Actividad diurética del extracto metanólico de hojas de maracuyá (Passiflora edulis Sims) en ratas
Diuretic activity of the methanol extract from maracuyá leaves (Passiflora edulis Sims) in rats
Juan Rojas ArmasI; Jorge Arroyo AcevedoII; María Antonia Alfonso ValienteIII ]]>
I Doctor en Farmacia y Bioquímica. Profesor Asociado. Cátedra de Farmacología. Instituto de Investigaciones Clínicas. Facultad de Medicina Humana. Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Lima, Perú.
INTRODUCCIÓN: Passiflora edulis Sims (maracuyá) se usa ampliamente en la medicina tradicional de muchos países del mundo para el tratamiento de diversas enfermedades, de la cual se ha demostrado científicamente su efecto antitumoral, antiinflamatorio y antihipertensivo; sin embargo, no existen estudios preclínicos que demuestren el efecto diurético y validen su uso.
OBJETIVO: determinar la actividad diurética del extracto metanólico de hojas de P. edulis en ratas.
MÉTODOS: se utilizaron 20 ratas Holtzman que se designaron a 4 grupos (n= 5). Previo ayuno de 18 h, todas las ratas fueron hidratadas con 5 mL/100 g de solución salina fisiológica. El grupo 1 recibió 5 mL/kg de solución salina fisiológica (control negativo); el grupo 2 recibió furosemida en dosis de 10 mg/kg intraperitoneal (control positivo); los grupos 3 y 4 recibieron extracto metanólico de hojas de P. edulis en dosis de 200 y 400 mg/kg intraperitoneal, respectivamente.
RESULTADOS: a las 24 h, los volúmenes acumulados de orina en los grupos que recibieron tratamiento con el extracto metanólico de hojas de P. edulis resultaron significativamente diferentes del grupo control, pero no significativamente diferentes del grupo furosemida. ]]>
CONCLUSIONES: se demostró la actividad diurética del extracto metanólico de hojas de maracuyá.
Palabras clave: Passiflora edulis, maracuyá, diurético.
INTRODUCTION: Passiflora edulis Sims (maracuyá) is widely used in traditional medicine in many countries worldwide for treatment of diverse diseases due to its scientifically demonstrated antitumor, anti-inflammatory and antihypertensive effect; however, there are not preclinical studies on methanol extract diuretic activity from P. edulis leaves in rats.
OBJECTIVES: to determine the diuretic activity of above mentioned extract in rats.
METHODS: twenty Holtzman rats were used in this study divided into four groups (n= 5). Previous fasting of 18 hours, all rats were hydrated using 5 mL/100 g of saline solution. Group 1 received 5 mL/kg of this solution (negative control); group 2 received intraperitoneal Furosemide in dose of 10 mg/kg (positive control); the groups 3 and 4 received intraperitoneal methanol extract from P. edulis leaves in dose of 200 and 400 mg/kg, respectively.
RESULTS: at 24 hours, urine collectable volumes in groups treated with methanol extract from P. edulis leaves were significantly different from that of control group, but not from that in Furosemide group.
CONCLUSIONS: diuretic activity of methanol extract from maracuyá leaves was demonstrated.
Key words: Passiflora edulis, maracuyá, diuretics.
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INTRODUCCIÓN
Passiflora edulis Sims es una planta originaria de la amazonía brasileña, conocida con el nombre común de maracuyá, parchita, calala, maracujá, yellow passion-fruit.1 El uso de P. edulis como una medicina fue reportado por primera vez por un investigador español en el Perú en 1569.2
La información etnofarmacológica revela que P. edulis se ha utilizado en medicina tradicional en diversas partes del mundo. En Portugal, el fruto es considerado estimulante digestivo y es usado como remedio para el carcinoma gástrico; en India, las hojas frescas de esta planta son hervidas en pequeña cantidad de agua y el extracto es bebido para el tratamiento de disentería e hipertensión, y los frutos son comidos para el alivio de la constipación;3 en Suramérica, se bebe la infusión de hojas y flores como sedante, la infusión de las partes aéreas se utiliza en el tratamiento de tétanos, epilepsia, insomnio e hipertensión4, además se indica como relajante muscular,5 diurético, para tratar dolores estomacales, tumores intestinales y fiebre.6
En un estudio previo realizado por el equipo de investigación del presente trabajo, se demostró que el extracto etanólico de hojas de P. edulis tuvo efecto antihipertensivo en ratas,7 pero no se determinó el mecanismo de acción; en este sentido, un incremento en la diuresis podría explicar en parte este efecto, por lo que se emprendió la presente investigación con el objetivo de determinar la actividad diurética del extracto metanólico de hojas de P. edulis en ratas.
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MÉTODOS
El trabajo se realizó en el Laboratorio de Farmacología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos (UNMSM). Las hojas de maracuyá fueron recolectadas en el Distrito de Moche, provincia de Trujillo, Departamento de la Libertad, Perú. Una parte de la planta con hojas y flor fue llevada al Museo de Historia Natural de la UNMSM para la identificación taxonómica (237-USM-2008).
Las hojas fueron desecadas a 38 ºC en un horno con circulación de aire, el material seco y pulverizado de hojas fue macerado con metanol durante 72 h a temperatura ambiente según la técnica del CYTED (Ciencia y Tecnología para el Desarrollo).8 Se filtró a través de filtro rápido (poros de 4,7 a 4,6 micras) y el filtrado se concentró a sequedad en un evaporador rotatorio (Büchi Rotavapor®). El residuo fue disuelto en agua y liofilizado a - 45 ºC durante 24 h. El liofilizado fue conservado en un frasco color ámbar a 4 ºC hasta su uso.
Se utilizaron 20 ratas Holtzmann machos con 250 ± 20 g de peso corporal, adquiridas del Instituto Nacional de Salud. Después de una semana de climatización en el laboratorio, con alimento y agua ad libitum, los animales fueron asignados aleatoriamente a 4 grupos (n= 5), según el método de Martínez y otros.9 Previo ayuno de 18 h (agua y comida), todas las ratas fueron hidratadas con 5 mL/100 g de solución fisiológica (SSF) y se trataron según el diseño siguiente:
1. Control: SSF 5 mL/kg.
2. Furosemida: furosemida 10 mg/kg intraperitoneal.
3. EM200: extracto metanólico de hojas de maracuyá 200 mg/kg intraperitoneal.
4. EM400: extracto metanólico de hojas de maracuyá 400 mg/kg intraperitoneal. ]]>
Luego de cada administración, las ratas fueron colocadas en jaulas metabólicas individuales y se controló la diuresis a las 2,5; 5 y 24 h. El volumen de orina fue expresado en mL/100 g de peso corporal y el volumen minuto de orina (VMO) en mL/min/100 g.
Los datos fueron expresados como media aritmética ± error estándar. Para el análisis estadístico se empleó el análisis de varianza de una vía, luego se realizó un análisis mediante la prueba Scheffé. El nivel de significación fijado fue p< 0,05. Se usó el programa estadístico SPSS para Windows 15.
Para este ensayo preclínico se tuvieron en cuenta las normas y los procedimientos éticos para el control de animales de laboratorio establecidos internacionalmente.10
RESULTADOS
Al comparar los valores medios de los volúmenes de orina/100 g de peso corporal por grupo, obtenidos después de la administración de las sustancias evaluadas, a las 2,5 h se observaron volúmenes semejantes para la SSF (0,74 ± 0,15 mL/100 g) y las muestras de P. edulis (0,76 ± 0,20 y 0,77 ± 0,23 mL/100 g para EM200 y EM400, respectivamente). Sin embargo, la furosemida mostró un volumen de 6,70 ± 0,52 mL/100 g, el cual fue significativamente mayor que el de SSF (p< 0,001); el volumen acumulado a las 5 h se incrementó en todos los grupos, pero con furosemida el incremento fue muy leve; a las 24 h, el volumen acumulado para EM200 fue 7,93 ± 0,27 mL/100 g y para EM400 de 8,27 ± 0,41 mL/100 g, los cuales resultaron de manera significativa diferentes del grupo SSF (6,39 ± 0,19) con p< 0,05 y p< 0,01, respectivamente, pero no diferentes de modo significativo del grupo furosemida (8,53 ± 0,17 mL/100 g). Estos resultados se muestran la tabla.
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En la figura 1 se muestra el comportamiento diurético de las sustancias evaluadas, en cada período de tiempo que se realizaron las mediciones del volumen. El volumen minuto de orina (VMO) fue máximo para furosemida en las primeras 2,5 h en que alcanzó el valor de 0,0447 ± 0,035 mL/min/100 g, mientras que SSF, EM200 y EM400 alcanzaron volúmenes de 0,0049 ± 0,001; 0,0051 ± 0,0013 y 0,0051 ± 0,0051 mL/min/100 g, respectivamente. En las siguientes 2,5 h (medición a las 5 h), el VMO se incrementó para SSF, EM200 y EM400, mientras que para furosemida disminuyó de manera brusca; en las últimas 19 h (medición a las 24 h), el VMO disminuyó en todos los grupos, pero más pronunciado en el caso de furosemida.
El VMO acumulado en 24 h se muestra en la figura 2. Los grupos EM200 y EM400 alcanzaron 0,0055 ± 0,0002 y 0,0058 ± 0,0003 mL/min/100 g, respectivamente, lo cual es diferente de modo significativo de 0,0044 ± 0,0001 mL/min/100 g del grupo SSF (p < 0,05 y p < 0,01, respectivamente). Estos valores no difieren de manera significativa de 0,0059 mL/min/100 g del grupo furosemida.
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DISCUSIÓN
Los volúmenes de excreción urinaria en 24 h por efecto del tratamiento con el extracto metanólico de hojas de maracuyá fueron similares al de la furosemida. Esto indicaría que P. edulis en las dosis ensayadas tiene eficacia diurética similar a furosemida. Este resultado coincide con los valores obtenidos al evaluar la actividad diurética del extracto hidroalcohólico de raíces de hinojo (Foeniculum vulgare),11 y de los extractos acuosos de cadillo (Bidens alba) y semillas de papaya (Carica papaya).12 El perfil diurético de P. edulis fue diferente, dado que el volumen minuto de orina (VMO) para furosemida resultó máximo en las primeras 2,5 h, mientras que el VMO para Passiflora edulis se incrementó entre las 5 y 24 h; lo cual evidencia un efecto de inicio lento pero más prolongado, en comparación con el rápido efecto de la furosemida.
La actividad diurética observada con P. edulis podría deberse a los flavonoides que contiene,13 porque los flavonoides de Spergularia purpurea14 y el flavonoide crisina15 demostraron poseer este efecto. Se ha informado que isoflavonoides como genisteína y daidzeína producen inhibición del cotransporte de Na+-K+-2Cl-, y aumentan la natriuresis y kaluresis;16 con el flavonoide crisina también se observó aumento significativo del flujo de orina, filtración glomerular y excreción de Na+ y K+.17 Recién se ha reportado que 7 metoxiflavonoides se ligaron de modo activo al receptor de adenosina A1, produjeron antagonismo y consecuentemente diuresis y excreción de sodio.18 ]]>
El efecto diurético del extracto metanólico de hojas de P. edulis queda demostrado en el presente estudio, lo que explicaría en parte la actividad antihipertensiva de esta planta y justificaría su uso en la medicina tradicional.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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7. Rojas J, Ronceros S, Palomino R, Tomás G, Chenguayen J. Efecto antihipertensivo y dosis letal 50 del jugo del fruto y del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas. An Fac Med Lima. 2006;67(3):206-13.
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9. Martínez S, Paz J, Corral A, Martínez C. Actividad diurética y antipirética de un extracto fluido de Rosmarinus officinalis L. en ratas. Rev Cubana Plant Med [serie en Internet]. 2004 Abr [citado 15 Jul 2008]; 9(1): Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1028-47962004000100007&lng=es&nrm=iso
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Recibido: 2 de julio de 2009.
Aprobado: 28 de agosto de 2009.
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Dr. Juan Rojas Armas. Cátedra de Farmacología. Instituto de Investigaciones Clínicas. Facultad de Medicina Humana. Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Lima, Perú. Correo electrónico: jprojasarmas@yahoo.com ]]>