el medio biol&oacute;gico en que    se eval&uacute;an (Dalzell, 2000). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El contenido de    TPP se encuentra en el orden en que la precipitaci&oacute;n de prote&iacute;nas,    por parte de los taninos, afecta cuantiosamente la actividad de la flora ruminal    (2,2%) (Makkar, 2003); por ello esta variable podr&iacute;a ser una de las m&aacute;s    importantes en la discriminaci&oacute;n del perfil fitoqu&iacute;mico de estos    forrajes, considerando que los valores de TC, por s&iacute; solos, no constituyen    indicadores precisos para la caracterizaci&oacute;n antinutricional de los follajes    (Garc&iacute;a <I>et al.</I>, 2006) </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El nivel de P.    f&iacute;tico de la biomasa fue extremadamente bajo, lo cual coincide con cuantificaciones    realizadas en el forraje de accesiones de <I>Leucaena</I> (Garc&iacute;a <I>et    al</I>., 2008). Este metabolito es t&iacute;pico en los granos y las oleaginosas    utilizados en la alimentaci&oacute;n animal, donde se encuentra en elevadas    concentraciones (0,2-2,4%) y desempe&ntilde;a funciones ecofisiol&oacute;gicas    importantes. No obstante, tambi&eacute;n es conocido que mediante los procesos    de movilizaci&oacute;n puede estar presente en el follaje, aunque en concentraciones    mucho m&aacute;s bajas, como las informadas por Galindo <I>et al</I>. (2005)    en el forraje de <I>Gliricidia sepium</I>. En las biomasas analizadas, donde    solo se encontr&oacute; como metabolito traza, este compuesto no constituye    un factor delet&eacute;reo potencial en la fisiolog&iacute;a digestiva de los    rumiantes. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Por otra parte,    aunque la mimosina es considerada el t&oacute;xico de mayor relevancia en las    especies de Leucaena, la concentraci&oacute;n promedio de este amino&aacute;cido    no proteico fue baja, si se compara con los resultados de otras colecciones    cultivadas en condiciones tropicales (Clavero, 1998; Garc&iacute;a <I>et al</I>.    2008). El nivel de este metabolito, en todos los casos, fue inferior a 6%, concentraci&oacute;n    indicada como causante de efectos adversos tanto en los monog&aacute;stricos    como en los rumiantes (Razz <I>et al.,</I> 2004). Por tales motivos, en las    especies evaluadas podr&iacute;a constituir un compuesto aportador de nitr&oacute;geno    a los microorganismos del rumen y desempe&ntilde;arse como un metabolito pronutricional,    al influir positivamente en la degradabilidad de la fracci&oacute;n proteica    (Razz <I>et al.</I>, 2004). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La degradaci&oacute;n    de las fracciones nutritivas (MS, PC, FDN) de los follajes integrantes de la    colecci&oacute;n fue elevada si se compara con la de otros &aacute;rboles y    arbustos de composici&oacute;n nutricional similar, pero con una mayor cantidad    de taninos, y que son utilizados com&uacute;nmente en la alimentaci&oacute;n    animal. Dicho aspecto resalta las potencialidades del g&eacute;nero <I>Leucaena</I>    como alternativa forrajera en una gran diversidad de condiciones agroambientales,    aun cuando su desempe&ntilde;o est&aacute; asociado a las caracter&iacute;sticas    de crecimiento y de adaptaci&oacute;n de cada accesi&oacute;n. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">En la tabla 2 se    muestran los resultados del ACP. En este sentido, la varianza total extra&iacute;da    mediante el an&aacute;lisis fue discreta (52,47%). </font>     <P align="center"><img src="/img/revistas/pyf/v32n1/t0206109.gif" width="355" height="497">     
<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">En la primera componente    (CP1) se extrajo el 25,44% de la variabilidad y los indicadores que explicaron    mejor la varianza fueron la fracci&oacute;n fibrosa (FDN, FDA y celulosa), la    polifen&oacute;lica (FT, TPP y TC), los contenidos de mimosina y la degradaci&oacute;n    <I>in situ</I> de la MS, PC y FDN. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Con respecto a    la interrelaci&oacute;n entre las variables, los componentes de la pared celular,    FT, TPP, TC, y la mimosina se relacionaron negativamente con la degradaci&oacute;n    ruminal. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La segunda componente    (CP2) explic&oacute; el 14,71% de la variabilidad y en su formaci&oacute;n contribuy&oacute;    la LDA y la mayor&iacute;a de los componentes de la fracci&oacute;n fibrosa    (FDN, FDA, FC) explicados en el plano CP<SUB>1</SUB>-CP<SUB>2</SUB>, todos relacionados    positivamente entre s&iacute;. </font>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La tercera componente    (CP3) extrajo el 12,32% y la mayor representaci&oacute;n correspondi&oacute;    con el porcentaje de P f&iacute;tico. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">En las evaluaciones    de los recursos fitogen&eacute;ticos, el porcentaje de varianza es extremadamente    &uacute;til para definir cu&aacute;les de las variables cuantificadas presentan    la mayor importancia en la caracterizaci&oacute;n de accesiones gen&eacute;ticamente    relacionadas entre s&iacute; (Hidalgo, 2003). En este sentido, el porcentaje    de varianza extra&iacute;do en las primeras tres componentes puso de manifiesto    que las accesiones presentaron diferencias sustanciales en algunas de las variables    cuantificadas. No obstante, se debe se&ntilde;alar que mediante el ACP se logr&oacute;    explicar solamente el 52,47% de la varianza total, por lo que existi&oacute;    una parte de la variabilidad num&eacute;rica que no qued&oacute; dilucidada    en esta investigaci&oacute;n. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La variabilidad    extra&iacute;da, como resultado del ACP, fue inferior a la informada en una    evaluaci&oacute;n solo con accesiones de <I>L. leucocephala</I> (85,83%), en    la cual se demostr&oacute; la mayor variaci&oacute;n fenot&iacute;pica entre    las accesiones y cultivares comerciales (Garc&iacute;a <I>et al.,</I> 2008).    Sin embargo, en esta investigaci&oacute;n donde se estudiaron varias accesiones    de diferentes especies, las pertenecientes a <I>L. leucocephala</I> (IH, IRI    y Ecotec) presentaron caracter&iacute;sticas nutricionales similares al resto    de los ecotipos de <I>L. lanceolata</I>, <I>L. diversifolia</I> y <I>L. esculenta</I>.    </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Considerando que    solamente una parte de las variables cuantificadas (FDN, FDA, celulosa, LAD,    FT, TPP, TC, mimosina, DMS, DPC y DFDN) agruparon la mayor variaci&oacute;n    num&eacute;rica, resalta la importancia de estos indicadores como los de mayor    relevancia desde el punto de vista comparativo. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La relaci&oacute;n    fuertemente inversa entre los niveles de fen&oacute;lidos (FT, TPP, TC) y los    componentes de la pared celular con la degradabilidad ruminal, sugiere un efecto    negativo de estos compuestos en el sistema digestivo de los rumiantes, aspecto    que ha sido com&uacute;nmente informado sobre todo en investigaciones con <I>L.    leucocephala</I> (Dalzell <I>et al</I>., 1998). Sin embargo, la mayor&iacute;a    de las evaluaciones nutricionales y fitoqu&iacute;micas con otras especies de    este g&eacute;nero se han realizado en las &uacute;ltimas d&eacute;cadas, y    en muchos casos los resultados muestran divergencias asociadas con aspectos    inherentes a los cultivares y a las condiciones ambientales (Hughes y Harris,    1995; Stewart y Dunsdon, 1998). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Quiz&aacute;s la    presencia conjunta de fenoles y mimosina, relacionados en un mismo componente,    describa una estrategia de protecci&oacute;n de estas plantas, considerando    que dentro de la mayor&iacute;a de las especies de Leucaena estos metabolitos    se encuentran presentes de forma conjunta, independientemente de la fenolog&iacute;a,    las condiciones edafoclim&aacute;ticas y la edad de la biomasa (Dalzell, 2000).    </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La fuerte relaci&oacute;n    positiva entre los dos tipos de compuestos secundarios, relacionados en la CP1,    pudiera constituir un aspecto de inter&eacute;s para el cruzamiento y la selecci&oacute;n    de h&iacute;bridos interespec&iacute;ficos con niveles inferiores de polifenoles    y mimosina, con el fin de aumentar la aceptabilidad de los forrajes por parte    de los animales. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La inexistencia    de una relaci&oacute;n fuerte (en una misma componente principal) entre los    niveles de P total y P. f&iacute;tico mostr&oacute; la poca correspondencia    entre las fracciones de f&oacute;sforo, lo cual no coincide con lo obtenido    en los granos de numerosos ingredientes utilizados para la alimentaci&oacute;n    animal (Ravindran <I>et al</I>., 1995), pero s&iacute; con las aseveraciones    de Butler y Jones (1973) acerca de que la mayor proporci&oacute;n de P en los    follajes se encuentra en forma de sales inorg&aacute;nicas. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Aunque se conoce    que estos compuestos son abundantes en los cereales, los resultados quiz&aacute;s    describan la poca importancia de los fitatos presentes en las accesiones de    Leucaena evaluadas y su poca relevancia ecofisiol&oacute;gica, con respecto    a otros metabolitos mayoritarios presentes en las hojas y los tallos tiernos.    </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">A partir de los    resultados del an&aacute;lisis de clasificaci&oacute;n autom&aacute;tica se    muestran las agrupaciones formadas en dependencia de las caracter&iacute;sticas    de cada accesi&oacute;n (tabla 3). </font>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P align="center"><img src="/img/revistas/pyf/v32n1/t0306109.gif" width="640" height="456">     
<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Las accesiones    se dividieron en tres grupos con caracter&iacute;sticas diferenciadas desde    el punto de vista nutricional. El grupo I estuvo integrado por la mayor&iacute;a    de las accesiones de <I>L. leucocephala</I> CIAT (9442, 9441, 7884, 9383, 9119,    94,38, 751, 8815, 7985, 8069, 7988, 937, 7929, 17480, 9993, 932, 9411, 871),    <I>L. leucocephala</I> Ecotec, <I>L. leucocephala</I> IRI (3164 y 3219), <I>L.    leucocephala</I> P-III-187 y la totalidad de las accesiones de <I>L. lanceolata.</I>    </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El grupo II lo    formaron todas las accesiones de <I>L. diversifolia</I>, <I>L. macrophylla</I>,    <I>L. esculenta</I>, <I>L. leucocephala</I> IH, <I>L. leucocephala</I> cv. Per&uacute;,    <I>L. leucocephal</I>a CIAT 7384 y <I>L. glauca</I>. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El grupo III estuvo    formado solamente por accesiones de <I>L. leucocephala</I> (cv. Cunningham,    cv. CNIA-250, cv. Ipil-ipil, K-8, K-28, K-67, cv. 7, cv. M&eacute;xico y cv.    Am&eacute;rica). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Desde el punto    de vista comparativo, las accesiones del grupo I presentaron los resultados    m&aacute;s sobresalientes de forma integral. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Las del grupo II    mostraron los resultados m&aacute;s discretos y se caracterizaron por un mayor    contenido de mimosina y de fracci&oacute;n fibrosa y polifen&oacute;lica. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Por su parte, las    accesiones del grupo III presentaron resultados similares a las del grupo I.    No obstante, las principales diferencias estuvieron asociadas a sus contenidos    superiores de prote&iacute;na y una mayor degradabilidad ruminal de la MS y    de la prote&iacute;na, as&iacute; como una mayor concentraci&oacute;n de metabolitos    secundarios. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Aunque el perfil    nutritivo fue similar en todos los casos (tabla 4), las accesiones de <I>L.    leucocephala</I> CIAT, las de <I>L. lanceolada</I> y el resto de los cultivares    comerciales de <I>L. leucocephala</I> presentaron &iacute;ntegramente un mejor    comportamiento que las pertenecientes a <I>L. macrophylla</I>, <I>L. diversifolia</I>    y <I>L. esculenta,</I> aspecto se&ntilde;alado tambi&eacute;n por Stewart y    Dunsdon (1998) en una investigaci&oacute;n realizada en Centroam&eacute;rica    donde se incluyeron algunas accesiones de estas especies. </font>     <P align="center"><img src="/img/revistas/pyf/v32n1/t0406109.gif" width="550" height="496">     
<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Sin embargo, aunque    <I>L. diversifolia</I> present&oacute; una fracci&oacute;n fen&oacute;lica acentuada,    en experimentos con rumiantes se ha podido determinar que aun as&iacute; constituye    una buena alternativa para la alimentaci&oacute;n de estos animales (Stewart    <I>et al</I>., 1992; Stewart y Dunsdon, 1998). No obstante, todas pueden ser    utilizadas esencialmente como fuente de materia seca y nitr&oacute;geno al ecosistema    ruminal. </font>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La degradabilidad    de la MS oscil&oacute; como promedio entre 47 y 75%, y los resultados m&aacute;s    bajos se observaron con <I>L. diversifolia </I>y<I> L. esculenta</I>; ello quiz&aacute;s    se deba a que, considerando los relativamente elevados niveles de taninos precipitantes    entre las accesiones de estas especies (4,44 &#177;0,49 %BS), los TPP pudieron    acomplejar la prote&iacute;na e imposibilitar la degradaci&oacute;n efectiva    del follaje en el tracto gastrointestinal, ya que<I> </I>se ha demostrado que    cuando estos compuestos se encuentran en concentraciones elevadas se afecta    cuantiosamente la degradabilidad (Makkar, 2003). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Sin embargo, tambi&eacute;n    se debe se&ntilde;alar que las accesiones del grupo III aunque presentaron los    mayores contenidos de metabolitos secundarios polifen&oacute;licos, comparativamente    con el grupo I, mostraron la mayor degradabilidad ruminal de la MS y la fracci&oacute;n    nitrogenada de toda la colecci&oacute;n. Estos resultados, en principio contradictorios,    posiblemente podr&iacute;an encontrarse relacionados con una variabilidad marcada    en la actividad biol&oacute;gica de los taninos presentes en las accesiones    del grupo III, si se considera la afinidad de los taninos por las biomol&eacute;culas.    </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Por otra parte,    resulta muy incierto atribuir las variaciones de la composici&oacute;n qu&iacute;mica    inter-accesiones a las condiciones que prevalecieron en el &aacute;rea de estudio,    ya que se conoce muy poco sobre las caracter&iacute;sticas fitoqu&iacute;micas    de las accesiones evaluadas, fundamentalmente las de <I>L. macrophylla</I>,    <I>L. lanceolata</I> y <I>L. esculenta</I>. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Se debe destacar    que los resultados con las accesiones de <I>L. leucocephala</I> y <I>L. lanceolata</I>    pudieran ser comparables con los informados por Garc&iacute;a <I>et al</I>.    (2008) en un amplio n&uacute;mero de accesiones de <I>L. leucocephala</I> CIAT,    establecidas en iguales condiciones experimentales. Sin embargo, la composici&oacute;n    nutricional de <I>L. esculenta</I> y <I>L. diversifolia</I> fue similar a la    reportada en accesiones de <I>L. macrophylla</I> (Garc&iacute;a <I>et al</I>.,    2008a). </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">De manera general,    el perfil de las accesiones pertenecientes a una misma especie parece corresponder    a un patr&oacute;n invariante regido solamente por control gen&eacute;tico;    dicho comportamiento fue menos acentuado en las integrantes de <I>L. leucocephala</I>,    las cuales se distribuyeron en los tres grupos formados, quiz&aacute;s porque    ha sido una especie m&aacute;s domesticada y la continua labor de selecci&oacute;n    se ha realizado para mejorar sus atributos forrajeros de una forma multidireccionada.    No obstante, en todos los casos las diferencias qu&iacute;micas entre las accesiones    se encuentran relacionadas con las caracter&iacute;sticas genot&iacute;picas    y su expresi&oacute;n en el ambiente de experimentaci&oacute;n. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Asimismo, se debe    se&ntilde;alar que aunque de forma integral el grupo I fue el de mejores resultados,    en el grupo II se encuentran la mayor&iacute;a de las accesiones de las cuales    se tiene mayor informaci&oacute;n, desde el punto de vista agroproductivo. De    ah&iacute; la necesidad de realizar m&aacute;s investigaciones con las accesiones    de <I>L. leucocephala</I> y <I>L. lanceolata</I> de la l&iacute;nea CIAT (grupo    I) y los cultivares comerciales (grupo III), los cuales muestran elevadas potencialidades.    </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><I>Conclusiones</I>    </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Todas las accesiones    evaluadas constituyen buenas alternativas para los sistemas en los cuales su    follaje se utilice para alimentar los rumiantes. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Basado en los resultados    del an&aacute;lisis de componentes principales, las accesiones de la colecci&oacute;n    se pueden diferenciar fundamentalmente por los contenidos de la fracci&oacute;n    fibrosa, los taninos, la mimosina y la degradabilidad ruminal. Sin embargo,    el contenido de materia seca, prote&iacute;nas, minerales mayoritarios, cenizas    y fitatos no constituyen variables representativas para diferenciarlas. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Mediante el an&aacute;lisis    de clasificaci&oacute;n autom&aacute;tica y la media grupal de las variables    m&aacute;s importantes de cada conglomerado, se determin&oacute; que la biomasa    comestible de las accesiones de <I>L. leucocephala </I>y<I> L. lanceolata </I>presentan    una mejor calidad nutricional, comparadas con las de <I>L. macrophylla</I>,    <I>L diversifolia</I> y <I>L. esculenta</I>. Estas &uacute;ltimas presentan    mayor cantidad de fenoles, taninos precipitantes y taninos condensados, y menor    degradabilidad ruminal. </font>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><B>REFERENCIAS    BIBLIOGR&Aacute;FICAS</B></font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">1. AOAC. 1990.    Official methods of analysis. 15<SUP>th</SUP> ed. Association of Official Agricultural    Chemistry. Washington, D.C. USA. 500 p. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">2. Baldiz&aacute;n    A. 2003. Producci&oacute;n de biomasa y nutrimentos de la vegetaci&oacute;n    del bosque seco tropical y su utilizaci&oacute;n por rumiantes a pastoreo en    los llanos centrales de Venezuela. Tesis de Doctorado en Ciencias Agr&iacute;colas.    Caracas, Venezuela. 288 p. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">3. Butler, J.W.    &amp; Jones, D.I.H. 1973. Mineral biochemistry of herbage. En: (Butler J.W.    &amp; Bailey, R.W., Eds.) Chemistry and biochemistry of herbage. Academic Press,    London. p. 127 </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">4. Clavero, T.    1998. <I>Leucaena leucocephala</I>. Alternativa para la alimentaci&oacute;n    animal. Centro de Transferencia de Tecnolog&iacute;a en Pastos y Forrajes. La    Universidad del Zulia, Maracaibo, Venezuela. 78 p. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">5. Dalzell, A.S.    2000. Genotypic and environmental effects con proanthocyanidin in the <I>Leucaena</I>    genus. PhD. Thesis University of Queensland. Queensland, Australia. 150 p. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">6. Dalzell, A.S.    <I>et al</I>. 1998. Chemical composition of<I> Leucaena </I>and implication    for forage quality. In: <I>Leucaena</I> adaptation, quality and farming systems.    (Shelton, H.M.; Gutteridge, R.C.; Mullen, B.F. &amp; Bray, R.A., Eds). ACIAR    Proceedings No. 86, p. 227 </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">7. Dalzell, A.S.    &amp; Kerven, G.L. 1998. A rapid method for the measurement of <I>Leucaena</I>    spp. proanthocyanidins by the proanthocyanidin (butanol/HCl) assay. <I>J. Sci.    Food Agric</I>. 78:405 </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">8. Early, E.B &amp;Turk,    E.E. 1944. Time and rate of synthesis of phytin in corn grain during the reproductive    period. <I>J. Anim. Sci. Agron</I>., 36:803 </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">9. Galindo, Juana    <I>et al</I>. 2005. Impacto de los &aacute;rboles, arbustos y otras leguminosas    en la ecolog&iacute;a ruminal de animales que consumen dietas fibrosas. <I>Pastos    y Forrajes</I>. 28 (1):59 </font>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">10. Garc&iacute;a,    D.E. <I>et al</I>.<SUP>. </SUP>2006. Composici&oacute;n proximal, niveles de    metabolitos secundarios y valor nutritivo del follaje de algunos &aacute;rboles    forrajeros tropicales<I>. Arch. Zootecnia</I>.<B> </B>55 (212):373 </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">11. Garc&iacute;a,    D.E. <I>et al</I>. 2008. Evaluaci&oacute;n de diecinueve accesiones de <I>Leucaena    leucocephala</I> basada en la calidad nutritiva del forraje.<I> Zootecnia Trop</I>.    26 (1):9 </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">12. Garc&iacute;a,    D.E. <I>et al</I>. 2008a.<B> </B>Evaluaci&oacute;n de la calidad nutritiva de    siete ecotipos de <I>Leucaena macrophylla</I> (Benth.) en un Suelo Ferral&iacute;tico    Rojo Lixiviado<I>. Rev. Fac. Agron</I>. <I>(LUZ)</I><B>. </B>25 (1):43 </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">13. Garc&iacute;a,    D.E. 2009. Efecto de la &eacute;poca y la poda en la calidad nutritiva de especies    forrajeras en condiciones tropicales. Informe t&eacute;cnico de la actividad    investigativa en el per&iacute;odo 2006-2008. Instituto Nacional de Investigaciones    Agr&iacute;colas. Pampanito, estado Trujillo, Venezuela. 232 p. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">14. Hern&aacute;ndez,    A<I>. et al. </I>1999. Nueva versi&oacute;n de clasificaci&oacute;n gen&eacute;tica    de los suelos de Cuba. Instituto de Suelos. Ministerio de la Agricultura. La    Habana, Cuba. 64 p. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">15. Hidalgo, R.    2003. Variabilidad gen&eacute;tica y caracter&iacute;sticas de especies vegetales.    En: An&aacute;lisis estad&iacute;stico de datos de caracterizaci&oacute;n morfol&oacute;gica    de recursos filogen&eacute;ticos. (Franco, T.L. e Hidalgo, T.R., Eds.). Bolet&iacute;n    t&eacute;cnico No. 8. Instituto Internacional de Recursos Filogen&eacute;ticos    (IPGRI). Cali, Colombia. 89 p. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">16. Hughes, C.E.    &amp; Harris, S.A. 1995. Systematic of <I>Leucaena</I>. Recent findings and    implications for breeding and conservation. Proceeding of Workshop. Bogor, Indonesia.    ACIAR Proceeding 57, p. 54 </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">17. Makkar, H.P.S.    2003. Quantification of tannins in tree and shrub foliage. A laboratory manual.    Kluwer Academic Publishers, Netherlands. 102 p. </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">18. Makkar, H.P.S.    <I>et al</I>. 1988. Determination of both tannin and protein in a tannin-protein    complex. <I>J. Agric. Food Chem</I>. 36:523 </font>     <P><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">19. Matsumoto,    H. &amp; Sherman, G.D. 1951. A rapid colorimetric method for the determination    of mimosine. <I>Arch. Biochem. Biophys</I>. 33:195 </font>     ]]></body>
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