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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[Actualidades de la producción de feruloil esterasa por fermentación en estado sólido]]></article-title>
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<institution><![CDATA[,Universidad de Camagüey Facultad de Química Departamento de Ingeniería Química]]></institution>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[The production of cellulolytic enzymes has taken a significant importance at the present time in the production of new products in the biopolymers industry, biofuels, nutritious and pharmacist. The main inconvenience for the use of the cellulosic biomass constitutes it the complex crystalline structure, resistant to the hydrolysis that form its main compounds, cellulose, besides the absence of a technology of low cost that competes with the current available commercial enzymes in the market. Recently, has been discovered that the enzyme feruloil esterasa belonging to the group of the hydrolases, constitutes the key to be able to break that barrier and to consent to the available resources of the cellular walls of the plants, acting in way xinergístic with others in a the highly efficient enzymatic complex. The obtaining of this enzyme starting from microorganisms for fermentation has been studied by numerous authors to scale that of bank and pilot presenting deficiencies that have not still been completely resolved and that they impede the design of an efficient technology for the production of this enzyme. In this work is carried out a revision with a view to identifying which the weaknesses and limitations of the fermentation process is a breach that allows tracing a strategy with positive results opening up.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[ <p align="right"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>REVISI&Oacute;N    BIBLIOGR&Aacute;FICA</b></font></p>     <p align="right">&nbsp;</p>     <p align="left"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b><font size="4">Actualidades    de la producci&oacute;n de feruloil esterasa por fermentaci&oacute;n en estado    s&oacute;lido</font></b></font></p>     <p align="left">&nbsp;</p>     <p align="left"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b><font size="3">Present    Times of the Production of Feruloil Esterasa for Solid state Fermentation</font></b></font></p>     <p align="left">&nbsp;</p>     <p align="left">&nbsp;</p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>MSc.    Giselle Morell-N&aacute;poles, Dr.C. Mar&iacute;a Caridad Juli&aacute;n-Ricardo,    Dr.C. Luis B. Ramos-S&aacute;ncheze</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Departamento    de Ingenier&iacute;a Qu&iacute;mica, Facultad de Qu&iacute;mica, Universidad    de Camag&uuml;ey, Cuba. <a href="mailto:giselle.morell@reduc.edu.cu">giselle.morell@reduc.edu.cu</a></font></p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify">&nbsp;</p> <hr>     <p align="left"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>RESUMEN</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Las    enzimas celulol&iacute;ticas han tomado en la actualidad una importancia significativa    en la producci&oacute;n de nuevos productos en la industria de biopol&iacute;meros,    biocombustibles, alimenticia y farmac&eacute;utica. El principal inconveniente    para la utilizaci&oacute;n de la biomasa celul&oacute;sica lo constituye la    compleja estructura cristalina, resistente a la hidr&oacute;lisis que forman    sus compuestos principales: celulosa, hemicelulosa y lignina, adem&aacute;s    de la ausencia de una tecnolog&iacute;a de bajo costo que compita con las actuales    enzimas comerciales disponibles en el mercado. Recientemente, se ha descubierto    que la enzima feruloil esterasa perteneciente al grupo de las hidrolasas, constituye    la clave para lograr romper esa barrera y acceder a los recursos disponibles    de las paredes celulares de las plantas, actuando de forma sinerg&iacute;stica    con otras en un complejo enzim&aacute;tico altamente eficiente. La obtenci&oacute;n    de esta enzima a partir de microorganismos ha sido estudiada por numerosos autores    a escala de banco y piloto, presentando deficiencias que aunn no han sido totalmente    resueltas y que impiden el dise&ntilde;o de una tecnolog&iacute;a eficiente    para la producci&oacute;n de esta enzima. El objetivo de este trabajo es realizar    una revisi&oacute;n bibliogr&aacute;fica con vistas a la identificaci&oacute;n    de cu&aacute;les son las limitaciones de la producci&oacute;n de feruloil esterasa    por FES y proponer una alternativa que permita el alcance de resultados positivos.</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>Palabras    clave</b>: biomasa, feruloil esterasa, &aacute;cido fel&uacute;rico, fermentaci&oacute;n    en estado s&oacute;lido.</font></p> <hr>     <p align="left"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>ABSTRACT</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">The    production of cellulolytic enzymes has taken a significant importance at the    present time in the production of new products in the biopolymers industry,    biofuels, nutritious and pharmacist. The main inconvenience for the use of the    cellulosic biomass constitutes it the complex crystalline structure, resistant    to the hydrolysis that form its main compounds, cellulose, besides the absence    of a technology of low cost that competes with the current available commercial    enzymes in the market. Recently, has been discovered that the enzyme feruloil    esterasa belonging to the group of the hydrolases, constitutes the key to be    able to break that barrier and to consent to the available resources of the    cellular walls of the plants, acting in way xinerg&iacute;stic with others in    a the highly efficient enzymatic complex. The obtaining of this enzyme starting    from microorganisms for fermentation has been studied by numerous authors to    scale that of bank and pilot presenting deficiencies that have not still been    completely resolved and that they impede the design of an efficient technology    for the production of this enzyme. In this work is carried out a revision with    a view to identifying which the weaknesses and limitations of the fermentation    process is a breach that allows tracing a strategy with positive results opening    up.</font><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>Keywords</b>:    biomas, feruloil esterase, acid ferulic, solid state fermentation.</font></p> <hr>     <p>&nbsp;</p>     <p>&nbsp;</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="left"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b><font size="3">INTRODUCCI&Oacute;N</font></b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La    biomasa renovable producida por la fotos&iacute;ntesis de las plantas es el    recurso lignocelul&oacute;sico m&aacute;s abundante en la tierra. Est&aacute;    compuesto de tres biopol&iacute;meros principales que forman la pared celular    vegetal: celulosa, hemicelulosa y lignina [1, 2], adem&aacute;s de peque&ntilde;as    cantidades del polisac&aacute;rido pectina, cenizas y prote&iacute;nas. Una    potencial aplicaci&oacute;n de las grandes cantidades de lignocelulosa es en    la obtenci&oacute;n de biopol&iacute;meros, derivados qu&iacute;micos y biocombustibles    [3-7], como una fuente energ&eacute;tica alternativa a los combustibles f&oacute;siles    que actualmente se utilizan, y con vistas al aprovechamiento de residuos agroindustriales.    El principal inconveniente para la utilizaci&oacute;n de la biomasa celul&oacute;sica    lo constituye la compleja estructura supramolecular cristalina y organizada,    resistente a la hidr&oacute;lisis que forman sus compuestos principales [8-11]    y la ausencia de una tecnolog&iacute;a de bajo costo que compita con las actuales    enzimas comerciales disponibles en el mercado, adem&aacute;s estos procesos    requieren tratamientos previos a la biomasa tanto qu&iacute;micos como f&iacute;sicos    que consumen gran cantidad de energ&iacute;a [6] por lo que una estrategia prometedora    consiste en el uso de enzimas de organismos ligninol&iacute;ticos que remodelen    y degraden eficientemente la pared celular, eviten el craqueo de la lignina,    la generaci&oacute;n de productos t&oacute;xicos en los licores de la sacarificaci&oacute;n    e impacten en la menor medida posible el medio ambiente [6, 9].    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">En    la naturaleza hay organismos que pueden degradar los componentes de la lignocelulosa    [12]. Se han identificado hongos y bacterias con propiedades lignocelulol&iacute;ticas,    que producen complejos multienzim&aacute;ticos de celulasas y hemicelulasas    [13-21]. Estos biodegradan los complejos para formar az&uacute;cares monom&eacute;ricos    para lo que requieren de la acci&oacute;n cooperada de varias enzimas hidrol&iacute;ticas    dentro de las que est&aacute;n: las celulasas, las xilanasas y otras accesorias    como la feruloil esterasa (FAE) [22], esta enzima hidroliza los enlaces &eacute;ster    que unen al &aacute;cido fer&uacute;lico, con los az&uacute;cares ramificados    liberando la lignina y los xilanos [15, 16].    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Recientes    estudios han demostrado que esta enzima constituye la llave para lograr la completa    hidr&oacute;lisis de la hemicelulosa y liberar los &aacute;cidos hidroxicin&aacute;micos    correspondientes [23], adem&aacute;s puede catalizar la esterificaci&oacute;n    del glicerol el cual constituye el derivado mayor de la industria del biodiesel    [24].    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El    &aacute;cido fel&uacute;rico producido durante la acci&oacute;n de la FAE tiene    numerosas aplicaciones en la industria farmac&eacute;utica y cosm&eacute;tica    como absorbente de luz ultravioleta en los componentes de los bloqueadores solares,    antioxidantes para la lucha contra el c&aacute;ncer y enfermedades cardiovasculares,    estimula el sistema inmune, protege al cerebro contra la enfermedad del Alzheimer,    disminuye la producci&oacute;n de colesterol, adem&aacute;s se utiliza en la    industria alimenticia en la protecci&oacute;n de alimentos y como precursor    de aromas [22, 25-27].    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La    fermentaci&oacute;n en estado s&oacute;lido (FES) es un proceso muy utilizado    en la producci&oacute;n de enzimas como las celulasas, xilanasas, glycosidasas,    lignasas, proteasas, lipasas, pectinasa, galactosidasas, glutaminasas, amilasas,    innulinasas, fitasas y esterasas [28, 29], pero presenta una serie de inconvenientes    que se resumen en el pretratamiento a la biomasa, el compromiso entre el tama&ntilde;o    de part&iacute;cula y la aireaci&oacute;n del cultivo, la dificultad en el control    de la humedad relativa y la temperatura, el tipo y tama&ntilde;o del in&oacute;culo,    la remoci&oacute;n del calor metab&oacute;lico generado en el proceso, la velocidad    de consumo de ox&iacute;geno, la generaci&oacute;n de di&oacute;xido de carbono,    el modelo de contacto y el tiempo de fermentaci&oacute;n. Todos estos aspectos    han sido estudiados por numerosos autores para estas enzimas comerciales a escala    de laboratorio [6, 23, 30-38].    ]]></body>
<body><![CDATA[<br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">A    pesar de la importancia que tiene el empleo de la enzima FAE en el proceso de    hidr&oacute;lisis completa de materiales lignocelul&oacute;sicos estas deficiencias    no se encuentran bien definidas [27], por lo que se plante&oacute; como objetivo    de este trabajo realizar una revisi&oacute;n bibliogr&aacute;fica con vistas    a la identificaci&oacute;n de cu&aacute;les son las limitaciones de la producci&oacute;n    de feruloil esterasa por FES y proponer una alternativa que permita el alcance    de resultados positivos.</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b><font size="3">DESARROLLO</font></b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>Microorganismos    productores de la enzima FAE</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Existen    muchos reportes en la bibliograf&iacute;a de microorganismos productores de    la enzima FAE [39], pero son escasos para el caso de especies de bacterias y    levaduras, siendo el reino de los hongos filamentosos el m&aacute;s descrito.</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Soccol,    et al. [5] resumieron que los hongos pueden degradar celulosa, hemicelulosa    y lignina en las plantas debido a un complejo enzim&aacute;tico que producen,    que incluyen celulasas, hemicelulasas y ligninasas. Se&ntilde;alaron que los    g&eacute;neros m&aacute;s reportados en la &uacute;ltima d&eacute;cada incluyen    cepas de Trichoderma, Penicillium y Aspergillus.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Bonnin,    et al. [40] reportaron la expresi&oacute;n de enzimas en Aspergillus niger entre    las cuales identificaron un grupo de FAEs, estas enzimas fueron probadas para    liberar el &aacute;cido fer&uacute;lico de la pulpa de la remolacha y el salvado    de ma&iacute;z, tratado previamente con vapor. Los resultados de liberaci&oacute;n    de &aacute;cido fer&uacute;lico se compararon con las actividades enzim&aacute;ticas    medidas en mezclas disponibles comercialmente. Se comprob&oacute; que las enzimas    de Aspergillus niger eran m&aacute;s variadas y ten&iacute;an una actividad    tan eficaz como la que tiene la mezcla comercial. Este estudio muestra un inter&eacute;s    industrial en esta especie de hongos para la producci&oacute;n de la enzima    FAE.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Gottschalk,    et al. [30], estudiaron la producci&oacute;n de enzimas glucosidasa, xilanasas    y FAE, obtenidas de los hongos filamentosos Trichoderma reesei y Aspergillus    awamori en la hidr&oacute;lisis enzim&aacute;tica del bagazo de ca&ntilde;a    pretatado con vapor, Aspergillus awamori result&oacute; ser la cepa m&aacute;s    productora de FAE con una actividad de 3,8 U/g de biomasa.    ]]></body>
<body><![CDATA[<br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Topakas,    et al. [41] analizaron 48 reportes bibliogr&aacute;ficos de los principales    microorganismos productores de la enzima FAE, de ellos 16 corresponden al g&eacute;nero    Aspergillus, aunque existen tambi&eacute;n reportes de levaduras y bacterias,    esto se&ntilde;ala la tendencia al aislamiento de microorganismos f&uacute;ngicos    a partir de fuentes de carbono lignocelul&oacute;sicas.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">P&eacute;rez-Morales    [21] realizaron trece aislamientos con el objetivo de seleccionar cepas de hongos    filamentosos capaces de producir enzimas tipo FAE y pectinadas utilizando medios    selectivos y metodolog&iacute;as por halos de hidr&oacute;lisis. Los an&aacute;lisis    morfol&oacute;gicos confirmaron que la mayor cepa productora result&oacute;    ser del g&eacute;nero Aspergillus evidenciando el potencial que tiene este microorganismo    en la producci&oacute;n de la enzima.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Hinz    et al. [42] 1NHHrealizaron estudios con hongos filamentosos de amplio uso en    la industria del biofuel como Aspergillus sp. y Trichoderma reesei, concluyeron    que ambas especies resultan una alternativa atractiva para la producci&oacute;n    de un n&uacute;mero grande de hemicellulasas, entre las cuales se destaca la    feruloil.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Mandalari    et al. [43] descubrieron la actividad de una FAE y de una xilanasa en el supernadante    de una fermentaci&oacute;n de Humicola grisea, thermoidea y Talaromyces stipitatus    crecidos en un medio que conten&iacute;a como fuente de carbono salvado de cebada    y salvado de trigo, dos derivados agroindustriales. Las actividades m&aacute;ximas    se reportaron en el cultivo de H. grisea con 16,9 U/ml y 9,1 U/ml respectivamente    lo cual demuestra la capacidad de s&iacute;ntesis de este tipo de enzimas por    estos microorganismos.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Szwajgier,    et al. [44] estudiaron una FAE producida por Lactobacillus acidophilus que fue    utilizada con &eacute;xito, la enzima se produjo en biorreactores, se purific&oacute;    y se hizo un preparado monoenzim&aacute;tico capaz de liberar &aacute;cido felurico    y &aacute;cido vanilinico utilizando como sustrato salvado de cebada cervecera.    ]]></body>
<body><![CDATA[<br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>Influencia    de los pretratamientos a la biomasa en la actividad enzim&aacute;tica de la    FAE</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El    papel principal de un pretratamiento es disminuir la interacci&oacute;n entre    los componentes principales de la pared celular, que los haga susceptibles a    la acci&oacute;n de los microorganismos. Las mejores condiciones de un pretratamiento    deben definirse en base a la mayor recuperaci&oacute;n de az&uacute;cares solubles    y evitar la formaci&oacute;n de compuestos inhibitorios a la hidrolisis subsecuente    y procesos de fermentaci&oacute;n. Muchos m&eacute;todos se han usado para los    pretratamientos de materiales lignocelul&oacute;sicos. Balat [35], realiz&oacute;    una comparaci&oacute;n bien detallada de los m&eacute;todos de pretratamiento    de la biomasa que incluye: el molinado mec&aacute;nico de la biomasa, la explosi&oacute;n    de vapor, la explosi&oacute;n de CO2 , la ozeonolisis, la hidrolisis alcalina,    los solventes org&aacute;nicos, la pirolisis, pulsasiones de un campo el&eacute;ctrico    y el biol&oacute;gico. Se&ntilde;al&oacute; las ventajas y las desventajas de    cada uno de ellos en cuanto a costo y rendimiento y concluy&oacute; que el tratamiento    con explosi&oacute;n de vapor es el m&aacute;s utilizado aunque esto no quiere    decir que es el que mejor resultados muestra.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Xiros,    et al. [45] realizaron un pretratamiento a la biomasa inicial (salvado de cebada    cervecera) con dos tipos de proteasas (alcalasa y papa&iacute;na), luego realiz&oacute;    la hidr&oacute;lisis enzim&aacute;tica con un preparado enzim&aacute;tico de    Fosariumoxy sporum compuesto por xilanasas y FAEs obteniendo un 100 % de rendimiento    expresado en la cantidad de &aacute;cido fer&uacute;lico liberado, en comparaci&oacute;n    con el material sin pretratar. Este estudio revela el importante papel que juegan    las proteasas para una degradaci&oacute;n eficaz de los arabinoxilanos del BSG    y para la liberaci&oacute;n del &aacute;cido fer&uacute;lico mejorado por las    enzimas hemicelulol&iacute;ticas de F. oxysporum.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Balat    [35] prob&oacute; varios pretratamientos antes de la sacarificaci&oacute;n del    grano de cebada e hidrolizados de paja para la producci&oacute;n de bioetanol    por v&iacute;a enzim&aacute;tica. El microorganismo utilizado fue una bacteria    recombinante. Los pretratamientos estudiados consistieron en la hidrataci&oacute;n    de la biomasa con agua caliente seguida de una explosi&oacute;n de vapor, diluciones    con &aacute;cidos, &aacute;lcalis y per&oacute;xidos alcalinos en una proporci&oacute;n    de 10 % de carga de s&oacute;lidos, 0,75 % (w/v) del &aacute;cido, y una temperatura    moderada de 121 0C. Los resultados demostraron un 88 a 91 % de rendimiento de    los az&uacute;cares, y el tratamiento enzim&aacute;tico posterior, 0,48 g ethanol/g    de los az&uacute;cares disponibles. Los resultados descritos son de gran importancia    para las tecnolog&iacute;as de bioprocesos en v&iacute;as de desarrollo de conversi&oacute;n    de lignocelul&oacute;sicos en etanol y otros productos de la fermentaci&oacute;n.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Girio,    et al. [34] refirieron que el mejor tratamiento para la producci&oacute;n de    etanol por FES de lignocelul&oacute;sicos por v&iacute;a enzim&aacute;tica es    la explosi&oacute;n de vapor, aunque se&ntilde;alaron que queda un camino abierto    al estudio del uso de l&iacute;quidos i&oacute;nicos en los pretratamientos    y que se requiere de una b&uacute;squeda de nuevos microorganismos en la inmensa    biodiversidad que aprovechen m&aacute;s extensamente las condiciones de temperatura,    pH del medio, sean resistentes a la toxicidad y adaptables a cualquier sustrato.    <br>   </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Por    su parte Talebnia, et al. [36] plantearon que los pretratamientos a la biomasa    juegan un papel importante en la hidr&oacute;lisis de materiales lignocelul&oacute;sicos,    y que ning&uacute;n m&eacute;todo conocido por s&iacute; solo ha sido capaz    de reunir todos los requisitos que se requieren, sin embargo, concluyeron que    una alternativa prometedora ser&iacute;a tratar de combinar y adaptar algunos    de ellos a las condiciones correspondientes teniendo en cuenta todos los factores    incluso el equilibrio de energ&iacute;a, carga del s&oacute;lido y uso m&iacute;nimo    de qu&iacute;micos.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>Actividad    enzim&aacute;tica de la FAE</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La    enzima FAE fue aislada por primera vez por Faulds y Williamson [27] en el a&ntilde;o    1991, se clasific&oacute; en base a su especificidad en la s&iacute;ntesis de    metil esteres de &aacute;cidos hidroxixin&aacute;micos en cuatro grupos: A,B,    C y D, por lo que su actividad var&iacute;a en funci&oacute;n del sustrato inductor.    La elecci&oacute;n del sustrato es de gran importancia para la producci&oacute;n    de FAE, ya que no solo sirve como fuente de carbono y energ&iacute;a, sino tambi&eacute;n    se ha visto que proveen los compuestos de inducci&oacute;n necesarios para los    microorganismos. Se han utilizado fuentes de carbono complejas como el salvado    de ma&iacute;z, salvado de trigo, pulpa de remolacha azucarera, etc., que contienen    altas concentraciones de &aacute;cido fer&uacute;lico y han sido eficientes    para la producci&oacute;n de FAE. Sin embargo, hasta ahora los estudios de inducci&oacute;n    han sido escasos y no hay evidencia clara de que exista una correlaci&oacute;n    directa entre las especies de microorganismos y los patrones de inducci&oacute;n    de la FAE [41].    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Mathew,    et al. [46] estudiaron varias cepas del hongo filamentoso Aspergillus productoras    de la enzima FAE y su relaci&oacute;n con varios sustratos: bagazo de ca&ntilde;a,    salvado de arroz, ma&iacute;z y trigo, comprobaron que el comportamiento de    la actividad enzim&aacute;tica de la misma cepa ante diferentes sustratos no    es la misma y que estas se ven inducidas por los componentes de la pared celular    de la planta. El &aacute;cido fer&uacute;lico constituye aproximadamente el    0,5 % en el salvado del trigo, 0,9 % en el arroz y 3,1 % en el ma&iacute;z,    siendo este &uacute;ltimo el que mejores resultados de expresi&oacute;n enzim&aacute;tica    arroj&oacute;.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Por    otra parte, Faulds, et al. [47] evaluaron el efecto de diferentes fuentes de    carbono tipo cereal (xilano de avena, xilano de avena-&aacute;cido fer&uacute;lico,    trigo sin salvado y salvado de trigo) y tipo pulpa (pulpa de remolacha azucarera,    pulpa de caf&eacute;) sobre la producci&oacute;n de feruoil, cafeoil y p-cumaroilesterasas    por Aspergillus awamori. En el caso de la producci&oacute;n de FAE la mejor    fuente de inductores fue la combinaci&oacute;n xilano de avena (1,5 % p/v) y    &aacute;cido fer&uacute;lico (0,03 % p/v).    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Fauld,    et al. [48] y Mancera, et al. [49] estudiaron la influencia de &aacute;cidos    fen&oacute;licos (caf&eacute;ico y p-cum&aacute;rico) libres en la fibra lingnocelulol&iacute;tica    y encontraron que pueden producir Inhibici&oacute;n a la actividad enzim&aacute;tica    de la FAE, por lo que sugirieron que sean eliminados antes de realizar la fermentaci&oacute;n.    ]]></body>
<body><![CDATA[<br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Garc&iacute;a,    et al. [50] estudiaron la relaci&oacute;n entre una xilanasa y una enzima del    tipo FAE provenientes de Streptomyces avermitilis y comprobaron que la actividad    en la degradaci&oacute;n de muestras de materiales lignocelul&oacute;sicos que    conten&iacute;an xilano de avena y salvado de trigo, aumentaron considerablemente    con la adici&oacute;n de altas concentraciones de xilanasa y FAEs juntas en    presencia de glicerol y manitol. Este estudio demuestra que la actividad de    la enzima FAE pudiera elevarse en presencia de grandes cantidades de xilanasa.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Yu    [51] y Topakas, et al. [52] estudiaron la interacci&oacute;n de una xilanasa    de Trichoderma, una FAE de Aspergillus y una celulasa comercial. El preparado    redujo la concentraci&oacute;n de az&uacute;cares a un 69 %, valor mucho mayor    que el obtenido cuando se usan preparados monoenzim&aacute;ticos de xilanasas    y celulasas que revelaron solo un 33 % y un 39 % de liberaci&oacute;n de az&uacute;cares    respectivamente. Estos resultados indican que la interacci&oacute;n sinerg&iacute;stica    de las enzimas logra aumentar significativamente la hidr&oacute;lisis enzim&aacute;tica    a partir de c&aacute;scara de avena como fuente de carbono.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Xiros,    et al. [45] realizaron reacciones de hidr&oacute;lisis de salvado de trigo con    varios preparados enzim&aacute;ticos que conten&iacute;an FAE y xilanasas. Comprobaron    que a varias concentraciones la FAE y la xilanasa por si solas no eran capas    de liberar &aacute;cido fel&uacute;rico, la concentraci&oacute;n de &aacute;cido    fel&uacute;rico m&aacute;s alta (32 mg L-1) se logr&oacute; en la presencia    de la mezcla de enzimas despu&eacute;s de las 48 h de incubaci&oacute;n.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Existen    reportes bibliogr&aacute;ficos que demuestran que algunos factores pudieran    disminuir o aumentar la actividad enzim&aacute;tica de la FAE. Faulds, et al.    [47] demostraron que la enzima FAE tipo C, muestra una alta especificidad para    el ferulato soluble y los arabinoxilanos, adem&aacute;s estas enzimas han reforzado    su actividad con once familias de xilanasas que muestran actividad preferencial    por diferulatos. Este resultado pudiera estar relacionado con los tipos de enlaces    &eacute;ster con los arabinoxilanos, y contituye un aporte en el mejoramiento    de la industria panadera.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Selig,    (2008), estudi&oacute; la hidr&oacute;lisis de 20 g de bagazo de ca&ntilde;a    pretratado con vapor con mezclas de enzimas producidas por los hongos Tricoderma    reesei y Aspergillus awamori con resultados positivos, la degradaci&oacute;n    enzim&aacute;tica constituy&oacute; el 81 % de hidr&oacute;lisis de la celulosa    y el 91 % de hidr&oacute;lisis del xilano con las mezclas enzim&aacute;ticas.    ]]></body>
<body><![CDATA[<br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Mukherjee    [22] estableci&oacute; que no existe relaci&oacute;n entre la actividad enzim&aacute;tica    de la FAE y el &aacute;cido fer&uacute;lico esterificado y concluy&oacute; que    los niveles de &aacute;cido fer&uacute;lico libre son los que inducen la actividad    de la enzima bajo determinadas condiciones y no el &aacute;cido fer&uacute;lico    esterificado.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El    uso de los co-solventes org&aacute;nicos en la degradaci&oacute;n del material    lignocelul&oacute;sico insoluble en agua como la lignina, facilita la actividad    enzim&aacute;tica en el sustrato. Faulds, et al. [47] evaluaron el uso del m&aacute;s    adecuado co-solvente org&aacute;nico para la enzima FAE expresada en Aspergillus    niger y Talaromices epitatus, demostrando que concentraciones menores que el    15 % de dimetilsulfoxide (DMSO) aumenta la hidr&oacute;lisis enzim&aacute;tica,    mientras que concentraciones mayores que el 20 %, reduce la actividad. Demostr&oacute;    que generalmente los alcoholes (metanol, etanol y propanol) reducen la eficiencia    hidrol&iacute;tica de las FAEs lo que tiene implicaciones directas en la inhibici&oacute;n    y bajos rendimientos en la sacarificaci&oacute;n y fermentaci&oacute;n simult&aacute;neas    para la producci&oacute;n de bioalcoholes.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>La    FAE y su relaci&oacute;n en la esterificaci&oacute;n y transesterificaci&oacute;n    de &aacute;cidos hidroxicin&aacute;micos y el glicerol</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Recientes    estudios han demostrado que la enzima FAE participa en reacciones de esterificaci&oacute;n    y transesterificaci&oacute;n de &aacute;cidos hidroxicin&aacute;micos y el glicerol    lo que abre un nuevo campo a la investigaci&oacute;n en aras de obtener nuevos    productos de alto valor agregado.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Tsuchiyama,    et al. [27] estudiaron la s&iacute;ntesis de varios esteres del &aacute;cido    fer&uacute;lico a partir de la reacci&oacute;n de esterificaci&oacute;n y trasesterificaci&oacute;n    de &aacute;cidos hidroxicin&aacute;micos e hidrobenzoicos y varios az&uacute;cares    tales como: arabinosa, fructuosa, galactosa, glucosa, ramanosa, xilosa, maltosa,    sucrosa y tetralosa con glicerol. Utiliz&oacute; preparados de celulasas y peptinasa    que tienen como contaminante algunas FAEs ya que la enzima FAE no se encuentra    disponible en el mercado. Los rendimientos de los esteres del &aacute;cido fer&uacute;lico    en el caso de los az&uacute;cares resultaron ser m&aacute;s bajos en comparaci&oacute;n    con el glicerol. Este estudio contribuye a la b&uacute;squeda de compuestos    de derivados del &aacute;cido fer&uacute;lico como el glicerilferulato, m&aacute;s    solubles en agua y que pudieran emplearse con mayor eficacia en la industria    cosm&eacute;tica, alimenticia y farmac&eacute;utica.    <br>   </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Vafiadi,    et al. [24] estudiaron la esterificaci&oacute;n enzim&aacute;tica del glicerol,    el mayor subproducto de la industria del biodiesel, con &aacute;cido sin&aacute;pico,    catalizada por una enzima del tipo FAE. Constituye el primer reporte de este    tipo de actividad enzim&aacute;tica en l&iacute;quidos i&oacute;nicos y la base    para la explotaci&oacute;n extensa de FAEs en la modificaci&oacute;n de compuestos    insolubles, producci&oacute;n de antioxidantes y reacciones convencionales.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>Aumento    de la expresi&oacute;n de la FAE a partir de la recombinaci&oacute;n gen&eacute;tica    en microorganismos y su inmovilizaci&oacute;n en soportes enzim&aacute;ticos</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La    enzima FAE se produce en niveles muy bajos en organismos nativos lo que hace    prohibitivamente caro su producci&oacute;n industrial. Numerosos autores plantean    que pueden lograrse niveles altos de expresi&oacute;n de las enzimas requeridas    en la recombinaci&oacute;n de los sistemas de expresi&oacute;n microbianos conocidos    como Yarrowia lipolytica y Pichia pastoris.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La    expresi&oacute;n heter&oacute;loga en otros organismos celulares ha sido empleada    con &eacute;xito en el caso de una xilanasa,Thermomyces lanuginosus expresado    en la levadura metilotr&oacute;fica Pichia pastoris [5]. Esta levadura presenta    varias ventajas encima de otros microorganismos ya que se han conformado sistemas    para la hyper-expresi&oacute;n de enzimas y trabajos para desarrollar los vectores    mejorados adem&aacute;s se plantea que una fuente prometedora pudiera estar    en el descubrimiento de nuevas enzimas como la FAE y clonarlas en el genoma    de microorganismos cultivables.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Huang,    et al. [53] realizaron la clonaci&oacute;n de un gen de Thermobifida fusca en    la levadura Yarrowia lipolytica y logr&oacute; expresar la enzima FAE en el    orden de los 70,94 U/ml valor aproximadamente 140 veces mayor que lo observado    en la expresi&oacute;n del sistema de Pichia pastoris. Este estudio demostr&oacute;    la eficacia de la manipulaci&oacute;n gen&eacute;tica en microorganismos que    no producen nativamente la enzima d&aacute;ndose respuesta a la problem&aacute;tica    de la baja expresi&oacute;n de la enzima en los organismos nativos.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Otro    aspecto de gran inter&eacute;s en elevar la actividad enzim&aacute;tica recae    en los estudios de inmovilizaci&oacute;n enzim&aacute;tica para la enzima FAE.    Los reportes bibliogr&aacute;ficos en este sentido son muy escasos, entre los    m&aacute;s importantes se encuentra el realizado por Th&ouml;rn, et al. [54]    en el cual inmovilizaron una enzima comercial del tipo FAE (Depol 740L) utilizada    para el refinamiento de &aacute;cidos hidroxicin&aacute;micos, un grupo de compuestos    con propiedades antioxidantes y antimicrobianas donde la modificaci&oacute;n    de sus propiedades de solubilidad son necesarias por su uso ser de gran inter&eacute;s    en diversos productos comerciales; en un material mesoporoso de s&iacute;lice.    En el estudio se demostr&oacute; que los mayores resultados de actividad se    efectuaron en tama&ntilde;os de poros de 9 nm comparados con tama&ntilde;os    de 5 nm. La inmovilizaci&oacute;n de la enzima en s&iacute;lice mesoporosa mostr&oacute;    una estabilidad operacional excelente y cambi&oacute; la especificidad de las    enzimas para favorecer la transesterificaci&oacute;n y liberaci&oacute;n del    butilferulato de un 70 % a un 90 % comparada con las enzimas libres.    ]]></body>
<body><![CDATA[<br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>Tipo    de fermentaci&oacute;n utilizada para la producci&oacute;n de la FAE</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Aunque    no existe una tecnolog&iacute;a de fermentaci&oacute;n establecida para la producci&oacute;n    a escala industrial de la enzima FAE muchos han sido los estudios que en este    sentido buscan mejorar las condiciones de fermentaci&oacute;n y lograr altos    valores de expresi&oacute;n y actividad. Los procesos fermentativos var&iacute;an    desde la fermentaci&oacute;n sumergida hasta la FES, siempre hasta escala de    banco. Asther, et al.[55] compar&oacute; la actividad de una enzima FAE por    fermentaci&oacute;n sumergida y FES, resumi&oacute; que en estado s&oacute;lido    la actividad de la enzima aument&oacute; cicuenta veces por encima de lo obtenido    por fermentaci&oacute;n sumergida, utilizando como microorganismos al hongo    filamentosos Aspergillus niger y derivados agr&iacute;colas como sustrato. Este    trabajo confirma las potencialidades de la FES por encima de la fermentaci&oacute;n    sumergida.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Topakas,    et al.[56] resumieron las ventajas de la producci&oacute;n de la enzima FAE    por FES, discutieron las ventajas, sobre todo para los cultivos f&uacute;ngicos,    los microorganismos crecen en los materiales s&oacute;lidos sin la presencia    de l&iacute;quido libre. El agua est&aacute; presente absorbida en un complejo    que forma la matriz s&oacute;lida del substrato, la productividad por volumen    del reactor es m&aacute;s alta en comparaci&oacute;n con el cultivo sumergido,    asimismo los costes operacionales tambi&eacute;n son m&aacute;s bajos porque    la maquinaria y la planta que se requieren son m&aacute;s simples. Adem&aacute;s    se pueden aprovechar sustratos complejos y residuos provenientes de la industria    agr&iacute;cola y la silvicultura que proporcionen la fuente de carbono induciendo    la producci&oacute;n de FAEs. Resumieron, adem&aacute;s, varios datos de procesos    llevados a cabo en FES utilizando como microorganismos Aspergillus niger, Penicillium,    Sporotrichum thermophilic para la obtenci&oacute;n de la enzima a escala de    banco.    <br>   </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Zeng,    et al. [33] demostraron una variante de FES a partir de estudios realizados    por Chen [57] y Xu [58] que consist&iacute;an en la variaci&oacute;n de la presi&oacute;n    en el reactor, (la presi&oacute;n alta 0,2 MPa por 20 s y la duraci&oacute;n    de presi&oacute;n baja 30 min), este m&eacute;todo mejor&oacute; la producci&oacute;n    de FAE por A. niger comparado con una fermentaci&oacute;n solida tradicional.    El rendimiento de la enzima producida fue de 881 mU/g a las 48 h bajo la condici&oacute;n    perfeccionada influenciada por la temperatura, O2, y concentraci&oacute;n de    CO2, adem&aacute;s de las variaciones de intensidad de respiraci&oacute;n en    el proceso de fermentaci&oacute;n, el m&eacute;todo para FES mejora la transferencia    de masa y calor. Esta variante podr&iacute;a considerarse en siguientes proyectos    de dise&ntilde;o de FES.</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b><font size="3">CONCLUSIONES</font></b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los    hongos filamentosos son los microorganismos mayores productores de la enzima    FAE, se destacan los g&eacute;neros Aspergillus, Penicillum y Trichoderma. Es    importante seleccionar el mejor sustrato inductor para la producci&oacute;n    enzim&aacute;tica, as&iacute; como potenciar la sinergia que existe entre la    enzima FAE y las xilanasas que pudieran ser empleadas en la mejora de los procesos    de degradaci&oacute;n enzim&aacute;tica de materiales lignocelul&oacute;sicos.    Algunos compuestos presentes en el sustrato pudieran mejorar la actividad enzim&aacute;tica    como los co-solventes org&aacute;nicos y el &aacute;cido fer&uacute;lico. Se    evidencia la utilidad que tiene el tratamiento previo de la biomasa. Por otro    lado se referencian los primeros pasos en la clonaci&oacute;n de genes que codifiquen    para la producci&oacute;n de enzimas del tipo feruloil en microorganismos no    productores con vista a elevar su productividad y la potencialidad que muestra    la inmovilizaci&oacute;n de enzimas en soportes. Es importante la participaci&oacute;n    de esta enzima en las reacciones de esterificaci&oacute;n y trasnsesterificaci&oacute;n    de &aacute;cidos hidroxicin&aacute;micos y glicerol en la producci&oacute;n    de derivados altamente costosos y necesarios industrialmente. La FES es la mejor    v&iacute;a para dise&ntilde;ar un proceso fermentativo para la producci&oacute;n    enzimas FAE utilizando materiales lignocelul&oacute;sicos y hongos filamentosos.</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b><font size="3">BIBLIOGRAF&Iacute;A</font></b></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">1.    SANNIGRAHI, P. et al. &laquo;Cellulosic biorefineries unleashing lignin opportunities&raquo;.    2010, 2, 383-393.    </font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">2.    CASTA&Ntilde;EDA, R. E. et al. &laquo;Prote&iacute;nas que remodelan y degradan    la pared celular vegetal: perspectivas actuales&raquo;. 2011, 28, 194-204.    </font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">3.    DEEPAK, R. et al. &laquo;Switchgrass for bioethanol and other value-added applications:    A review&raquo;. 2009, 100, 1515-1523.    </font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">4.    JUODEIKIENE, G. et al. &laquo;The use of xylanase for increasing the efficiency    of biocatalytic conversion of crop residues to bioethanol&raquo;. 2011,167,    113-121.    </font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">5.    SOCCOL, C. R. et al. Bioethanol from lignocelluloses: Status and perspectives    in Brazil. 2010, 101, 4820-4825.    </font></p>     ]]></body>
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<body><![CDATA[<p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><i>MSc.    Giselle Morell-N&aacute;poles</i>. Departamento de Ingenier&iacute;a Qu&iacute;mica,    Facultad de Qu&iacute;mica, Universidad de Camag&uuml;ey, Cuba. <a href="mailto:giselle.morell@reduc.edu.cu">giselle.morell@reduc.edu.cu</a></font></p>      ]]></body><back>
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