ARTÍCULO ORIGINAL
Estabilidad de dos tinturas de Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit. (ítamo real)
Stability of two Pedilanthus tithymaloides (L) Poit (ítamo real) tinctures
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Yurisnel Ortiz SánchezI; Tania López GonzálezII; Lourdes Padró RodríguezII; Yunior Velásquez AlmenaresIII
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I Máster en Medicina Natural y Bioenergética en la Atención Primaria. Licenciado en Ciencias Farmacéuticas. Asistente. Filial de Ciencias Médicas Bayamo. Universidad Médica de Granma. Carretera a Santiago de Cuba.
INTRODUCCIÓN: Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit. (ítamo real) se emplea tradicionalmente y en estomatología por la acción antiinflamatoria.
OBJETIVOS: evaluar la estabilidad de 2 tinturas de ítamo real almacenadas en condiciones de refrigeración y temperatura ambiente durante 1 año.
MÉTODOS: se estudió la estabilidad de 2 tinturas de P. tithymaloides elaboradas a partir de hojas secas de la planta con soluciones hidroalcohólicas a 30 y 50 %, que fueron preparadas por el método de maceración. Se realizaron estudios de calidad, microbiológico y determinación de los componentes activos presentes en las tinturas.
RESULTADOS: en todos los lotes los índices de calidad se mantuvieron durante el período y las condiciones que duró el estudio, sin diferencias estadísticas significativas. El conteo microbiano se mantuvo por debajo de los niveles permisibles, con ausencia de microorganismos patógenos durante todo el experimento. Se constató la presencia de metabolitos secundarios como: flavonoides, fenoles y taninos, aminoácidos, coumarinas y quinolonas.
CONCLUSIONES: los resultados demostraron que las tinturas pueden ser conservadas a temperatura ambiente y en refrigeración por 1 año, en frascos de vidrio de color ámbar sin que se afecte su calidad. ]]>
Palabras clave: Pedilanthus tithymaloides, ítamo real, estudio de estabilidad, plantas medicinales.
INTRODUCTION: Pedilanthus tithymaloides (L) Point (ítamo real) is traditionally used in dentistry due to its antiinflammatory effect.
OBJECTIVES: to evaluate the stability of two itamo real tinctures stored under refrigeration conditions and at room temperature for one year.
METHODS: the stability of two P. tithymaolides tinctures made from the plant´s dry leaves, using 30% and 50% hydroalcohol solutions, which were prepared through maceration. Some quality and microbiologic studies were conducted and the active components of tinctures were determined.
RESULTS: the quality indexes were kept in all the batches during the period, without any significant differences. The microbial count was kept below the allowable levels and no pathogenic microorganisms were observed in the course of the experiment. It was confirmed that secondary metabolites like flavonoids, phenols, tannins, aminoacids, coumarins and quinolones were present.
CONCLUSIONS: these results showed that the studied tinctures can be preserved in amber bottles at room temperature and under refrigeration for one year, with no quality deterioration.
Key words: Pedilantus tithymaloides, ítamo real, stability study, herbs.
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INTRODUCCIÓN
El empleo de las plantas medicinales con fines curativos es una práctica clínica que se ha utilizado desde tiempo inmemorial. Durante mucho tiempo los remedios naturales, y sobre todo las plantas medicinales, fueron el principal e incluso el único recurso de que disponían los médicos. Esto hizo que se profundizara en el conocimiento de las especies vegetales que poseen propiedades medicinales y ampliar su experiencia en el empleo de los productos que de ellas se extraen.1
El uso de plantas medicinales y medicamentos herbarios ha tenido un auge marcado y ascendente en el ámbito mundial, a partir de que la Organización Mundial de la Salud llamó a introducir recursos medicinales tradicionales en los sistemas de salud en 1977. Cuba, por ejemplo, ha ido dando pasos en esa dirección, sobre todo desde 1991, cuando se constituyó un programa prioritario de gobierno, en el cual el Ministerio de Salud Pública tiene la responsabilidad de su coordinación y ejecución. El descubrimiento de un alto porcentaje de fármacos de origen vegetal es resultado del estudio científico de plantas bien conocidas y empleadas en la medicina tradicional.2
La especie Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit., conocida popularmente como ítamo real, aprobada por el Ministerio de Salud Pública (MINSAP),3 reportada en la Guía Terapéutica Dispensarial de Fitofármacos y Apifármacos4 y además aparece reportada en diferentes bibliografías con propiedades antisépticas, cicatrizantes, antibacterianas, antiinflamatorias, etc.,5,6 ha sido utilizada por la población cubana en diferentes enfermedades por causa de las distintas acciones farmacológicas atribuidas,7,8 entre las que se destaca la antiinflamatoria, por el amplio uso que tiene en la práctica estomatológica.
P. tithymaloides cuenta con diversos estudios realizados que van desde los etnobotánicos,6-8 farmacognósticos,9-11 químicos inorgánicos,10 fitoquímicos,12,13 hasta preclínicos.13
Como parte de las investigaciones que se desarrollan en el Departamento de Farmacia de la Universidad de Oriente, para validar el uso terapéutico de las plantas medicinales de uso tradicional, se realizó este estudio con el objetivo de evaluar la estabilidad de 2 tinturas de ítamo real almacenadas en condiciones de refrigeración y temperatura ambiente por un período de 1 año. ]]>
MÉTODOS
Recolección y procesamiento del material vegetal
La especie P. tithymaloides, previa identificación taxonómica en el museo Tomás Romay de la ciudad de Santiago de Cuba (Centro Oriental de Ecosistemas y Biodiversidad) por especialistas de la rama, se colectó en el Módulo Municipal de Cultivos de Plantas Medicinales pertenecientes al Ministerio de la Agricultura, en la zona del II Frente Oriental "Frank País García". La recolección se hizo en horas tempranas de la mañana, a la sombra y alejada de la carretera, siempre teniendo en cuenta su estado vegetativo, el cual debe ser adulto. Se emplearon las hojas y los tallos.
Procesamiento del material vegetal
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El material vegetal, que correspondió a hojas de la planta, fue secado con el empleo del método al aire, específicamente el de sol, para evitar posibles fuentes de contaminación,14 y por ser este el establecido para la especie según estudios previos.9,10,13 Esto se hizo durante un período de 15 d, y luego mediante un molino de acero inoxidable, se procedió a la trituración y reducción de tamaño de la droga vegetal. Seguidamente se determinó el porcentaje de humedad residual de la droga seca, a través del método gravimétrico infrarrojo en el Laboratorio Farmacéutico Oriente, con una balanza técnica marca NAGEMA, de procedencia alemana, con lámpara infrarroja.
Preparación y envase de las tinturas
Se procedió a la preparación de 6 lotes de tinturas de la especie a 20 %, mediante el método de maceración, según el procedimiento descrito en NRSP 311,15 que establece el proceso tecnológico para extractos fluidos y tinturas, con la utilización como menstruo o solvente soluciones hidroalcohólicas preparadas a 30 % (3 lotes) y a 50 % (3 lotes).
Una vez elaborada se procede a su envase en frascos de color ámbar con tapas de bakelita, con capacidad de 120 mL previamente esterilizados; que fueron sometidos a un estudio de vida útil durante 1 año almacenados a temperatura ambiente (lugar fresco y seco) y en refrigeración. Se evaluaron los indicadores de calidad establecidos al inicio, 3 meses, 6 meses y al año.
Determinación de los parámetros de calidad de las tinturas
Para conocer la calidad de las tinturas obtenidas, se procedió a determinar algunos de los parámetros de calidad físico, físico-químicos y químicos cualitativos, a través del procedimiento descrito en NRSP 31216 mediante 5 réplicas para cada ensayo: características organolépticas, pH, índice de refracción, densidad relativa y sólidos totales. ]]>
Se incluyó en este análisis de calidad el tamizaje fitoquímico con el objetivo de conocer y corroborar la presencia de metabolitos activos (composición química cualitativa), para lo que se tuvo en cuenta el procedimiento detallado en Guías Metodológicas de Investigación con Plantas Medicinales,3 y la metodología en la literatura.17 Además, se realizó un control microbiológico al comienzo del experimento y después cada 6 meses, que consistió en el conteo total de hongos y bacterias, evaluación cuantitativa de enterobacterias y de Echerichia coli, Salmonella sp., Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus con los medios y métodos descritos en la USP XXII (Determinaciones de límites microbianos de medicamentos no estériles), y por la norma cubana basada en esta farmacopea18 que fue realizado en el Laboratorio de Microbiología del Hospital General Santiago, de la provincia de Santiago de Cuba.El análisis de varianza de una vía (ANOVA) fue aplicado como prueba estadística para determinar posibles diferencias entre los momentos de medición, con un nivel de significación de p< 0,05.
RESULTADOS
Procesamiento del material vegetal
El material vegetal brindado por el Ministerio de la Agricultura cumple con las condiciones óptimas para su uso. Se determinó que el tiempo de secado de la droga cruda fue de 15 d.
Determinación de los parámetros de calidad de las tinturas
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Las características organolépticas de las tinturas obtenidas corresponden a una solución transparente, homogénea, de color ámbar (un poco más acentuado en la tintura con menstruo hidroalcohólico a 50 %), con olor característico alcohólico y sabor amargo picante, caracteres que se mantienen durante el período de tiempo que duró la investigación.Si se analiza el comportamiento del pH mostrado en la tabla 1 se nota que oscila desde 7,806 hasta 7,59 cuando se emplea menstruo a 30 % y de 8,413 a 8,04 cuando se emplea la solución hidroalcohólica a 50 %.
Los valores de densidad relativa obtenidos se reflejan en la tabla 2, los cuales oscilan entre 0,982 a 0,980 g/L y de 0,939 a 0,936 para las tinturas con menstruo hidroalcohólico a 30 y 50 %, respectivamente.
Al analizar el parámetro sólidos totales, en la tabla 3, donde se obtienen valores de 2,971 a 2,973 con el empleo de menstruo hidroalcohólico 30 % y entre 2,376 a 2,373 para la que emplea el solvente a 50 %.
El índice de refracción es otro de los parámetros de calidad analizados, como puede observarse en la tabla 4 los valores oscilan entre 1,363 a 1,359, cuando se emplea el menstruo hidroalcohólico a 30 % y de 1,366 a 1,364 para la tintura con solvente a 50 %; esto indica la presencia de sustancias en el extracto (tintura) al compararlo con el índice de refracción del agua (n= 1,333).
Del análisis microbiológico realizado a los tiempos 0, 6 meses y al año, no existió en ninguno crecimiento de microorganismos.
Los resultados del tamizaje fitoquímico (tabla 5) realizados a las tinturas, revelaron la presencia de metabolitos como los flavonoides, que teniendo en cuenta las coloraciones obtenidas por los ensayos de ácido sulfúrico concentrado y Shinoda, puede suponerse la presencia de flavonas y flavonoles como tipos de estos metabolitos. Resultados positivos fueron obtenidos de igual manera para metabolitos como aminoácidos, coumarinas, fenoles, taninos, quinonas y azúcares reductores; en estas últimas las coloraciones obtenidas para la tintura con menstruo hidroalcohólico 30 % fueron de mayor intensidad que empleando el mismo menstruo a 50 %, lo que puede estar relacionado con las propiedades físicoquímicas. ]]>
Tabla 5. Tamizaje fitoquímico
| Metabolitos | Ensayos | Tinturas | |||||
| Tiempo: cero | Tiempo: 1 año | ||||||
| 30 % | 50 % | ]]> 30 % | 50 % | ||||
| TA | TF | TA | TF | ||||
| Alcaloides | Dragendorff | ++ | ++ | ]]> ++ | ++ | ++ | ++ |
| Mayer | + | + | + | + | + | ]]> + | |
| Wagner | + | + | + | + | + | + | |
| Triterpenos y esteroides | Solkowxki | ]]> - | - | - | - | - | - |
| Lieberman-Burchard | + | + | + | ]]> + | + | + | |
| Rosemhein | - | - | - | - | - | - | |
| ]]> Quinodas | Borntrager | ++ | ++ | ++ | ++ | ++ | ++ |
| Cumarinas | Baljet | ]]> ++ | ++ | ++ | ++ | ++ | ++ |
| Legal | + | + | + | ]]> + | + | + | |
| Saponinas | Espuma | + | + | - | - | - | ]]> - |
| Azúcares reductores | Fehling | + | + | + | + | + | + |
| Benedict | ]]> + | + | + | + | + | + | |
| Fenoles y taninos | Cloruro férrico | + | + | ]]> + | + | + | + |
| Flavonides | Acido sulfúrico concentrado | + | + | + | + | ]]> + | + |
| Shinoda | + | + | + | + | + | + | |
| Rosemheim | ]]> + | + | + | + | + | + | |
| Aminoácidos | Ninhidrina | + | + | ]]> + | + | + | + |
TA= temperatura ambiente, TF= en refrigeración.
El contenido de alcaloides en las tinturas puede considerarse bajo, producto de las coloraciones obtenidas para los ensayos de Dragendorff y Mayer.
Es notorio destacar que durante el período de estudio se mantuvieron los resultados de las diferentes determinaciones cualitativas de metabolitos secundarios sin alteración.
El análisis estadístico de los resultados obtenidos durante el estudio de estabilidad demostró que de forma general no existieron diferencias significativas entre las evaluaciones, es decir, resultaron iguales respectivamente, por lo que se puede afirmar que las tinturas conservaron todas sus características de forma óptima durante un año bajo las condiciones ensayadas. ]]>
DISCUSIÓN
El tiempo de secado de la droga cruda fue de 15 d, lo cual coincide con lo reportado en estudios precedentes.9,10,12,19
Las características organolépticas de las tinturas obtenidas, corresponden a los resultados en estudios precedentes.10,12,13
Es notorio destacar que el sabor amargo picante puede ser producto de la presencia de los principios amargos y astringentes.5,10
El comportamiento del pH es el reflejo de una solución con características ácidas débiles, lo cual es atribuible al hecho de que en la solución existen compuestos que aportan estas características al medio, como los flavonoides, fenoles y taninos, saponinas, esteroides y triterpenos, que está en correspondencia con lo reportado en trabajos precedentes.10,11 ]]>
El mayor valor numérico en las determinaciones para la tintura que presenta un contenido alcohólico a 50 % puede ser por causa de la mayor solubilidad en esta de principios activos con características básicas como los alcaloides, también presentes aunque en bajas concentraciones en las tinturas.Los mayores valores de densidad relativa de la solución hidroalcohólica a 30 %, indica que en la solución existen compuestos que le dan densidad.
Al analizar el parámetro sólidos totales, en la tintura que empleó solución hidroalcohólica 30 %, la cantidad de sólidos (cantidad total) disueltos en el extracto es mayor y puede estar en correspondencia con la mayor concentración de metabolitos polares en la tintura.
Los resultados del análisis microbiológico coinciden con estudios realizados por T. López,13 esto permite inferir que los porcentajes de alcohol de las soluciones hidroalcohólicas (30 y 50 %) empleadas como solventes o menstruos para la preparación de las tinturas resultaron ideales, puesto que no permite el crecimiento de microorganismos en el medio. Los autores del presente trabajo sugieren el empleo de la tintura con menstruo hidroalcohólico 30 %, por ser menor su contenido en alcohol y, por tanto, tendrá menos efecto irritante sobre la mucosa bucal, que es donde se emplea con más frecuencia.
Es notorio destacar que durante el período de estudio se mantuvieron los resultados de las diferentes determinaciones cualitativas de metabolitos secundarios sin alteración, y que su gran variedad es lo que justifica el uso folklórico de la planta. Además, coincide con otros estudios realizados.12,13,20
Los resultados del presente estudio demostraron que las tinturas de P. tithymaloides pueden ser conservadas a temperatura ambiente por 1 año y en refrigeración, en frascos de vidrio de color ámbar de 120 mL, sin que se afecte su calidad.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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Recibido: 13 de enero de 2009.
Aprobado: 14 de marzo de 2009.
M. C. Yurisnel Ortiz. Filial de Ciencias Médicas Bayamo. Universidad Médica de Granma. Carretera Santiago de Cuba. Km 8½. Correo electrónico: yurisnel.grm@infomed.sld.cu ]]>