Preparado de inmunoglobulina contra LPS de Pseudomonas aeruginosa serotipo O11.
Immunoglobulin preparation against LPS of Pseudomonas aeruginosa serotype O11.
Aniel Moya1, Lázaro Joó1, Alexandro Rodrígruez2, Janhna Hernández1, Johnatan Hernández1, Juan F.
Almenares3, Denisse Berrios1, Zoraida Rodríguez4, Armando Cádiz1, Sara C. Esnard1
2. ICBP “Victoria de Girón”. Departamento de Inmunología. Ciudad de La Habana, Cuba.
3. Universidad de Oriente. Centro de Estudios de Biotecnología. Santiago de Cuba, Cuba.
4. Banco de Sangre de Marianao. Ciudad de La Habana, Cuba
RESUMEN
Basado en estudios de serotipificación de cepas de Pseudomonas aeruginosa aisladas en medios ]]> intrahospitalarios en Santiago de Cuba, se desarrolló un preparado de inmunoglobulinas de alta especificidad contra el LPS de P. aeruginosa O11, a partir de plasma de donantes sanos con títulos relevantes contra el antígeno lipopolisacarídico de esta bacteria gramnegativa. De los 10 serotipos, probados contra sueros de donantes normales de banco de sangre, el 91% de los mismos mostraron actividad anti LPS O11 mediante el ensayo de Dot Blot. La inmunoglobulina obtenida, con alto rendimiento en el proceso, mostró actividad por Western Blot contra LPS O11, superior a la observada para el INTACGLOBIN®.
Palabras Claves: Pseudomonas aeruginosa, inmunoglobulina intravenosa (IGIV), fraccionamiento alcohólico, LPS O11.
ABSTRACT
Based on classification studies of isolated Pseudomonas aeruginosa strains from patients of Santiago de Cuba’s Hospitals, an immunoglobulin preparation with high specificity to P. aeruginosa O11 LPS was developed, from plasma of healthy donors with relevant titer against this lipopolysaccharidic antigen of this gram (-) bacteria. From 10 serotype of P. aeruginosa tested against healthy donor’s serum, 91% of it showed activity anti LPS O11 antigens according to Dot Blot results and the immunoglobulin obtaining with high yield, during purification process, showed an antibody anti LPS reactivity by Western Blot assay higher than INTACGLOBIN®.
Keywords: Pseudomonas aeruginosa, Intravenous Immunoglobulin (IVIG), Alcoholic Fractionation, LPS O11.
Referencias
1. Trilla A., Barrio JL. Infecciones nosocomiales. En Farreras y Rozman. Medicina Interna. España: Ediciones Mosby-Doyma Libros S.A. [Ed. en CD-ROM]. Decimotercera edición. 1996; 2553-2558.
2.Prutit BA. Mc., Manus AT., Kim SH., Goodwing CW. Burn Wound Infections: Current Status. World J. Surg. 1998; 22: 135-145.
3.Rumbaugh KP., Hamood AN., Griswold J.A. Analysis of Pseudomonas aeruginosa clinical isolates for possible variations within the virulence genes exotoxin A and Exoenzyme S. Journal of Surgical Reseach. 1999; 82:95-105.
4.Kamath S., Kapatral V., Chakrabarty. Cellular funtion of elastase in Pseudomonas aeruginosa: role in the cleavage of nucleoside diphosphate kinase and in alginate synthesis. Molecular Microbiology.1998; 30(5): 933-941.
5.Johansen HK. Potenctial of preventing Pseudomonas aeruginosa lung infection in cystic fibrosis patients. Experimental studies in animals. Acta Pathologica Microbilogica et Inmunologica Scandinavica. 1996; 63(104).
6. Hamood AN. Isolation and characterization of toxin A excretion deficint mutants of Pseudomonas aeruginosa PA O1. Infection and Immunity. 1992; 60 (2):510-517.
7.Jaffar MC. Production of elastase, exotoxin A and alkaline protease in sputa during pulmonary exacerbation of cystic fibrosis in patients chronically infected by Pseudomonas aeruginosa. Journal Clinical Microbiology.1995; 33(4):924-929.
8.Kholodkova E.U. The serological characteristic of the antigens of Pseudomonas aeruginosa isolated from patients with a Pseudomonas infection during immunotherapy. Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol.1991; 8(8):59-61.
9.Mc Groarty EJ., Rivera M. Growth-dependent alterations in production of serotype-specific and common antigen lipopolysaccharides in Pseudomonas aeruginosa PAO1.Infection and Immunity. 1990; 58(4):1030-1037.
10.Young L.S. the role of exotoxins in the patogenesis of Pseudomonas aeruginosa infection. The Journal of Infectious Diseases.1983; 142(4):624-630.
11.Castañeda L, Castellano F, Castellano M.E, Cádiz A. Utilización de INTACGLOBINen sepsis graves en una unidad de cuidados intensivos. Rev Cienc Med 1994; 3(12).
12.Pitt TLy Erdman YJ. The specificity of agglutination reactions of Pseudomonas aeruginosa with O antisera. Journal of Medical Microbiology. 1978; 11:15-23.
13.Sambrook J, Fritisch E.F, Maniatis T. Molecular cloning. In:A Laboratory Manual. 2nd Ed; 1989.
14.Ochoa R., Martínez JC., Ferriol X., Estrada E., García AM., Blanco R., Sotolongo F. Guía para la estandarización de técnicas immunoenzimáticas en ensayos de vacunas. Vaccimonitor. 2000; 9(3):13-18.
15.Cádiz A., Hernández J., Joó L., Moya A. Introducción al método de fraccionamiento alcohólico empleado en Cuba para la producción de inmunoglobulinas de uso intravenoso. Vaccimonitor. 1998; (7)5:2-7.
16.Gornall AG., David MN., Bordwill E.J. Determination of serum proteins by the Biuret reaction. Journal of Biological Chemistry. 1949; 177: 751-766.
17.Margni RA. Reacción antígeno_anticuerpo in vitro. En Margni RA.Inmunología e Inmunoquímica. Cuba: Edición Revoluciuonaria. Tercera edición; 1982: 23-264.
18.Cryz SJ. et al. Protection against fatal K. Pneumoniae burn wound sepsis by passive transfer of anticapsular polisacharide. Infection and Immunity. 1984; 45:139-142.
19.Cross AS. Utilidad de las inmunoglobulnas intravenosas en las infecciones bacterianas. En: Peng Lee Yap. Inmunoglobulinas intravenosas. Barcelona: J.R. Prous, S.A; 1993:131-158.
20.Cryz SJ Jr et al. Production and characterization of human hyperimmune immunoglobulin against Pseudomonas aeruginosa and Klebsiella species, The Journal of Infectious Diseases.1991; 163:1055-61.
21.Pressler T. IgG subclass and chromosomic antibodies and bacterial infection. Subclass antibodies and the clinical course of chronic Pseudomonas aeruginosa lung infection in cystic fibrosis. Acta Pathologica Microbilogica et Inmunologica Scandinavica. 1996; 66(104).
22.Tarantino MD, Godsmith G. Treatment of acute immune thrombocytopenic purpura. Seminars in Hematology. 1998; (35):28-35.
23.Esnard SC. Empleo de sueros diagnósticos producidos en la República Popular China para la serotipificación de Pseudomonas aeruginosa. Revista Cubana de Farmacia.1997; 31(2):107-112.
24.Castellano B. ME., Cádiz LA., Sánchez GL., Borrero LH. Utilización de la ultrafiltración en la producción de inmunoglobulinas. Revista Cubana de Farmacia. 1996; 30(1):5-10.
25.Cádiz A, Castellano ME, Castillo JR y Melchor A. Comportamiento de algunos parámertros determinantes de efectos adversos inducidos por inmunoglobulinas intravenosas. Revista Cubana de Farmacia. 1995; 29(2):109-116.
26.Trautmann M, Wulf A, Cross A.S, Marre R. Bacterial lipopolysaccharide (LPS-specific antibodies in commercial human inmunoglobulin preparations: superior antbody content of an IgM enriched product.Clinical Experimental Immunology. 1998; 111(1):81-90.
27.Cryz SJ Jr, Fürer EJ., Sadoff JC., Fredeking T. Que J.U. and Cross A.S. Production and characterization of human hyperimmune immunoglobulin against Pseudomonas aeruginosa and Klebsiella species, The Journal of Infectious Diseases. 1991; 163:1055-1061.
28.Cádiz A, Hernández J., Joó L., Moya A., Camero A. Pasteurización de soluciones de inmunoglobulinas de uso intravenoso. 1. Uso de azúcares como estabilizantes.Revista Cubana de Farmacia. 1999; 33(2):83-88. ]]>