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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[Producción enzimática de biodiesel con biomasa lignocelulósica]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[The use of the available lignocellulosic biomass in our country is a significant source of renewable energy (SRE) for the socio-economic development planned for the next years. The relevance of the work in this direction has been countersigned in the national SRE policy approved by our state in 2014. Within the chemical diverse routes to follow for producing useful energy, the biofuels production stands out of great importance face the growing demand of the transport sector. In this work we discuss the research strategy and technological development necessary to create conditions allowing the production of lignocellulosic bioethanol and biodiesel. It is shown, how the development of lignocellulosic biofuels it is the friendliest way to environment and it also constitutes a work that will allow developing several products of added high value that could be source of exports or substitutions of imports. The production of microbial oil, of fermentable liquors, of lipase biocatalysts and cellulose from lignocellulosic residuals contributes to the reduction of the raw material costs, main component of the cost of bioethanol and the biodiesel. Due to this realityit is very attractive work in the development of Biorefineries, of invaluable economic potential for the country. The proposal of research strategy can be the starting point of numerous investigations that will contribute to the success of the national strategy of renewable sources of energies.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[ <p align="right"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>ART&Iacute;CULO ORIGINAL</b></font></p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify"><strong><font size="4" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Producci&oacute;n enzim&aacute;tica de biodiesel con biomasa lignocelul&oacute;sica </font></strong></p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify"><strong><font size="3" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Enzymatic production of biodiesel from lignocellulosic biomass </font></strong></p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><strong>MSc. Diana D. Alcal&aacute;-Galiano Morell, <a href="mailto:diana.galiano@reduc.edu.cu">diana.galiano@reduc.edu.cu </a>, MSc. Mario C. Cujilema-Quitio, Ing. Gualberto Le&oacute;n- Revelo, MSc. Linnet Baryolo-Gonz&aacute;lez, Dr. Luis B. Ramos-S&aacute;nchez </strong></font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Departamento de Ingenier&iacute;a Qu&iacute;mica. Universidad de Camag&uuml;ey, Cuba </font></p>     <p align="justify">&nbsp;</p> <hr>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><strong>RESUMEN</strong></font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">El aprovechamiento de la biomasa lignocelul&oacute;sica disponible en el pa&iacute;s es una fuente de energ&iacute;a renovable (FRE) significativa para el desarrollo planificado en los pr&oacute;ximos a&ntilde;os. La relevancia del trabajo en esta direcci&oacute;n ha quedado refrendada en la nueva pol&iacute;tica que sobre FRE fue aprobada en el 2014. Dentro de las diversas rutas qu&iacute;micas a seguir para producir energ&iacute;a, se destaca la producci&oacute;n de biocombustibles, de gran importancia para dar respuesta a la creciente demanda del sector del transporte. En el presente trabajo se discute la estrategia de investigaci&oacute;n y desarrollo tecnol&oacute;gico para crear condiciones que permitan la producci&oacute;n a escala piloto de bioetanol y biodiesel lignocelul&oacute;sicos. Se muestra, como el desarrollo de biocombustibles lignocelul&oacute;sicos es la v&iacute;a m&aacute;s amigable con el medioambiente y constituye adem&aacute;s una direcci&oacute;n de trabajo que permitir&aacute; desarrollar varios productos de alto valor agregado que pudieran ser fuente de exportaciones o sustituciones de importaciones. La producci&oacute;n de aceite microbiano, de licores fermentables y de biocatalizadores de lipasas y celulasas de residuos lignocelul&oacute;sicos contribuye a la reducci&oacute;n de los costos de materia prima, principal costo del bioetanol y el biodiesel por lo que resulta muy atractivo y genera la creaci&oacute;n de biorrefiner&iacute;as de incalculable potencial econ&oacute;mico para el pa&iacute;s. La propuesta de estrategia de trabajo puede ser el punto de partida de numerosas investigaciones que contribuir&aacute;n al &eacute;xito de la estrategia nacional de fuentes renovables de energ&iacute;as. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><strong>Palabras clave: </strong><em>enzimas, fermentaci&oacute;n en estado s&oacute;lido, biodiesel, residuos agroindustriales, estrategia productiva. </em></font></p> <hr>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><strong>ABSTRACT</strong></font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">The use of the available lignocellulosic biomass in our country is a significant source of renewable energy (SRE) for the socio-economic development planned for the next years. The relevance of the work in this direction has been countersigned in the national SRE policy approved by our state in 2014. Within the chemical diverse routes to follow for producing useful energy, the biofuels production stands out of great importance face the growing demand of the transport sector. In this work we discuss the research strategy and technological development necessary to create conditions allowing the production of lignocellulosic bioethanol and biodiesel. It is shown, how the development of lignocellulosic biofuels it is the friendliest way to environment and it also constitutes a work that will allow developing several products of added high value that could be source of exports or substitutions of imports. The production of microbial oil, of fermentable liquors, of lipase biocatalysts and cellulose from lignocellulosic residuals contributes to the reduction of the raw material costs, main component of the cost of bioethanol and the biodiesel. Due to this realityit is very attractive work in the development of Biorefineries, of invaluable economic potential for the country. The proposal of research strategy can be the starting point of numerous investigations that will contribute to the success of the national strategy of renewable sources of energies. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><strong>Keywords </strong>: <em>enzymes, solid state fermentation, biodiesel, agroindustrial residues, productive strategy. </em></font></p> <hr>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify">&nbsp; </p>     <p align="justify"><font size="3" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><strong>INTRODUCCION</strong></font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Desde el advenimiento de la era industrial a fines del siglo XIX, el consumo de energ&iacute;a f&oacute;sil, principalmente petr&oacute;leo, no deja de aumentar de manera exponencial. Seg&uacute;n la agencia International de energ&iacute;a (AIE), el consumo diario mundial es actualmente superior a 86 millones de barriles y alcanzar&aacute; un nivel estimado de m&aacute;s de 116 millones de barriles por d&iacute;a en el 2030. Este enorme consumo de petr&oacute;leo ha generado una dependencia energ&eacute;tica creciente de los pa&iacute;ses no productores de este rubro. El aumento de este consumo es multifactorial e incluye: la industrializaci&oacute;n de los nuevos pa&iacute;ses emergentes como China e India que representan juntos un cuarto de la poblaci&oacute;n mundial, la creciente poblaci&oacute;n mundial, estimada en 9 billones de individuos en el 2050, as&iacute; como tambi&eacute;n la expansi&oacute;n del sector del transporte debido a la internacionalizaci&oacute;n de la econom&iacute;a y del comercio [ 1 ] . </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Estos hechos han producido consecuencias para la vida de nuestro ecosistema global. En unas pocas d&eacute;cadas el hombre habr&aacute; vertido en la atm&oacute;sfera, en forma de di&oacute;xido de carbono, las reservas de petr&oacute;leo acumuladas durante m&aacute;s de 400 millones de a&ntilde;os. As&iacute; desde 1965, son m&aacute;s de 900 billones de barriles que se han consumido globalmente y se han transformado en di&oacute;xido de carbono. Esta cantidad gigantesca de anh&iacute;drido carb&oacute;nico no se recicl&oacute; y representa actualmente m&aacute;s del 50 % de los gases de efecto invernadero que es mayormente el responsable del calentamiento clim&aacute;tico global [ 1 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Al margen de estos aspectos ecol&oacute;gicos, nadie puede pasar por alto los impactos socio-econ&oacute;micos y geopol&iacute;ticos de esta dependencia de las fuentes energ&eacute;ticas f&oacute;siles. De hecho, la posesi&oacute;n de la mayor&iacute;a de los recursos petrol&iacute;feros por una minor&iacute;a de estados hizo del petr&oacute;leo un material muy estrat&eacute;gico, por lo que frecuentemente ha estado asociado a conflictos internacionales y guerras de rapi&ntilde;a desde principios del siglo de XX. Es indiscutible tambi&eacute;n que la reducci&oacute;n de los recursos petroleros mundiales en las pr&oacute;ximas d&eacute;cadas va a producir inevitablemente un incremento notable de su precio de venta y de la volatilidad de &eacute;ste, amenazando as&iacute; el acceso de los estados m&aacute;s pobres a esta fuente de energ&iacute;a. Esta escasez tambi&eacute;n generar&aacute; un crecimiento de los riesgos de la provisi&oacute;n de energ&iacute;a para las grandes potencias econ&oacute;micas no productoras de este recurso y aumentar&aacute; la dependencia de los pa&iacute;ses pobre. En este escenario, diversas causas impulsan la necesidad de la b&uacute;squeda de fuentes renovables de energ&iacute;a (FRE) que contribuyan a mitigar a corto y mediano plazo las consecuencias que se avizoran del obligado cambio de matriz energ&eacute;tica global. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Cuba, pa&iacute;s que actualmente tiene una producci&oacute;n de petr&oacute;leo que apenas cubre la mitad de sus necesidades actuales anuales y que tiene pendiente un gran potencial de desarrollo econ&oacute;mico, es muy sensible a los cambios que se esperan en los pr&oacute;ximos 30 a&ntilde;os. Dentro de las FRE m&aacute;s extendidas en la actualidad en nuestro pa&iacute;s se encuentran: el aprovechamiento de la biomasa, de la energ&iacute;a e&oacute;lica y de la energ&iacute;a fotovoltaica [ 2 ] . En todos los casos predomina como salida principal la generaci&oacute;n de energ&iacute;a el&eacute;ctrica, la que tiene algunas limitaciones estrat&eacute;gicas: primero, en alto grado se basa en la compra de tecnolog&iacute;as establecidas internacionalmente que marcan un cierto grado de dependencia for&aacute;nea que habr&iacute;a que analizar hacia el futuro, segundo, es una energ&iacute;a que resulta dif&iacute;cil de almacenar eficientemente, tercero no puede ser empleada directamente en el sector del transporte automotor actualmente disponible en nuestro pa&iacute;s y, cuarto, en el caso de la biomasa; quemarla directamente para generar energ&iacute;a implicar&iacute;a dejar de producir una gran cantidad de productos que son de vital importancia para el futuro, un error que ya la humanidad cometi&oacute; con el petr&oacute;leo, tal como se prev&eacute; actualmente [ 2 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Las necesidades del desarrollo del sector del transporte en el pa&iacute;s precisan de una soluci&oacute;n para sustituir su base energ&eacute;tica. Internacionalmente existen ya varias direcciones de trabajo: el uso de biocombustibles como el bioetanol y el biodiesel, el uso del hidr&oacute;geno obtenido por diversas v&iacute;as, el cambio hacia motores el&eacute;ctricos aut&oacute;nomos, ya sea con funcionamiento por bater&iacute;as, energ&iacute;a fotovoltaica o celdas de hidr&oacute;geno, entre otras estrategias [ 3 ] . Los biocombustibles que sus propiedades f&iacute;sico-qu&iacute;micas sean an&aacute;logas a los derivados del petr&oacute;leo tienen la ventaja de que pueden ser utilizados directamente o con ligeras modificaciones en el parque automotor disponible en la actualidad [ 4 ] , sin embargo, en la nueva pol&iacute;tica de desarrollo de las (FRE) casi no se hace referencia a ellos y s&oacute;lo el biog&aacute;s es mencionado. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Como parte del trabajo del proyecto “Desarrollo de una tecnolog&iacute;a para la producci&oacute;n de biodiesel de residuos agroindustriales lignocelul&oacute;sicos” ha sido necesario estudiar, reflexionar y juzgar sobre el desarrollo de los biocombustibles como alternativa futura para la matriz energ&eacute;tica del pa&iacute;s. El objetivo de este trabajo es presentar algunas ideas relacionadas con la estrategia de desarrollo tecnol&oacute;gico, en el &aacute;mbito cient&iacute;fico, para aprovechar los recursos nacionales como fuentes renovables de energ&iacute;a. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">El bioetanol y el biodiesel como alternativas energ&eacute;ticas </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Es el momento propicio para liberarse de las fuentes energ&eacute;ticas f&oacute;siles, no renovables. Se necesita encontrar, a corto plazo, alternativas universales, econ&oacute;micamente factibles y m&aacute;s compatibles con el desarrollo sostenible. Los biocombustibles, fuentes de energ&iacute;as renovables obtenidas de la biomasa, constituyen una alternativa interesante para contribuir a sustituir el petr&oacute;leo como alternativa energ&eacute;tica b&aacute;sica, sobre todo por lo que se refiere a la sostenibilidad [ 5 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Los biocombustibles m&aacute;s extendidos en la actualidad son el biodiesel obtenido de aceite de plantas y el bioetanol producido por fermentaci&oacute;n alcoh&oacute;lica de cereales o plantas azucareras como la remolacha y la ca&ntilde;a de az&uacute;car [ 6 ] . El biodiesel posee varias cualidades positivas. El biodiesel no requiere ninguna modificaci&oacute;n ni ajustes de los componentes del sistema de alimentaci&oacute;n de los motores o el sistema de almacenamiento de combustible [ 7 ] . Adem&aacute;s, puede usarse puro y como combustible mixto, en proporciones apropiadas con el diesel de petr&oacute;leo [ 4 ] . Otro aspecto atractivo del biodiesel, que comparte con el bioetanol, es que es obtenido de fuentes renovables, principalmente de plantas, cuyo aceite contribuye muy poco al aumento de la proporci&oacute;n del anh&iacute;drido carb&oacute;nico atmosf&eacute;rico. Seg&uacute;n la “Comisi&oacute;n Europea de Biodiesel&quot;, el uso de este combustible permite reducir entre un 65 y un 95 % las emisiones de anh&iacute;drido carb&oacute;nico respecto al petrodiesel. Adem&aacute;s, el biodiesel permite la reducci&oacute;n de emisiones de part&iacute;culas finas y de contaminantes como el mon&oacute;xido de carbono, el di&oacute;xido de azufre y los &oacute;xidos de nitr&oacute;geno [ 1 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">A pesar de las ventajas del uso del biodiesel, el bioetanol no deja de ser atractivo si se tiene en cuenta que su uso, aunque demanda modificaciones en el parque automotor, no requiere de ser sometido a un segundo proceso para llegar a convertirse en el biodiesel. Por otro lado, la obtenci&oacute;n de bioetanol proporciona un combustible de mejor calidad, adem&aacute;s de aprovechar las posibilidades que brinda la alcoquim&iacute;a como ruta de desarrollo de nuevos productos a partir del etanol [ 8 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Proceso de s&iacute;ntesis del biodiesel </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Industrialmente, el biodiesel es obtenido de triglic&eacute;ridos y/o &aacute;cidos grasos que son los componentes mayoritarios de los aceites vegetales. Se realiza para esto un proceso qu&iacute;mico o bioqu&iacute;mico de transesterificaci&oacute;n. Estos triglic&eacute;ridos se hacen reaccionar con un alcohol, generalmente metanol o etanol, en presencia de un catalizador, consigui&eacute;ndose as&iacute;, &eacute;steres met&iacute;licos o et&iacute;licos de aceite vegetal, seg&uacute;n el alcohol que se emplee. Estos son los &eacute;steres de &aacute;cidos grasos (EAG) que constituyen el biodiesel como tal. A continuaci&oacute;n se muestra de forma esquem&aacute;tica el proceso de transesterificaci&oacute;n. </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><img src="/img/revistas/rtq/v38n1/i0111118.jpg"></font></p>     
<p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Como se muestra anteriormente la transesterificaci&oacute;n ocurre en un sistema de tres reacciones serie. Es necesario partir del hecho que el glicerol es el producto no deseado y se obtiene en la &uacute;ltima reacci&oacute;n. Por tanto, el rendimiento en los productos deseados (&eacute;steres et&iacute;licos) depender&aacute; de varios factores como: los perfiles de concentraci&oacute;n en el reactor, la temperatura y el grado de extensi&oacute;n de la reacci&oacute;n [ 9 ] . En la literatura se reporta el uso de diferentes sistemas de contactos pero sin que se explique el porqu&eacute; de la elecci&oacute;n. Ejemplo Kiril [ 10 ] utiliza un reactor de tanque agitado discontinuo. En el trabajo de Jakeline [ 11 ] , donde se hace un estudio de los diferentes reactores reportados para la reacci&oacute;n de transesterificaci&oacute;n, muestra el uso de reactores de tanque agitado discontinuos, discontinuos con recirculaci&oacute;n de la enzima y continuos y reactores tubulares de lecho empacado y lecho fluidizado. De aqu&iacute; se infiere la necesidad de identificar modelos cin&eacute;ticos robustos que permitan escoger y dise&ntilde;ar el mejor sistema de contacto entre los reactantes. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Seguidamente se discuten alternativas para los tres componentes principales: los triglic&eacute;ridos, el catalizador y el alcohol a ser utilizado. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><strong>Fuentes tradicionales de triglic&eacute;ridos para la s&iacute;ntesis de biodiesel </strong></font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">La producci&oacute;n de biodiesel en la actualidad se basa en el uso de aceites de plantas, grasas de animales y aceites de algas [ 12-15 ] . Actualmente el aceite vegetal m&aacute;s usado para la producci&oacute;n de biodiesel es el aceite de soya, el aceite de girasol o el de <em>Jatropha curcas </em>[ 16 ] . Adem&aacute;s, en la s&iacute;ntesis de biodiesel se han usado con &eacute;xito los residuos de la industria de aceites y grasas, la cachaza de la ca&ntilde;a de az&uacute;car [ 4 ] as&iacute; como el aceite comestible rechazado luego de su uso. Es por consiguiente posible producir biocombustibles de los residuos industriales [ 17 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">De esta manera, otra l&iacute;nea problem&aacute;tica para la s&iacute;ntesis de biodiesel en Cuba es la elecci&oacute;n de las fuentes de triglic&eacute;ridos m&aacute;s convenientes. La producci&oacute;n en Cuba de semillas oleaginosas para la fabricaci&oacute;n de aceites vegetales es escasa y, en sentido general, la existencia de fuentes de grasas que sirvan para una industria de combustibles es despreciable [ 18 ] . Dentro de las posibles fuentes de aceites vegetales a competir en nuestro contexto pueden citarse, entre otros [ 19 ] : <em>Jatropha curcas </em>, <em>Moringa ole&iacute;fera </em>y <em>Azadirachta indica. </em></font></p>     <div align="justify">       <p><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">La producci&oacute;n de aceite <em>Jatropha curcas </em> parece ser una buena alternativa para Cuba debido a las caracter&iacute;sticas de sus suelos y a la facilidad que tiene esta </font>   </p> </div>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">planta para crecer en terrenos semi&aacute;ridos, de baja calidad y con una productividad superior al doble que la soya [ 19 , 20 ] . Una evaluaci&oacute;n reciente de la calidad de los aceites producidos en dos regiones distantes de Cuba arrojan una composici&oacute;n semejante y una buena calidad de los aceites para la s&iacute;ntesis de biodiesel [ 18 ] . Por otro lado, se ha reportado que la s&iacute;ntesis de biodiesel con este aceite y etanol, catalizada con lipasas permite obtener muy buenos resultados [ 21 ] . </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">La <em>Moringa ole&iacute;fera </em> es una planta tambi&eacute;n virtuosa para crecer con buenos rendimientos en diferentes terrenos y en condiciones de secano [ 22 , 23 ] . La calidad de su aceite es muy buena, con un contenido predominante de &aacute;cido oleico, cercano al 70 %, muy superior a otras especies evaluadas en Cuba [ 19 ] . El aceite de <em>Moringa </em> puede tener diversos usos para la s&iacute;ntesis de compuestos de gran inter&eacute;s [ 19 ] y se ha reportado su uso satisfactorio para la s&iacute;ntesis de biodiesel [ 24 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Fuentes alternativas: aceite unicelular </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">M&aacute;s recientemente, un &aacute;rea que ha marcado gran inter&eacute;s internacional es la producci&oacute;n de aceite unicelular (AUC), usando microorganismos oleaginosos heterotr&oacute;ficos [ 25 , 26 ] . Se considera una ventaja que una cierta cantidad de especies puedan crecer en biomasa lignocelul&oacute;sica debido a la gran disponibilidad de estos recursos [ 25 , 26 ] que podr&iacute;an dedicarse a la producci&oacute;n del biodiesel todos los a&ntilde;os de forma renovable. De hecho, estos microorganismos son capaces de sintetizar estos &aacute;cidos grasos usando como substrato fuentes de carbono lignocelul&oacute;sicas como la madera, la paja u otros residuos agroindustriales o, directamente del di&oacute;xido de carbono atmosf&eacute;rico, en el caso de las micro-algas y las cianobacterias por el proceso de fotos&iacute;ntesis [ 26 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Probablemente, los aceites provenientes de microorganismos que crecen sobre substratos lignocelul&oacute;sicos, puedan competir como materia prima para la producci&oacute;n de biodiesel en Cuba. </font></p>     <div align="justify">       <p><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Esto ser&aacute; posible si se consigue implementar las siguientes condiciones [ 12 ] : (i) se utilizan sustentablemente recursos baratos basados en fuentes biol&oacute;gicas </font>   </p> </div>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">como los residuos lignocelul&oacute;sicos; (ii) se consiguen altos rendimientos de los microorganismos oleaginosos heterotr&oacute;ficos (MOH); y (iii) se consigue una producci&oacute;n con una calidad reproducible, alta, y de manera sostenible. Los esfuerzos de investigaci&oacute;n en curso han apuntado al cumplimiento de estas tareas determinando los factores fundamentales que controlan la acumulaci&oacute;n de l&iacute;pidos en las especies oleaginosas [ 12 , 27 , 28 ] , compar&aacute;ndolos para modelar a estos microorganismos y tratar de modificar [ 29 ] y optimizar las condiciones del cultivo [ 12 , 25 , 30 , 31 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">En este momento, como parte del proyecto de biodiesel lignocelul&oacute;sico se trabaja en el aislamiento e identificaci&oacute;n de cepas oleaginosas. En la <a href="#figura1">figura 1</a> se muestran las hifas de una cepa de <em>Rizhopus sp. </em>aislada en la en la Universidad de Camag&uuml;ey en las que se aprecia la abundancia de gl&oacute;bulos de aceite unicelular en su interior luego de crecer en una fermentaci&oacute;n s&oacute;lida de residuos lignocelul&oacute;sicos. Los gl&oacute;bulos de aceite fueron te&ntilde;idos con colorante liposoluble Sudan III. Esta fuente de aceite pudiera contribuir a reducir notablemente el costo del biodiesel [ 7 ] . </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a name="figura1" id="figura1"></a><img src="/img/revistas/rtq/v38n1/f0111118.jpg"></font></p>     
<p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Catalizador enzim&aacute;tico (Lipasa) </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Una alternativa prometedora al uso de la cat&aacute;lisis en ambiente b&aacute;sico consiste en el uso de biocatalizadores enzim&aacute;ticos como las lipasas [ 17 ] . Estas enzimas permiten, por un lado, no tener que acudir m&aacute;s al uso del carbonato s&oacute;dico c&aacute;ustico y a grandes cantidades de agua. De hecho, la cat&aacute;lisis biol&oacute;gica puede conducir, seg&uacute;n las condiciones operativas, a la s&iacute;ntesis de una mol&eacute;cula de triglic&eacute;rido, de dos mol&eacute;culas de &eacute;ster de &aacute;cido graso y a una mol&eacute;cula de monoglic&eacute;rido (&eacute;ster de &aacute;cido graso inocuo para los motores). </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">En general las ventajas de la producci&oacute;n de biodiesel enzim&aacute;tico han sido resumidas en las siguientes [ 7 ] : proceso que opera a temperatura ambiente, se eliminan los costos asociados a la recuperaci&oacute;n del catalizador qu&iacute;mico precipitado, la posibilidad del re-uso de la enzima, alta especificidad de la enzima por el sustrato, la habilidad de la enzima de esterificar no s&oacute;lo &aacute;cido grasos libres sino tambi&eacute;n triglic&eacute;ridos directamente en un solo paso, uso de una menor relaci&oacute;n alcohol/aceite, la eliminaci&oacute;n de reacciones colaterales y la minimizaci&oacute;n de impurezas, la m&aacute;s f&aacute;cil separaci&oacute;n y recuperaci&oacute;n del producto, la degradabilidad del biodiesel y su compatibilidad medioambiental. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Las lipasas son enzimas importantes en los sistemas biol&oacute;gicos. Se obtienen de microorganismos y tambi&eacute;n de plantas y animales. Desde un punto de vista fisiol&oacute;gico, estas enzimas catalizan las reacciones de catabolismo de triglic&eacute;ridos en &aacute;cidos grasos y glicerol. Sin embargo, seg&uacute;n las condiciones operativas (en ausencia de agua), las lipasas son capaces de catalizar otras reacciones industrialmente muy usadas, como las reacciones de transesterificaci&oacute;n. La producci&oacute;n de lipasas constituye en la actualidad un creciente mercado internacional que resulta muy atractivo para la industria biotecnol&oacute;gica cubana. A esto contribuye su amplia aplicaci&oacute;n en la elaboraci&oacute;n de detergentes y la gran versatilidad de estas enzimas en la s&iacute;ntesis org&aacute;nica [ 32 , 33 ] . Dentro de &eacute;stas se destacan las reacciones de transesterificaci&oacute;n [ 34 ] , de renovado inter&eacute;s actual para la industria de biocombustibles [ 35 , 36 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">La producci&oacute;n de lipasas est&aacute; extendida en numerosos g&eacute;neros y especies de microorganismos que abarcan bacterias, levaduras y hongos filamentosos. La selecci&oacute;n del microorganismo apropiado para la producci&oacute;n de estas enzimas es un aspecto clave para el &eacute;xito tecnol&oacute;gico y va a depender del tipo de tecnolog&iacute;a fermentativa a utilizar [ 37 , 38 ] . Los microorganismos m&aacute;s frecuentemente utilizados son los hongos filamentosos [ 39 ] , los cuales tienen un mejor compartimiento en la fermentaci&oacute;n s&oacute;lida. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">La aplicaci&oacute;n de estas enzimas est&aacute; limitada actualmente por los altos costos de producci&oacute;n [ 40 ] . De esta manera, adem&aacute;s de desarrollar procesos de fermentaci&oacute;n muy productivos, se procura aplicar t&eacute;cnicas de purificaci&oacute;n que permitan recuperar al m&aacute;ximo las enzimas producidas, al tiempo que afecten poco su estabilidad y actividad [ 41 ] . En la <a href="#figura2">figura 2</a> se muestran los resultados de la actividad lipol&iacute;tica reportadas en la literatura para hongos filamentosos. </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a name="figura2" id="figura2"></a><img src="/img/revistas/rtq/v38n1/f0211118.jpg"></font></p>     
<p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">En trabajos no publicados sobre el tema, que se llevan a cabo en esta universidad se utiliza un medio semisint&eacute;tico, que se basa en el empleo de un soporte natural (c&aacute;scara de cacao) y reactivos qu&iacute;micos como fuentes de nitr&oacute;geno org&aacute;nico inorg&aacute;nico, fosfatos y otro macro y microelementos. En este caso la actividad m&aacute;xima alcanzada fue cercana a 200 UI/g MS a las 72 h de fermentaci&oacute;n, un resultado notorio si se compara con lo publicado en literatura hasta la fecha. Por otra parte, y como parte de esta investigaci&oacute;n, tambi&eacute;n se ha empleado un medio complejo en el que se usan materias primas como la harina de moringa, suero de leche, miel final de ca&ntilde;a de az&uacute;car, sin otra suplementaci&oacute;n. En este medio hasta la fecha la actividad m&aacute;xima alcanzada es cercana a 80 UI/g MS , en un per&iacute;odo tambi&eacute;n de 72 horas como puede apreciarse en la figura 2. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">En el caso del medio semisint&eacute;tico se alcanza una actividad 2,5 veces mayor que el medio complejo. No obstante, el costo de materias primas en el segundo es mucho menor que el primero y, ese es un factor clave a considerar en las decisiones tecnol&oacute;gicas que se tomen. El trabajo a&uacute;n no ha concluido, hacia el futuro debe encontrarse una soluci&oacute;n intermedia en entre estos dos medios de cultivo, la cual minimice el costo unitario. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Otra cuesti&oacute;n importante en ese sentido es formular el producto terminado de manera que pueda ser reutilizado varias veces [ 42 ] . Para ello se utilizan diferentes t&eacute;cnicas de inmovilizaci&oacute;n en las que se logra, muchas veces, mantener o aumentar la actividad y estabilidad de la enzima, aparte de ofrecer la posibilidad de aplicarlas a procesos continuos con recuperaci&oacute;n del biocatalizador [ 40 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Obtenci&oacute;n del bioetanol </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">El origen del uso de etanol como carburante se remonta al siglo XIX, en los inicios del transporte motorizado. Aunque el posterior desarrollo de la industria petrol&iacute;fera releg&oacute; su utilizaci&oacute;n y la de otros carburantes de origen vegetal, el etanol fue el combustible empleado en el primer motor de combusti&oacute;n interna desarrollado por Nicholas Otto y tambi&eacute;n en el primer autom&oacute;vil de cuatro tiempos fabricado por Henry Ford [ 43 ] . La crisis del petr&oacute;leo en los 70 evidenci&oacute; la dependencia de los pa&iacute;ses exportadores y resurgieron las iniciativas para desarrollar y promover otros tipos de combustibles. Ya en el siglo XXI, la producci&oacute;n mundial de bioetanol a partir de biomasa azucarada y amil&aacute;cea aument&oacute; notablemente, lleg&aacute;ndose a triplicar en s&oacute;lo siete a&ntilde;os, entre 2000 y 2007 [ 44 ] . </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">El etanol tiene un algunas caracter&iacute;sticas interesantes [ 45 ] : contiene un menor contenido de energ&iacute;a (aproximadamente 45 % menos que el diesel), bajo precio y una menor emisi&oacute;n de contaminantes que la gasolina y el petrodiesel. El etanol tiene un n&uacute;mero de octano alto (99), por regla mayor que el de las gasolinas (80-100) lo que hace que no ocurra la pre-ignici&oacute;n al ser usado directamente. Todo esto hace que hasta la fecha sea usado m&aacute;s frecuentemente como un aditivo competitivo de la gasolina que como combustible puro. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">La producci&oacute;n de etanol a partir de la ca&ntilde;a de az&uacute;car y los cereales compite con la alimentaci&oacute;n humana y debido a esto se ha generado una fuerte tendencia a producirlo de fuentes no s&oacute;lo renovables sino, adem&aacute;s, de los residuos agroindustriales. M&uacute;ltiples son las dificultades a enfrentar en la producci&oacute;n de etanol lignocelul&oacute;sico, pero principalmente la reducci&oacute;n de los costos enzim&aacute;ticos que son los m&aacute;s elevados. En esta direcci&oacute;n resulta primordial la b&uacute;squeda de cepas super productoras, estables y resistentes al proceso de producci&oacute;n. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">En la <a href="#figura3">figura 3</a> se muestra una comparaci&oacute;n de las productividades en la producci&oacute;n de celulasas conseguidas en este proyecto de investigaci&oacute;n con sendos esfuerzos de optimizaci&oacute;n de un medio de cultivo para la actividad de una cepa de <em>Aspergillus niger </em>. </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a name="figura3" id="figura3"></a><img src="/img/revistas/rtq/v38n1/f0311118.jpg"></font> </p>     
<p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">La productividad conseguida, aun cuando el trabajo de optimizaci&oacute;n no ha concluido, est&aacute; entre las m&aacute;s altas reportadas en la literatura hasta fecha, con un valor de actividad de alrededor de los 50 UI/g MS . Este valor de actividad est&aacute; dentro de la media reportada, pero se obtuvo a las 24 h, lo cual es un gran paso de avance hacia los objetivos de hacer competitivo el etanol lignocelul&oacute;sico. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Fundamentos de la elecci&oacute;n de los biocombustibles </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">La escasa informaci&oacute;n disponible en nuestro pa&iacute;s sobre estudios propios para el desarrollo de tecnolog&iacute;as de avanzada para la fabricaci&oacute;n de biodiesel no permite hacer un an&aacute;lisis a priori sobre la eficiencia esperada de procesos inversionistas en este sector. De cualquier modo, el an&aacute;lisis de la literatura reciente sobre este tema permite dibujar un escenario sobre la conveniencia de invertir recursos en la investigaci&oacute;n de estas tecnolog&iacute;as. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Importancia del desarrollo de tecnolog&iacute;as para biocombustibles de la biomasa </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">El desarrollo de esta tecnolog&iacute;a traer&aacute; como resultado el desarrollo de varios productos que son de gran inter&eacute;s pr&aacute;ctico para la industria y para el comercio. Dentro de estos productos podemos citar la enzima lipasa, de enormes aplicaciones en la s&iacute;ntesis org&aacute;nica, detergentes biodegradables, tratamiento de aguas residuales, entre otras. Las lipasas son enzimas lipol&iacute;ticas y pertenecen al grupo de enzimas hidrol&iacute;ticas que ocupan el 75 % del mercado industrial de enzimas [ 46 ] . Estas enzimas catalizan un gran n&uacute;mero de reacciones tales como: la hidr&oacute;lisis, la esterificaci&oacute;n, la transesterificaci&oacute;n, la interesterificaci&oacute;n, la acid&oacute;lisis y la amin&oacute;lisis [ 47-50 ] . A partir de esta enzima se llega a un biocatalizador compuesto por la enzima lipasa inmovilizada en un soporte s&oacute;lido de gran inter&eacute;s para la transesterificaci&oacute;n de grasas con etanol, pero con muchas otras aplicaciones potenciales. Algo semejante sucede con las enzimas celulasas de m&uacute;ltiples aplicaciones tambi&eacute;n en la industria textil, de extracci&oacute;n de jugos, tratamiento de residuales, detergentes, etc&eacute;tera. </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Si se avanza por la v&iacute;a celulol&iacute;tica para la s&iacute;ntesis del biodiesel, tambi&eacute;n se llegar&aacute; a una tecnolog&iacute;a para producir aceite unicelular, de inter&eacute;s para la producci&oacute;n de biodiesel, pero con otras numerosas aplicaciones potenciales en la industria alimentaria y la cosm&eacute;tica. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">En nuestro pa&iacute;s existe una gran necesidad de biodiesel en la actualidad y m&aacute;s a&uacute;n hacia el futuro debido a la tendencia que se observa en el crecimiento del precio del petr&oacute;leo al nivel mundial y su agotamiento durante este siglo. Este producto tiene la ventaja a su vez de que puede ser aplicado sin necesidad de hacer muchas modificaciones a los motores que actualmente consumen este carburante proveniente del petr&oacute;leo. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">La tecnolog&iacute;a en la que se est&aacute; trabajando contribuye a resolver la contradicci&oacute;n producida por la utilizaci&oacute;n de productos agropecuarios que compiten con la alimentaci&oacute;n humana; ya sea por su consumo directo, por el aumento que producen en sus precios por el incremento en su demanda [ 51 , 52 ] , como por la competencia que se genera por la disponibilidad de tierras para su cultivo. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">El mejor ejemplo del incremento del inter&eacute;s por parte de la comunidad cient&iacute;fica internacional por estos biocombustibles, se puede observar en la producci&oacute;n mundial de etanol y biodiesel hasta el a&ntilde;o 2009, seg&uacute;n [ 52 ] , lo cual muestra valores en el 2009 de producci&oacute;n de bioetanol en el orden de los 75 billones de litros y de 17 billones de litros de biodiesel. Seg&uacute;n estos valores la producci&oacute;n de estos carburantes muestran una tendencia a incrementarse de forma exponencial, indicativo de lo positivo que est&aacute; resultando la inversi&oacute;n en este tipo de productos. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Propuesta de estrategia de desarrollo tecnol&oacute;gico </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Seg&uacute;n lo que se ha discutido hasta ahora, la estrategia que deber&iacute;a aplicarse en Cuba para el desarrollo de tecnolog&iacute;as de biocombustibles debe basarse en el aprovechamiento de la biomasa generada en los procesos agroindustriales existentes. Esto equivale a rechazar la pol&iacute;tica que promueve el uso de productos que compiten con la alimentaci&oacute;n humana y que ha sido asociada al desmedido incremento de los &iacute;ndices de precios de los alimentos desde el a&ntilde;o 2007. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">La estrategia que se propone se basa en el concepto de <em>biorrefiner&iacute;a </em>, actualmente en desarrollo por parte de la comunidad cient&iacute;fica internacional y pretende desarrollar toda una variedad de materias primas que sirven de punto de partida para la s&iacute;ntesis de numerosos productos derivados que tienen un enorme potencial econ&oacute;mico. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">En la <a href="#figura4">figura 4</a> se muestra de forma simplificada la ruta qu&iacute;mica que hemos adoptado en el proyecto en la que las salidas, como se ha dicho antes son varias; no s&oacute;lo bioetanol y biodiesel sino, adem&aacute;s biocatalizadores y licores azucaradas de gran potencial econ&oacute;mico. </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a name="figura4"></a><img src="/img/revistas/rtq/v38n1/f0411118.jpg"></font></p>     
<p align="justify">&nbsp;</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><strong><font size="3" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">CONCLUSIONES</font></strong></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">&#149;&nbsp; Se considera que el desarrollo m&aacute;s extensivo y diverso de los biocombustibles es una direcci&oacute;n estrat&eacute;gica para el desarrollo econ&oacute;mico para el pa&iacute;s, en la que vale la pena invertir en investigaci&oacute;n y desarrollo. El desarrollo de biocombustibles lignocelul&oacute;sicos es la v&iacute;a m&aacute;s amigable con el medioambiente y constituye adem&aacute;s una direcci&oacute;n de trabajo que permitir&aacute; desarrollar varios productos de alto valor agregado que pudieran ser fuente de exportaciones o sustituciones de importaciones. La producci&oacute;n de aceite microbiano, de licores fermentables y de biocatalizadores de lipasas y celulasas de residuos lignocelul&oacute;sicos contribuye a la reducci&oacute;n de los costos de materia prima, principal costo del bioetanol y el biodiesel por lo que resulta muy atractivo y genera la creaci&oacute;n de biorrefiner&iacute;as de incalculable potencial econ&oacute;mico para el pa&iacute;s. La propuesta de estrategia de trabajo puede ser el punto de partida de numerosas investigaciones que contribuir&aacute;n al &eacute;xito de la estrategia nacional de fuentes renovables de energ&iacute;as. </font></p>     <div align="justify">       <p><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><strong>    </strong>     </font>   </p> </div>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><strong>&nbsp; </strong></font></p>     <p align="justify"><strong><font size="3" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">BIBLIOGRAFIA</font></strong></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>1. P&Aacute;SZTOR, A. &quot;Advanced biofuel production: Engineering metabolic pathways for butanol and propane biosynthesis&quot; <em>. </em> Ph. D. Thesis, University of Turku, 2015.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>2. SINGH, A. [ <em>et al </em>.]. &quot;Comparative study on ethanol production from pretreated sugarcane bagasse using immobilized <em>Saccharomyces cerevisiae </em> on various matrices&quot;. <em>Renewable Energy </em>. 2013, vol. 50, p. 488-493.     </a></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>3. SATTARI, S., VAHABZADEH, F., y AGHTAEI, H.K. &quot;Performance of loofa-immobilized <em>rhizopus oryzae </em>in the enzymatic production of biodiesel with use of oleic acid in n-hexane medium&quot;. <em>Brazilian Journal of Chemical Engineering </em>. 2015, vol. 32, n&uacute;m. 2, p. 367-376.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>4. MARINKOVIC, D.M. [ <em>et al. </em>]. &quot;The synthesis oh CaO loaded onto Al 2 O 3 from calcium acetate and its application in transesterification of the sunflower oil&quot;. <em>Advanced Technologies </em>. 2015, vol. 4, n&uacute;m. 1, p. 23-32.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>5. KOH, M.Y. y GHAZI, T.I.M. &quot;A review of biodiesel production from <em>Jatropha curcas </em> L. oil&quot;. <em>Renewable and Sustainable Energy Reviews </em>. 2011, vol. 15, p. 2240–2251.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>6. BABAKIA, M. [ <em>et al. </em>]. &quot;Preparation of highly reusable biocatalysts by immobilization of lipases on epoxy-functionalized silica for production of biodiesel from canola oil&quot;. <em>Biochemical Engineering Journal </em>. 2015, vol. 101, p. 23-31.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>7. CHRISTOPHER, L.P., KUMAR, H., y ZAMBARE, V.P. &quot;Enzymatic biodiesel: Challenges and opportunities&quot;. </a><em>Applied Energy </em>. 2014, vol. 119, p. 497–520.     </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>8. MESA-GARRIGA, L. &quot;Estrategia investigativa para la tecnolog&iacute;a de obtenci&oacute;n de etanol y coproductos del bagazo de la ca&ntilde;a de az&uacute;car&quot; <em>. </em> Tesis en opci&oacute;n al t&iacute;tulo de Doctor en Ciencias T&eacute;cnicas. Especialidad, Ingenier&iacute;a Qu&iacute;mica, Universidad Central “Marta Abreu” de Las Villas, 2010.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>9. FOGLER, H.S. <em>Elements of Chemical Reaction Engineering. </em> 4 ed. Massachusetts, USA: Prentice Hall, 2005. p. 1080, ISBN 0-13-047394-4.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>10. KAZANCEV, K., SENDZIKIENE, E., y KAZANCEVA, I. &quot;Application of enzymatic process for biodiesel synthesis from vegetable oil with high fatty acid content using butanol&quot;. <em>Engineering for Rural Development </em>. 2015, vol. 20, n&uacute;m. 5, p. 302-306.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>11. POPPE, J.K. [ <em>et al. </em>]. &quot;Enzymatic reactors for biodiesel synthesis: Present status and future prospects &quot;. <em>Biotechnology Advances </em>. 2015, vol. 33, p. 511-525.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>12. KOSA, M. y RAGAUSKAS, A.J. &quot;Lipids from heterotrophic microbes: advances in metabolism research&quot;. <em>Trends in Biotechnology </em>. 2011, vol. 29, n&uacute;m. 2, p. 53-61.     </a></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>13. VASUDEVAN, P.T. y BRIGGS, M. &quot;Biodiesel production-current state of the art and challenges&quot;. <em>J. Ind. Microbiol. Biotechnol. </em> 2008, vol. 35, p. 421–430.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>14. CHISTI, Y. &quot;Biodiesel from microalgae beats bioethanol&quot;. <em>Trends Biotechnol </em>. 2008, vol. 26, p. 126–131.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>15. RATLEDGE, C. y COHEN, Z. &quot;Microbial and algal oils: Do they have a future for biodiesel or as commodity oils&quot;. <em>Lipid Techn </em>. 2008, vol. 20, p. 155–160.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>16. NANDI, S. y BHATTACHARYYA, R. &quot;Production of biodiesel from <em>Jatropha curcas </em> oil with recycling of enzyme&quot;. <em>International Journal on Applications in Civil and Enviornmental Engineering </em>. 2015, vol. 1, n&uacute;m. 1, p. 1-5.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>17. GO, A.W. [ <em>et al. </em>]. &quot;Developments in-situ (trans) esterification for biodiesel production: A critical review&quot;. <em>Renewable and Sustainable Energy Reviews </em>. 2016, vol. 60, p. 284-305.     </a></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>18. RODR&Iacute;GUEZ, R.P. [ <em>et al.]. </em> &quot;Characterization of <em>Jatropha curcas </em> oils and their derived fatty acid ethyl esters obtained from two different plantations in Cuba&quot;. <em>Biomass and Bioenergy </em>. 2011, vol. 35, p. 4092-4098.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>19. MART&Iacute;N, C. [ <em>et al </em>.]. &quot;Fractional characterisation of jatropha, neem, moringa, trisperma, castor and candlenut seeds as potential feedstocks for biodiesel production in Cuba&quot;. <em>Biomass and Bioenergy </em>. 2010, vol. 34, p. 533–538.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>20. LORA, E.E.S. [ <em>et al. </em>]. &quot;Issues to consider, existing tools and constraints in biofuels sustainability assessments&quot;. <em>Energy </em>. 2011, vol. 36, p. 2097-2110.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>21. KOH, M.Y., MOHD, T.I., y GHAZI. &quot;A review of biodiesel production from <em>Jatropha curcas L. </em> oil&quot;. <em>Renewable and Sustainable Energy Reviews </em>. 2011, vol. 15, p. 2240–2251.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>22. MOSER, B.R. &quot;Biodiesel production, properties, and feedstocks&quot;. <em>In Vitro Cell.Dev.Biol.—Plant </em>. 2009, vol. 45, p. 229–266.     </a></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>23. BORUGADDA, V.B. y GOUD, V.V. &quot;Biodiesel production from renewable feedstocks: Status and opportunities&quot;. <em>Renewable and Sustainable Energy Reviews </em>. 2012, vol. 16, p. 4763–4784.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>24. BORGES, M.E. y D&Iacute;AZ, L. &quot;Recent developments on heterogeneous catalysts for biodiesel production by oil esterification and transesterification reactions: A review&quot;. <em>Renewable and Sustainable Energy Reviews </em>. 2012, vol. 16, p. 2839–2849.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>25. LI, Q. &quot;Perspectives of microbial oils for biodiesel production&quot;. <em>Appl. Microbiol. Biotechnol </em>. 2008, vol. 80, p. 749–756.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>26. MENG, X. &quot;Biodiesel production from oleaginous microorganisms&quot;. <em>Renewable Energy </em>. 2009, vol. 34, p. 1–5.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>27. ZHANG, Y. y RATLEDGE, C. &quot;Multiple isoforms of malic enzyme in the oleaginous fungus, Mortierella alpina&quot;. <em>Mycol. Res </em>. 2008, vol. 112, p. 725–730.     </a></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>28. BEOPOULOS, A. &quot; <em>Yarrowia lipolytica </em>: A model and a tool to understand the mechanisms implicated in lipid accumulation&quot;. <em>Biochimie </em>. 2009, vol. 91, p. 692–696.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>29. ZHANG, Y. &quot;Malic enzyme: the controlling activity for lipid production Overexpression of malic enzyme in <em>Mucor circinelloides </em> leads to a 2.5-fold increase in lipid accumulation&quot;. <em>Microbiology </em>. 2007, vol. 153, p. 2013–2025.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>30. BEOPOULOS, A. &quot; <em>Yarrowia lipolytica </em> as a model for bio-oil production&quot;. <em>Prog. Lipid Res </em>. 2009, vol. 48, p. 375–387.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>31. WU, S. &quot;Phosphate-limitation mediated lipid production by <em>Rhodosporidium toruloides </em>&quot;. <em>Bioresour. Technol. </em> 2010, vol. 101, p. 6124–6129.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>32. CORZO, G. y REVAH, S. &quot;Production and characteristics of the lipase from <em>Yarrowia lipolytica </em> 681&quot;. <em>Bioresource Technology </em>. 1999, vol. 70, p. 173-180.     </a></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>33. SHARMA, R., CHISTI, Y., y BANERJEE, U.C. &quot;Production, purification, characterization, and applications of lipases &quot;. <em>Biotechnology Advances </em>. 2001, vol. 19, p. 627–662.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>34. RODR&Iacute;GUEZ, R.C. y FERN&Aacute;NDEZ-LAFUENTE, R. &quot;Lipase from <em> Rhizomucor miehei </em> as an industrial biocatalyst in chemical process&quot;. <em>Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic </em>. 2010, vol. 64, p. 1-22.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>35. MA, F. y HANNA, M.A. &quot;Biodiesel production: a review&quot;. <em>Bioresource Technology </em>. 1999, vol. 70, p. 1-15.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>36. SHAHID, E.M. y JAMAL, Y. &quot;A review of biodiesel as vehicular fuel&quot;. <em>Renewable and Sustainable Energy Reviews </em>. 2008, vol. 12, p. 2484–2494.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>37. COCA, J. [ <em>et al. </em>]. </a>&quot;Producci&oacute;n y Caracterizaci&oacute;n de las lipasas de <em>Aspergillus niger </em> y <em>A. fumigatus </em>&quot;. <em>Biotecnolog&iacute;a Aplicada </em>. 2001, vol. 18, p. 216-220.     </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>38. UL-HAQ, I., IDREES, S., y RAJOKA, M.I. &quot;Production of lipases by <em>Rhizopus oligosporous </em> by solid-state fermentation&quot;. <em>Process Biochemistry </em></a>2002, vol. 37, p. 637-641.     </font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>39. ELLAIAH, P. [ <em>et al. </em>]. &quot;Production of lipase by immobilized cells of <em>Aspergillus niger </em>&quot;. <em>Process Biochemistry </em>. 2004, vol. 39, p. 525-528.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>40. WANG, F. [ <em>et al. </em>]. &quot;Magnetic mesoporous silica nanoparticles: Fabrication and their laccase immobilization performance&quot;. <em>Bioresource Technology </em>. 2010, vol. 101, p. 8931-8935.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>41. SAXENA, R.K. [ <em>et al. </em>]. &quot;Purification strategies for microbial lipases&quot;. <em>Journal of Microbiological Methods </em>. 2003, vol. 52, p. 1-18.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>42. KIMA, M.I. [ <em>et al </em>.]. &quot;Inmobilization of <em> Mucor javanicus </em> lipase on effectively functionalized silica nanoparticles&quot;. </a><em>Journal of Molecular Catalysis B </em>. 2006, vol. 39, p. 62–68.     </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>43. ALVIRA-IR&Aacute;IZOZ, P. &quot;Estudio y formulaci&oacute;n de nuevos c&oacute;cteles enzim&aacute;ticos para la mejora de la producci&oacute;n de etanol a partir de paja de trigo&quot; <em>. </em> Tesis en opci&oacute;n al t&iacute;tulo de Doctor en Ciencias T&eacute;cnicas. Especialidad, Ingenier&iacute;a Qu&iacute;mica, Universidad Complutense, Madrid. 2012.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>44. SIMS, R. [ <em>et al. </em>]. &quot;From 1st to 2nd generation biofuel technologies: an overview of current industry and RD&amp;D activities&quot;. International Energy Agency, 2008.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>45. MUTREJA, R. [ <em>et al </em>.]. &quot;Bioconversion of Agricultural Waste to Ethanol by SSF Using Recombinant Cellulase from <em>Clostridium thermocellum </em>&quot;. <em>Enzyme Research </em>. 2011, vol. 2011, p. 1-6.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>46. BASHEER, S.A. y M.THENMOZHI. &quot;Reverse micellar separation of lipases: a critical review.&quot;. <em>Int. J. Chem. Sci. </em> 2010, vol. 8, n&uacute;m. 5, p. 57-67.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>47. SRIMHAN, P. <em>[et al. </em>]. &quot;Selection of lipase producing yeasts for methanol-tolerant biocatalyst as whole cell application for palm-oil transesterification.&quot;. </a><em>Enzyme and Microbial Technology </em>. 2011, vol. 48, p. 293-298.     </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>48. DALLA-VECCHIA, R., NASCIMENTO, M.d.G., y SOLDI, V. &quot;Aplica&ccedil;&otilde;es sint&eacute;ticas de lipases imobilizadas em pol&iacute;meros&quot;. <em>Quim. Nova </em>. 2004, vol. 27, n&uacute;m. 4, p. 623-630.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>49. PATIL, K.J., CHOPDA, M.Z., y MAHAJAN, R.T. &quot;Lipase biodiversity&quot;. <em>Indian Journal of Science and Technology </em>. 2011, vol. 4, n&uacute;m. 8, p. 28-37.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>50. XU, Y. &quot;Process Technology for Immobilized Lipase Catalyzed Reactions&quot; <em>. </em> Ph. D. Thesis, 2012.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>51. LEE, S.U. [ <em>et al. </em>]. &quot;Bioprocessing aspects of fuels and chemicals from biomass&quot;. <em>Korean J. Chem. Eng. </em> 2012, vol. 29, n&uacute;m. 7, p. 831-850.     </a></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a>52. TIMILSINA, G.R. y SHRESTHA, A. &quot;How much hope should we have for biofuels?&quot;. <em>Energy </em>. 2011, vol. 36, p. 2055-2069.     </a></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Recibido: Septiembre 2017     <br> Aprobado: Diciembre 2017</font></p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">MSc. Diana D. Alcal&aacute;-Galiano Morell, <a href="mailto:diana.galiano@reduc.edu.cu">diana.galiano@reduc.edu.cu; </a></font><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Departamento de Ingenier&iacute;a Qu&iacute;mica. Universidad de Camag&uuml;ey, Cuba </font></p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p>&nbsp;</p>     <p>&nbsp;</p>     ]]></body>
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