1 Doctor en Ciencias Farmacéuticas. Profesor Auxiliar.
2 Master en Ciencias.
3 Licenciado en Ciencias Farmacéuticas.
4 Doctor en Ciencias Biológicas. Instituto de Investigaciones Fundamentales de la Agricultura.
Descriptores DeSC: RAUWOLFIA, ALCALOIDES DE RAUWOLFIA/aislamiento y purificación; RAICES DE PLANTA/química.
El ínteres fitoquímico de las especies del género Rauvolfia rebasa los límites de constituir fuentes de reserpina y sus congéneres.1 Desde hace ya décadas se reconoce que sus especies acumulan, en cantidades apropiadas para su explotación comercial, otros alcaloides indólicos de interés farmacológico, terapéutico y/o económico, entre los que se pueden citar las yohimbinas, la ajmalina, la ajmalicina, la serpentina, entre otros.2
Los aspectos anteriormente señalados así como la necesidad de explotar más profundamente los recursos naturales de nuestro país, han constituido un estímulo para la realización de este trabajo, el cual profundiza en la composición alcaloidal de la raíz de Rauvolfia viridis Roem. et Schult.3,4
Una vez separadas las raíces del resto del vegetal, se descortezan manualmente y se someten a un proceso de secado al aire durante varias semanas. Luego se secan en estufa durante 24 h a temperatura entre 40 y 50 EC y con circulación forzada de aire.
Por último, las cortezas se muelen a polvo fino y se procede a la extracción y purificación preliminar de los alcaloides, según se ha descrito en publicaciones anteriores.4 ]]>
En este trabajo se enfrentó el estudio de la porción de bases débiles correspondiente a la fracción A. Para ello, los alcaloides reunidos de esta fracción se separaron por procedimiento de gradiente ácido, para rendir 3 grupos de bases: débiles, moderadas y fuertes, según se ha descrito en un trabajo anterior (Martínez JA. Alcaloides de Rauwolfia viridis Roem. et Schult. y R tetrahylla L. Interés farmacéutico actual. Tesis de Doctorado. Universidad de La Habana. 1989).Se refraccionaron 10 g de las bases débiles mediante distribución en contracorriente (DCC) en un equipo tipo Craig Post (Gallempkamp), automático, de 120 intercambiadores con las condiciones que se resumen posteriormente.
Las técnicas y solventes empleados se han presentado en una publicación anterior.4
Los productos aislados han sido purificados por recristalizaciones sucesivas hasta garantizar un alto grado de pureza, apropiado para el análisis espectroscópico.
Del conjunto de intercambiadores 12-26 se logra la cristalización de quebrachidina y a-yohimbina, de los intercambiadores 27-31 se cristaliza yohimbina y, por último, los intercambiadores 0-11 se reúnen y se someten a otro proceso de contracorriente (tabla 2), de manera que se obtiene por cristalización ajmalidina y reserpinina.
TABLA 1. DCC de la fracción de bases débiles de la corteza de R. viridis Roem et Schult.
| | | Intercambiadores | |
| ]]> I | | Varios alcaloides | |
| | | Quebrachidin a, a-yohimbina | |
| | | Ajmalina y otros | |
| | ]]> 32-73 | Alcaloides menores | |
TABLA 2. DCC de la fracción de bases débiles de la raíz de R. viridis Roem. et Schult.
| | | Composición | |
| | | Reserpina y otros alcaloides | |
| ]]> II | | Ajmalidina y alcaloides menores | |
| | | Alcaloides menores | |
Las aguas madres de la segunda cosecha se concentran y se someten a una separación por cromatografía en capa preparativa, así se logra la separación de a-yohimbina que se cristalizó en forma de clorhidrato de una mezcla acetona-metanol (161 mg). El sistema cromatográfico empleado fue acetona : éter de petróleo : tetracloruro de carbono : isooctano (35:30:20:15).5
De los intercambiadores 27-31 luego de la evaporación del solvente, se efectuó la redisolución en acetona, y mediante la acidificación del medio con ácido clorhídrico se obtiene el alcaloide yohimbina en estado cristalino.
El conjunto de intercambiadores 0-11 reúnen un elevado número de componentes minoritarios que se sometieron a una posterior redistribución en contracorriente (tabla 2).
La fracción de los intercambiadores 10-32 que contiene como componente principal ajmalidina, se concentró a seco y se redisolvió en metanol para su cristalización. Se obtuvo una primera cosecha de cristales, tras añadir éter di-isopropílico hasta incipiente turbidez (104 mg). ]]>
La fracción de los intercambiadores 0-9, se redistribuyó en contracorriente en el sistema constituido por una fase metanol-agua (70 %) y éter de petróleo (60-80 EC), para rendir, en forma análoga a la descrita en un trabajo anterior,6 la base reserpinina. Otros intentos de cristalizar alcaloides a partir de esta última experiencia han sido, por ahora, negativos.Las bases a-yohimbina, quebrachidina, yohimbina y reserpinina se identificaron contra patrones por cromatografía en capa fina, la determinación de sus puntos de fusión y espectros IR. La plena concordancia de estos parámetros sustenta la caracterización de los productos. En el caso de ajmalidina se realizó un análisis espectral completo (UV, IR,1H-RMN y MS), además de su comparación con muestra sintética del poducto preparada en un trabajo anterior.6
El fraccionamiento de la mezcla de bases débiles resultante de la separación de ajmalina de la raíz de R. viridis Roem. et Schult., ha permitido aislar y purificar los alcaloides ajmalidina, a-yohimbina, quebrachidina, reserpinina y yohimbina. De estos, los 3 primeros no han sido reconocidos con anterioridad para la especie.
Se descarta la existencia de reserpina, al menos en cantidades de interés económico, en esta parte del vegetal.
Subject headings: RAUWOLFIA; RAUWOLFIA ALKALOIDS/isolation and purification; PLANT ROOTS/chemistry.
Dr. Jorge A. Martínez Pérez. Instituto de Farmacia y Alimentos. Universidad de La Habana. Ave 23 No. 21425 entre 214 y 222, La Coronela, municipio La Lisa, Ciudad de La Habana, Cuba. ]]>