Instituto de Farmacia y Alimentos. Universidad de La Habana

Estudio Farmacognóstico de la droga cruda de la semilla de calabaza (Cucurbita SPP)

Juan Abreu Payrol,¹ Lilia Saborido Martín,² Eimet Suárez Pérez,² Rolando Delgado Castillo³ y Migdalia Miranda Martínez⁴

Resumen

Se presentan algunos parámetros farmacognósticos de la droga cruda de la semilla de calabaza, con vistas a su posterior uso en formulaciones antiparasitarias. Se comparan semillas de 3 variedades: Cucurbita pepo var RG, C. moschata Duch ex Lam Duch ex Porr (Cuba Cueto 8574) y C. maxima var INIVIT C88, en cuanto a masa, humedad residual, cenizas, sustancias solubles y tamizaje fitoquímico, a fin de proponer la mejor para su empleo como antiparasitario, y se trata de forma breve la propuesta de una técnica sencilla para la extracción del principio activo de la semilla (cucurbitina).

DeCS: CUCURBITACEAS/uso terapéutico; PLANTAS MEDICINALES/ uso terapéutico; EXTRACTOS VEGETALES/farmacología; EXTRACTOS VEGETALES/uso terapéutico; MEDICINA HERBARIA; SEMILLAS; FARMACOGNOSIA.

El avance científico-técnico alcanzado en nuestros días ha permitido el desarrollo y obtención de fármacos cada vez superiores, que contribuyen a alargar la esperanza de vida de la humanidad. Esto no ha restado importancia a la medicina tradicional, por el contrario, ha cobrado auge hoy día. En las actuales condiciones económicas en que vive el mundo, se deben enfrentar fuertes limitaciones en la importación de medicamentos y materias primas para su producción. Para que no falte una respuesta rápida a las enfermedades, el desarrollo de productos a partir de plantas medicinales constituye una vía alternativa en este contexto.

Métodos

Se procedió según las Normas Ramales de Salud Pública 309/92 y 310/92,^1,2 y Quality Control Methods for Plant Materials de la OMS.³ El tamizaje fitoquí-mico se realizó según la metodología propuesta por el Programa Nacional de Plantas Medicinales (Miranda M, Cuéllar A. Manual de prácticas de farmacognosia. 1995).

Se aplicó cromatografía de capa delgada (CCD) a los extractos para confirmar la presencia de cucurbitacinas y aminoácidos, en la que se utilizaron placas de silicagel G60 activadas a 110 °C durante 1 h, y se puntearon 10 µL de los extractos.

Se emplearon las condiciones⁴ siguientes:

Aminoácidos:

Fase móvil: n-butanol:acetona:ácido acético glacial:agua 35:35:10:20.

Revelador: Ninhidrina. ]]> Cucurbitacinas:

Fase móvil: cloroformo:etanol 95:5.

Revelador: Vainillina-ácido fosfórico.

La extracción de aminoácidos se aplicó a las semillas de la variedad C. pepo var RG. Se siguieron los pasos siguientes:

1. Secado y molida de la semilla.
2. Extracción en Soxhlet con CCl (139,5 g de semilla/600 mL de CCl₄).
3. Extración en agua (87 g de semilla/210 mL de agua).
4. El extracto se concentró a presión reducida hasta cerca de una tercera parte de su volumen, y se le adicionó un volumen idéntico de metanol frío. El precipitado separado por centrifugación se desechó, y el extracto hidroalcohólico se concentró unas 50 veces a 95 °C.
]]> Electroforesis (sobre papel de celulosa, con buffer de bicarbonato pH 7,4, desarrollo de 4 h. Se determina la posición de las bandas con ninhidrina).

Resultados

Los resultados obtenidos en la determinación de los parámetros farmacognósticos: masa de las semillas, humedad residual, cenizas totales y sustancias solubles, se muestran en la tabla 1, en la que se resaltan los más favorables según las técnicas de procesamiento estadístico, en cada una de las especies estudiadas.

Los resultados del tamizaje fitoquímico se indican en la tabla 2, donde se presentan los resultados obtenidos en cada extracto para las especies estudiadas.

Tabla 1. Parámetros farmacognósticos de la droga cruda de la semilla de la calabaza

 

Parametros	C. pepo var RG	]]> Cuba Cueto 8574	INIVIT C 88	Tamaño de la muestra
Masa (mg)	64,006 ± 17,311	76,424 ± 17,746	68,178 ± 21,925	50
]]> Humedad residual	(%) 8,654 ± 1,191	8,836± 0,774	9,678± 0,411	30
Cenizas totales (%)	5,228± 1,246	5,179 ± 0,971	5,824 ±1,466	]]> 60
Sustancias solubles (%)	1,055 ± 0,344	1,063± 0,330	0,085 ±0,031	30

Tabla 2. Tamizaje fitoquímico de las semillas de calabaza ]]>  

Ensayos	C. pepo var RG	Cuba Cueto 8574	INIVIT C88
Extracto etéreo
Dragendorff	]]> -	-	-
Mayer	-	-	-
Baljet	]]> -	-	-
Sudan	+	++	+++
Liebermann-Burchard	]]> +	+	+
	Azul intenso	Azul verde intenso	Azul intenso
Extracto alcohólico
]]> Resinas	-	-	-
Fehling	+muy débil	+muy débil	]]> +muy débil
Liebermann-Burchard	+verde azul	+verde azul	+verde azul
Baljet	-	-	]]> -
Espuma	-	-	-
Cloruro férrico	-	-	]]> -
Ninhidrina	+	+	+
Börntrager	-	-	-
Dragendorff	-	-	-
Shinoda	]]> -	-	±
Kedde	-	-	-
Antocianidinas	-	-	]]> -
Extracto acuoso
Dragendorff	-	-	-
Cloruro férrico	+rojo vino	]]> +rojo vino	+ rojo vino
Fehling	+débil	+	+
Shinoda	±	-	-
Espuma	-	-	]]> -
Principios amargos	-	-	-
Ninhidrina	+	+++	+++
Liebermann-Burchard	-	-	-

]]>  

Discusión

Se muestra en la tabla 1 que en el caso de la humedad residual, aunque la media es ligeramente más baja para la variedad C. pepo var. RG, la prueba de Student de comparación de medias indicó que no hay diferencias significativas en la humedad residual de las semillas de las variedades C. pepo var. RG y Cuba Cueto 8574.

Se conoce además, que el mayor rendimiento agrícola en masa de semillas por hectárea lo muestra la variedad Cuba Cueto 8574 (Soto R. Comunicación personal, 1995), la cual parece ser más ventajosa para su empleo según estos resultados.

De forma complementaria también fueron determinados valores de largo y ancho de las semillas, cenizas solubles en agua e insolubles en ácido. Se buscó una expresión que relacionara la masa, largo y ancho, pero no mostró un ajuste significativo.

Las semillas de la variedad Cuba Cueto 8574 tienen los parámetros farmacog-nósticos más recomendables para su empleo en la producción de fitofármacos, mientras las semillas de la variedad INIVIT C88 son las menos recomendables para su empleo en la producción de fitofármacos.

La composición de las 3 variedades es muy parecida cualitativamente, con la precisión que puede dar el tamizaje. Hay coincidencia con la literatura revisada⁵ que apunta la semejanza entre diferentes variedades, justificando ligeras variaciones de una a otra.

La CCD confirmó la presencia de curcubitacinas en los extractos etéreo y alcohólico, y de aminoácidos en los extractos alcohólico y acuoso, lo que indica una composición cualitativa muy parecida en las 3 variedades en cuanto a estos metabolitos.

Se determinó el rendimiento de aceite en el proceso de extracción con CCl₄, que resultó ser 37,699 ± 1,390 %, lo cual coincide con los reportes de la literatura. ⁶

Luego de la extracción en agua se aplican los ensayos de Fehling y de la ninhidrina al extracto obtenido, que resultaron positivos. ]]> Al realizar la electroforesis, en la zona de aplicación queda una banda amarilla que debe ser la cucurbitina, pues no se reporta la presencia de prolina o hidroxiprolina en la semillas de calabaza.⁷ Se redisolvió esta banda en el buffer, y se comprobó por CCD su pureza mediante las condiciones ya descritas.

Por tanto, el método de extracción empleado conduce a un extracto de aminoácidos, del que se puede separar por electroforesis un aminoácido que debe ser la cucurbitina.

Summary

Some pharmacognostic parameters of the raw drug from the pumpkin seed are presented in order to use it later in antiparasitic formulations. The seeds of 3 varieties are compared: Cucurbita pepo var RG, C. moschata Duch ex Lam Duch ex Porr (Cuba Cueto 8574) and C. maxima var INIVIT C88. Mass, residual humidity, ashes, soluble substances and phytochemical screening were analyzed aimed at proposing the best for its use as antiparasitic. The proposal of a simple technique for the extraction of the active principle of the seed (cucurbitina) is briefly explained.

Subject headings: CUCURBITACEAS/therapeutic use; PLANTS, MEDICINAL//therapeutic use; PLANT EXTRACTS/pharmacology; PLANT EXTRACTS//therapeutic use; MEDICINE, HERBAL; SEEDS; PHARMACOGNOSY.

Referencias bibliográficas

1. Norma Ramal de Salud Pública 309. Medicamentos de origen vegetal. Droga cruda. Métodos de ensayo. Vig. 1992,1992.9 pp.
2. Norma Ramal de Salud Pública 310. Medicamentos de origen vegetal. Droga cruda. Especificaciones generales. Vig.1992,1992.5 pp.
3. Organización Mundial de la Salud. Quality control methods for medicinal plant materials. Ginebra: Edit. WHO,1992.210 pp.
]]> Wagner H, Bladt S, Zgainski E. Plant Drug Analysis. Berlín: Springer- Verlag, 1984.345 pp.
4. Bokova NA, Samylina IA, Baratova LA. Phytochemical study of the seeds of the squash. Farmatsiya 1982;31(2):17-8.
5. El Gharbawi Ml. Some chemical and physical characteristics of naked punpkin seed oil (Cucurbita pepo). Lybian J Agric 1977;6(2):199-203.
6. Bravo OR, García MH. Phytochemical study of Cucurbita maxima seeds. An R Acad Farm 1974;40(3-4):463-73.

Recibido: 27 de marzo del 2001. Aprobado: 17 de abril del 2001.
M.Sc. Juan Abreu Payrol Instituto de Farmacia y Alimentos. Universidad de La Habana. Ave. 23 No. 21422 entre 214 y 222, La Coronela, municipio La Lisa, Ciudad de La Habana, Cuba.

¹ Máster en Ciencias. Profesor Auxiliar.
² Licenciada en Ciencias Farmacéuticas. Universidad de Cienfuegos. ]]> ³ Máster en Ciencias. Profesor Auxiliar. Universidad de Cienfuegos.
⁴ Doctora en Ciencias. Profesora Titular.