50% de coincidencia). Se demostró que las variaciones entre las muestras negativas y positivas se debían precisamente al crecimiento de V. cholerae y que se pueden incorporar pequeños cambios al ensayo sin que esto traiga consigo variaciones en el título de la muestra ni falsos resultados. De acuerdo con los resultados obtenidos, el mismo se considera apto para la evaluación de la respuesta inmune estimulada por un candidato vacunal contra el cólera.]]>
50% coincidence). It was demonstrated that the differences between positive and negative samples were due precisely to Vibrio cholerae growth and that small changes may be introduced in the test without producing variations in sample titer or false results. According to these results, this test is considered appropriate to evaluate the immune response elicited by vaccine candidates against cholera.]]>
Validación del ensayo Vibriocida colorimétrico para determinar anticuerpos séricos contra cepas candidatas vacunales de Vibrio cholerae.
Validation of Colorimetric Vibriocidal Assay to Determine Serum Antibodies against Vaccine Candidate Strains of Vibrio Cholerae.
Bárbara Cedré, Yutzandry Viel, Tamara Rodríguez, Gemma Año, Yadira Pino, Hilda García, Tania Valmaseda, Irma González, Ileana Delgado, Arturo Talavera, José Luis Pérez, Luis García.
Instituto Finlay. Centro de Investigación-Producción de Vacunas y Sueros. Ciudad de La Habana, Cuba. E-mail: bcedre@finlay.edu.cu
RESUMEN
]]> El Instituto Finlay posee un grupo de cepas atenuadas candidatas a vacuna oral contra el cólera, las cuales fueron evaluadas desde el punto de vista de su capacidad inmunogénica mediante la determinación de anticuerpos por el método ELISA y principalmente por el ensayo Vibriocida. Este ensayo mide la funcionalidad de los anticuerpos estimulados por la cepa vacunal, por lo que se considera la herramienta más eficaz para medir el estado de la inmunidad en individuos vacunados contra el cólera y constituye el soporte analítico para el desarrollo de la vacuna anticolérica cubana. En este trabajo se evaluaron la precisión, la especificidad y la robustez del ensayo y los resultados obtenidos estuvieron dentro del criterio de aceptación de esta técnica (>50% de coincidencia). Se demostró que las variaciones entre las muestras negativas y positivas se debían precisamente al crecimiento de V. cholerae y que se pueden incorporar pequeños cambios al ensayo sin que esto traiga consigo variaciones en el título de la muestra ni falsos resultados. De acuerdo con los resultados obtenidos, el mismo se considera apto para la evaluación de la respuesta inmune estimulada por un candidato vacunal contra el cólera.
Palabras claves: V. cholerae, vacuna anticolérica, vibriocida, validación.
ABSTRACT
Finlay Institute possesses a group of attenuated strain candidates for an oral vaccine against cholera. Immunogenicity has been evaluated in volunteers by ELISA antibody determination and mainly by vibriocidal assay. Vibriocidal assay measures the functionality of antibodies elicited by a vaccine strain, that is why it is considered the most efficient tool for determining immunity levels against cholera in vaccines, for which reason, the validation of this test is very important. Precision, specificity and robustness were evaluated in this paper. The results were within the acceptance criteria for this technique (>50% coincidence). It was demonstrated that the differences between positive and negative samples were due precisely to Vibrio cholerae growth and that small changes may be introduced in the test without producing variations in sample titer or false results. According to these results, this test is considered appropriate to evaluate the immune response elicited by vaccine candidates against cholera.
Keywords: Vibriocidal, validation, precision, specificity, robustness
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