Sensibilización de placas para ensayos inmunoenzimáticos con antígenos vacunales.
Coating of ELISA plates with vaccine antigens
Rolando Ochoa, Juan Carlos Martínez, Xenia Ferriol, Ana Margarita García, Eric Estrada, Rosa Blanco,
Tania Licea, Franklin Sotolongo.
RESUMEN
Se describe un procedimiento de sensibilización de placas para ensayos inmunoenzimáticos (ELISA) con antígenos vacunales. Se define como concentración óptima de sensibilización aquella donde se alcanza la mayor densidad óptica con los sueros estándares y la menor con los sueros negativos y el blanco reactivo. Como modelo se emplean ensayos indirectos correspondientes a los antígenos de captura: toxoide tetánico, diftérico y la vesícula de membrana externa de meningococo B, materia prima activa de la vacuna antimeningocócica VA-MENGOC-BC. Esta metodología permite alcanzar un mayor recubrimiento de la fase sólida, lo cual incrementa la sensibilidad de los ensayos. La ocupación de espacios libres en la placa se hizo más evidente con antígenos de menor peso molecular, como los toxoides diftérico y tetánico.
Palabras claves: ELISA, antígeno, vacuna, sensibilización.
ABSTRACT
A procedure for coating ELISA plates with vaccine antigens is described. The optimum coating concentration was that achieving the highest absorbance for the standard sera and the lowest for the negative controls and the reagent blank. Indirect ELISA is used as model. Tetanus and diphtheria toxoids, and meningococcal B outer membrane vesicle, active principle of the meningococcal vaccine VA-MENGOC-BC, were used as capture antigens. That procedure increases sensitivity of the assays due to coating optimization. The saturation of possible free spaces was more evident with the lowest molecular weight antigens, such as diphtheria and tetanus toxoids.
Keywords: ELISA, antigen, vaccine, plate coating.
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