Lic. Addis Bellma Menéndez,1 DraC. Juana Tillán Capó,2 Lic. Rosa A. Menéndez Castillo,3 Ing. Orestes López González,4 Téc. Carmen Carrillo Domínguez.5 Téc. María Lidia González Sanabria5
El aceite de semillas de calabaza ha sido ampliamente utilizado en el tratamiento de la hiperplasia prostática. En el presente trabajo se estudió el efecto del extracto lipofílico de semillas de Cucurbita pepo L (ELMSC) en el modelo in vivo de hiperplasia prostática experimental inducida por propionato de testosterona durante 15 días. Se observó que el ELMSC a las dosis de 400 y 200 mg/ kg provocó una disminución significativa del crecimiento prostático. Nuestros resultados indican que el ELMSC a dosis mayores de 200 mg/ Kg inhibe el crecimiento prostático inducido por la testosterona en el modelo experimental de hiperplasia prostática en ratas.
Palabras clave: Hiperplasia benigna prostática experimental, Cucurbita pepo L.
La hiperplasia benigna de próstata (HBP) es un agrandamiento no canceroso de la glándula prostática que incluye la proliferación de tejido epitelial y fibromuscular , cuya prevalencia aumenta progresivamente con la edad. Sus causas más corrientes son el envejecimiento y la presencia de andrógenos.1,2
El tratamiento de los problemas de próstata con semillas de calabaza ( Cucurbita pepo L.) ha sido una práctica frecuente en Europa, se ha comprobado en diversos trabajos, su beneficio para la glándula debido a sus propiedades biológicas, bioquímicas y fisiológicas. 3
Es conocido que el aceite extraído de semillas de Cucurbita pepo L. es rico en ácidos grasos insaturados, destacándose el linoleico (43-56 %) y el oleico (24-38 %). Además contiene tocoferoles beta y gamma (vitamina E) y carotenoides : luteolina y beta-caroteno. Otros componentes lipídicos son escualeno y esteroides (1%), entre los que destacan delta7-esteroles como alfa- espinasterol , delta7, (27)- estigmastatrien -3beta- ol , delta7- estigmastenol , delta 7,25(27)- estigmastadien -3beta- ol y delta7- avenasterol , beta-D- glucopiranósidos y pequeñas cantidades de delta5- y delta8-esteroles. También triterpenos de núcleo multiflorano esterificados con ácido para- aminobenzoico , proteínas (31-51 %) y aminoácidos poco frecuentes como cucurbitina o 3-amino-3- carboxipirrolidina (0,5-2%). Tiene acciones como antihelmíntico, inhibidor de la 5 alfa-reductasa y antiinflamatorio. 4,5
El presente trabajo tiene como objetivo, e valuar el extracto lipofílico de semillas de Cucurbita pepo L. (ELMSC) en el modelo experimental de hiperplasia prostática en ratas, inducida por andrógenos.
Obtención del extracto lipofílico de Cucurbita pepo L .
Las semillas de Cucurbita pepo L. fueron secadas y molidas para posteriormente realizar la extracción con etanol al 96 %. Luego se reflujó durante 1 h . El extracto obtenido fue filtrado y el residuo vegetal fue lavado con etanol y ambos extractos fueron concentrados hasta la eliminación del etanol. Posteriormente se realizó una extracción con hexano , se filtró con sulfato de sodio anhidro y se lavó nuevamente con hexano para finalmente concentrar hasta obtener como producto final un líquido denso 5a .
Animales
Se utilizaron 35 ratas Wistar machos con peso corporal entre 275 y 300 g , procedente de la colonia de la UCTB Control Biológico perteneciente al Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos (CIDEM). Las mismas se mantuvieron durante todo el ensayo en sala con temperatura de 23 ± 2 ºC , cama con viruta con cambio cada 48 horas, humedad relativa de 65 % y fotoperiodicidad de 12/12 h. La alimentación consistió en dieta peletizada CMO 1000, suministrada por el Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB) y agua a voluntad. Todos los procedimientos fueron ejecutados de acuerdo a las normas éticas dictadas por la Unión Europea para la experimentación animal.
A los animales se les realizó la orquiectomía 7 días antes de iniciar el ensayo y fueron pesados y distribuidos al azar de acuerdo al siguiente esquema de tratamiento: grupo control tratado con aceite vegetal, grupos tratados con extracto lipofilico de semillas de Cucurbita pepo L. a las dosis de 100, 200 y 400 mg/ kg por vía oral conjuntamente con la administración subcutánea de 2 mg/ kg de testosterona propionato y grupo control con testosterona propionato a la dosis de 2 mg/ kg vía subcutánea.
]]> Los animales fueron tratados diariamente durante un período de 15 días al cabo del cual fueron pesados. Posteriormente se realizó la eutanasia por dosis letal de pentobarbital sódico 40mg/ Kg y se procedió a la extracción de las próstata, vesícula seminal y músculo elevador. Estos órganos fueron pesados en balanza analítica Sartorius con sensibilidad de ± 0,0001g.Se calculó la media ± desviación estándar de los pesos relativos de cada órgano para cada grupo. Los datos se procesaron mediante un análisis de varianza de clasificación simple (ANOVA), cuyas medias ajustadas fueron comparadas mediante el Test de Rangos Múltiples de Duncan , considerándose diferencias significativas para p<0.05. 6
El ELMSC a las dosis de 400 y 200 mg/ kg tuvo un efecto inhibitorio significativo sobre la acción de la testosterona, al disminuir el crecimiento de la próstata (dorso lateral, ventral y total) de los animales tratados con el extracto en relación al grupo tratado solo con testosterona. Este efecto también se observó a la dosis de 100 mg/ kg pero solamente para la próstata dorso lateral y total. (Figura 1).
Letras desiguales difieren significativamente (p < 0,05).
PDL: próstata dorsolateral, PV: próstata ventral, Pt: próstata total.
Fig. 1. Efecto del extracto lipofílico de semillas de C. pepo L. sobre el incremento
de peso de próstatas inducido por la administración de testosterona.
No se encontró diferencia significativa del efecto del ELMSC sobre la próstata total y ventral entre las dosis de 200 y 400 mg / kg, tampoco de estas con la dosis de 100 mg sobre la próstata dorsal.
Como se muestra en la Figura 2, el peso de la vesícula seminal aumentó en todos los grupos tratados con testosterona con relación a los animales controles, pero en los tratados con el ELMSC, este incremento fue significativamente menor al alcanzado con el grupo de animales tratado solo con testosterona, existiendo diferencias significativas entre la dosis de 400mg/ Kg y el resto de las dosis.
]]> El músculo elevador no mostró diferencias significativas entre los grupos de animales tratados con testosterona y los tratados también con el ELMSC. Todos los grupos difieren del grupo control sin administrar.
Letras desiguales difieren significativamente (p < 0,05).
VS: vesícula seminal, ME: músculo elevador.
Fig. 2. Efecto del extracto lipofílico de semillas de C. pepo L . sobre el incremento de peso de la vesícula seminal y músculo elevador inducido por la administración de testosterona.
Se dice que un compuesto tiene actividad antiandrogénica cuando este es capaz de disminuir el efecto de la hiperplasia prostática, cáncer, y otras enfermedades andrógeno-dependientes. /
Se observó el efecto dosis dependiente del extracto lipofílico de la semilla de Cucurbita pepo L. para cada uno de los valores de la próstata, dado por un menor efecto de la testosterona sobre el peso de la próstata a medida que se incrementan las dosis de extracto administrado. Estos resultados coinciden con los reportado por otros autores con plantas como Serenoa repens L. , Urtica dioica L., Tribulus terrestres L. 2 ,8
El extracto lipofílico de Cucurbita pepo L. interfiere en la conversión de la testosterona en dihidrotestosterona inhibiendo la 5 alfa-reductasa. Es una fuente natural de vitamina A y del llamado complejo vitamínico E, de importancia en el desarrollo del sistema nervioso fetal. Su contenido en coenzima Q es importante en la activación de macrófagos, aportando un efecto inmunoestimulante no específico. La vitamina E ejerce una acción protectora sobre hormonas, enzimas, vitaminas y lípidos de la destrucción oxidativa, habiéndose demostrado su rol en inhibir el desarrollo del adenoma prostático.9. La presencia de todos estos compuestos podrían ser responsables de la actividad antiandrogénica detectada en este extracto para el ensayo realizado.
La hiperplasia benigna prostática suele conllevar a nefropatías obstructivas, descompensaciones de la vejiga, retenciones urinarias agudas, infecciones bacterianas recurrentes del tracto urinario o cálculos en la vejiga.10 El ELMSC disminuyó de forma significativa el tamaño de la vesícula seminal para la mayor dosis de extracto lo que habla a favor de un mejoramiento en el drenaje del liquido prostático, dado por la relajación de la musculatura lisa así como por la disminución de los estados de hipercontractilidad simpatica que ocasionan espasmos de los sistemas de conductos y canales intraglandulares . Además, la disminución del tamaño del músculo elevador pone de manifiesto el efecto anabólico de la testosterona.
La administración del ELMSC nos permitió sustentar científicamente la hipótesis que sugiere el uso tradicional de esta planta en el tratamiento de la hiperplasia benigna prostática.
The oil of pumpkin seeds has been broadly used in the treatment of the prostatic hyperplasia. Presently work was studied the effect of the lipophilic extract of seeds of Cucurbita pepo L (ELMSC) in the pattern in vivo of benign prostatic hyperplasia induced by testosterone propionate during 15 days. It was observed that the ELMSC to the doses of 400 and 200 mg/kg the extract caused a significant decrease of the growth prostatic. Our data indicate that the ELMSC to dose bigger than 200 mg/Kg inhibits the growth prostatic induced by the testosterone in the experimental pattern of prostatic hyperplasia in rats.
Key words: Experimental prostatic benign hyperplasia, Cucurbita pepo L.
1. Shapiro E, Bechich MJ, Hartando V. The relative proportion of stromal and epithelial hyperplasia is related to the development of symptomatic benign prostatic hyperplasia. J Urol . 1992; 147: 1293-7.
2. Mitra SK, Sundaram R, Mohan AR, Gopumadhavan , Venkataranganna MV, Venkatesha U, Seshadri SJ, Anturlikar SD. Protective effect of Prostane in experimental prostatic hyperplasia in rats. Asian J Androl . 1999; 1: 175-9.
3. García CR. La semilla de Cucurbita pepo L. en el tratamiento de la próstata. Nuevos enfoques: El tratamiento de la alopecia. En: Resúmenes II Congreso de Fitoterapia-XXIII Reunión de la AEMN-II Reunión de la SEFIT. 2004.
4. Bombardelli E, Morazzoni P. Cucurbita pepo L. Fitoterapia 1997; 68 (4): 291-301.
5. Younis YM, Ghirmay S, al- Shihry SS. African Cucurbita pepo L. properties of seed and variability in fatty acid composition of seed oil. Phytochemistry . 2000; 54(1) :71-5.
6. Sigarroa , A. Biometría y Diseño Experimental. Ed . Pueblo y Educación. 1985. 787 pp.
7. Cabeza M, Quiroz A, Bratoeff E, Heuze I, Ramirez E, Murillo E. Fungi test for evaluation of new antiandrogenic molecule . Proc West Pharmacol Soc . 2000; 43: 29-30.
8. Van Coppenolle F, Le Bourhis X, Carpentier F, Delaby G, Cousse H, Raynaud JP, Dupouy JP, Prevarskaya N. Pharmacological effects of the lipidosterolic extract of Serenoa repens ( Permixon ) on rat prostate hyperplasia induced by hyperprolactinemia : Comparison with finasteride . Prostate. 2000; 43: 49-58.
9. OPS-OMS. Manual de Fitoterapia. Prevención y tratamiento natural de enfermedades prostáticas. ESSALUD. Lima-Perú, 2000: 374-375.
10. Vaughan ED. Medical Management of Benign Prostatic Hyperplasia. Are Two Drugs Better Than One? The New England Journal of Medicine. 2003; 349(25): 2449-2451.
Recibido: 5 de septiembre de 2006. Aprobado: 15 de septiembre de 2006.
Lic. Addis Bellma Menéndez. a Unidad de Ciencia y Técnica. Control Biológico. (CIDEM). 17 No. 6208 e/ 62 y 64 Playa, Ciudad de La Habana, Cuba. Teléfono. 2095451/2022591 e-mail: cinfa@infomed.sld.cu o cidem@infomed.sld.cu
1Licenciada en Biología. Aspirante a Investigador.
2Doctora en Ciencias Veterinarias. Investigador Auxiliar.
3Licenciada en Bioquímica Farmacéutica. Investigador Auxiliar.
4Ingeniero Químico. Investigador Agregado.
5Técnico en Farmacia.