Dra. Edelis Castellanos Puerto,1 Lic. José Luis Pérez De Alejo2 y Téc. Maribel Machin Lugones.3
Se realizó un estudio in vitro para demostrar la actividad antirretroviral de 2 especies de Hypericum obtenidas en Cuba (fasciculatum y styphelioides); se trabajó con el antígeno de superficie del virus de la hepatitis B, el cual se mezcló con ambas especies a las concentraciones de 1,5,10,20 y 30 mg/mL y se incubó durante 24, 48, 72 h y 7,14, y 21 días, y posteriormente se evaluó la disminución de la antigenicidad in vitro por un ensayo inmunoenzimático tipo sandwich que se utilizó para cuantificar el antígeno de superficie del virus de la hepatitis B. Se apreció una disminución de la antigenicidad a partir de las 24 h para todas las concentraciones probadas, pero a partir de las 72 h se encontró una significativa disminución de esta antigenicidad. Este estudio representa una posibilidad para utilizar este producto en el tratamiento de enfermedades producidas por retrovirus como el virus de la hepatitis B y el VIH.
DeCS: PLANTAS MEDICINALES/ química; AGENTES ANTIVIRALES; ANTIGENOS DE SUPERFICIE DE LA HEPATITIS B.
A study in vitro was made to demonstrate the antiretroviral activity of 2 Hypericum species obtained in Cuba (fasciculatum and styphelioids). Hepatitis b virus surface antigen (HbsAg) was used and mixed with both species at concentrations of 1,5,10,20and 30mg/mL and then incubated at 24h, 48h, 72h and 7d, 14d and 21d. Then the reduction of antigenicity in vitro was evaluated by a sandwich-type immunoenzymagtic assay ELISA that quantifies HbsAg. It was observed that antigenicity decreased at 24 h for all the tested concentrations; however, from 72h on, a significant reduction of antigenicity occurred at Ag concentrations below the limit values recorded for ELISA tests performed. This study represents a possibility to be used for HbsAg and in HIV treatment. ]]>
Subject headings: PLANTS, MEDICINAL/chemical;ANTIVIRAL AGENTS; HEPATITIS B SURFACE ANTIGENS.
La fitoterapia como ciencia novedosa en el estudio de las plantas medicinales ha tenido gran impacto por los resultados obtenidos en los últimos años, especialmente en los países desarrollados se han creado industrias que producen extractos y productos farmacéuticos de las plantas de mayor relevancia mundial, entre las que se encuentra el Hypericum que tiene varios géneros y más de 300 especies; de él se han estudiado sus efectos antidepresivos,1 vasoprotectores y capilarotrópico e hipotensor, antioxidante, antimicrobiano y antiviral entre otros. Precisamente su actividad antiviral ha sido probada contra el citomegalovirus, coronavirus, adenovirus, rabdovirus (A, B, C) y retrovirus como el VIH;2 se plantea que inhibe la replicación viral y que la administración de bajas dosis previene las infecciones por estos. Con estos precedentes se decidió evaluar su efecto antirretroviral contra el virus de la hepatitis B con el objetivo de demostrar que las tinturas de Hypericum disminuyen la antigenicidad del virus de la hepatitis B (HBs Ag) in vitro.
Se trabajó con 2 tinturas de Hypericum (fasciculatum y styphelioides) a las concentraciones de 1, 5, 10, 20 y 30 mg/mL que se enfrentaron a un estándar de antígeno que contiene 83,75 mg/mL de virus salvaje de hepatitis B; esta mezcla constituyó la muestra que se incubó por 24, 48 y 72 h; 7, 14 y 21 días para cuantificar la concentración de antígeno después por un ensayo inmunoenzimático (ELISA) tipo sandwich. Además se evaluó el menstruo en que se diluyó el Hypericum. El análsis estadístico de los resultados se realizó por descriptores y tablas. La antigenicidad se definió como las concentraciones de antígenos por debajo de los valores límites de los ensayos inmunoenzimáticos realizados.
Todas las concentraciones estudiadas de ambos Hypericum tuvieron actividad antiviral, especialmente a partir de las 72 h, donde las concentraciones de antígeno in vitro fueron de cero o menor que 0,2 mg/mL, concentración mínima que detecta el método empleado (sensibilidad) (tablas 1 y 2). Se probó el menstruo de alcohol utilizado para las diluciones aisladamente y se comparó con el control negativo para asegurar que no interfería en el ELISA y se comportó como un control negativo; además, el cálculo del porcentaje al cual quedó después de preparadas las mezclas fue muy bajo (0,32 y 0,71) para el Hypericum fasciculatum y styphelioides respectivamente, por lo que se dedujo que el alcohol no influyó en la disminución de la antigenicidad obtenida en los ensayos.
Tabla 1. Concentración de antígeno. Hypericum fasciculatum
| Mg/mL | ]]> Horas | Días | ||||
| 24 | 48 | 72 | 7 | 14 | 21 | |
| 1 | 10,19 | 1,46 | ]]> 0 | 0 | 0 | 0 |
| 5 | 7,33 | 1,49 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 10 | ]]> 7,89 | 5,36 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 20 | 0,85 | 1,97 | 0 | 0 | ]]> 0 | 0 |
| 30 | 0,75 | 1,76 | 0 | 0 | 0,46 | 0 |
uds=µg/ml
Tabla 2. Concentración de antígeno. Hypericum styphelioides ]]>
| Mg/mL | Horas | Días | ||||
| 24 | 48 | 72 | 7 | 14 | 21 | |
| 1 | 6,91 | ]]> 5,39 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 5 | 3,87 | 4,33 | 0 | 0 | 0 | ]]> 0 |
| 10 | 4,31 | 2,43 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 20 | 1,96 | 0,79 | 0 | ]]> 0 | 0,41 | 0 |
| 30 | 1,13 | 2,02 | 0 | 0 | 0 | 0 |
uds=µg/ml
Recibido: 19 de marzo de 2002. Aprobado: 7 de junio de 2002.
Dra. Edelis Castellanos Puerto. Hospital Militar "Dr. Luis Diaz Soto". Ave. Monumental y Carretera del Asilo. Ciudad de La Habana, CP 11700, Cuba. E-mail:ismm@infomed.sld.cu
1 Especialista de II Grado en Inmunología. Investigadora Agregada.
2 Doctor en Ciencias de la Salud. Investigador Titular.
3 Técnico Medio en Química.