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</front><body><![CDATA[ <H3>Trabajos Originales</H3>       <P>Instituto Nacional de Angiolog&iacute;a y Cirug&iacute;a Vascular</P>   <H2>Pruebas de hipersensibilidad retardada y niveles séricos en cinc en pacientes diabéticos</H2>   <I>    <P>Lic. Mir&iacute;am Mah&iacute;a Vilas,<SUP>1</SUP> Lic. Alcides Alvarez Dom&iacute;nguez,<SUP>2</SUP> Dr. Braulio Lima Santana<SUP>3</SUP> y T&eacute;c. Lina Garc&iacute;a Lara<SUP>4</sup></P></I><OL>   <SUP><I>      </i></sup>    <LI>Licenciada en Bioqu&iacute;mica. Investigadora Agregada. INA y CV. </LI>       <LI>Licenciado en Biolog&iacute;a. Hospital Clinicoquir&uacute;rgico "Hermanos Ameijeiras".</LI>       <LI>Especialista de II Grado en Angiolog&iacute;a. INA y CV.</LI>       <LI>T&eacute;cnica en Qu&iacute;mica Anal&iacute;tica.</LI>    </OL>      <H4>RESUMEN </H4>       <P>Se procesaron datos de 90 personas de ambos sexos, quienes fueron divididas    en 3 grupos para su estudio. Se clasificaron en an&eacute;rgicos o reactivos    de acuerdo con el resultado obtenido al realizarles las pruebas de hipersensibilidad    retardada. En el grupo an&eacute;rgico se estudiaron 30 pacientes diab&eacute;ticos    con edades entre los 37 y 80 a&ntilde;os. En el grupo reactivo se estudiaron    igualmente 30 pacientes diab&eacute;ticos entre 50 y 74 a&ntilde;os de edad    y el grupo control, entre los 21 y 57 a&ntilde;os. Se les determin&oacute; la    concentraci&oacute;n s&eacute;rica de cinc y las pruebas de hipersensibilidad    retardada. Al realizar la prueba t de Student se encontraron diferencias significativas    entre los grupos an&eacute;rgicos-control y an&eacute;rgico-reactivo y no entre    reactivo-control. Se concluye que los pacientes que resultaron an&eacute;rgicos    a las pruebas de hipersensibilidad retardada tienen menores concentraciones    de cinc en suero que los que resultaron reactivos y que el grupo control, esto    pudiera estar relacionado con su disminuido sistema inmune.</P>     <P><I>Palabras clave: </i>HIPERSENSIBILIDAD RETARDADA/diagn&oacute;stico; CINC/sangre;    DIABETES MELLITUS.</P>   <H4>INTRODUCCION</H4>       ]]></body>
<body><![CDATA[<P>La hipersensibilidad celular es una reacci&oacute;n inmunol&oacute;gica que depende de la actividad de los linfocitos sensibilizados.1 El ejemplo cl&aacute;sico m&aacute;s conocido es la prueba de Mantoux, que se obtiene inyectando tuberculina en la piel de un individuo en el que una infecci&oacute;n previa de la micobacteria haya inducido un estado de inmunidad celular.2</P>       <P>Este tipo de reacci&oacute;n se basa en la interacci&oacute;n del ant&iacute;geno con las c&eacute;lulas T sensibilizadas. Son liberadas varias sustancias solubles denominadas linfoquinas, responsables de los s&iacute;ntomas de la t&iacute;pica reacci&oacute;n de hipersensibilidad3 que se caracteriza por una infiltraci&oacute;n, primero de polinucleares y luego, con fagocitos mononucleares y linfocitos.</P>       <P>El papel del cinc y su metabolsimo en la funci&oacute;n inmune han llamado la atenci&oacute;n en los &uacute;ltimos a&ntilde;os.4,5 Las evidencias indican que el cinc puede ejercer una influencia regulatoria sobre aspectos espec&iacute;ficos de la respuesta inmune tanto <I>in vivo </I>como <I>in vitro, </I>adem&aacute;s de su conocido papel en la cicatrizaci&oacute;n de las heridas.6-9</P>       <P>En numerosos estudios reportados en la literatura se han encontrado alteraciones del cinc en pacientes con diabetes mellitus,10 las cuales han sido relacionadas con la presencia de complicaciones diab&eacute;ticas. Adem&aacute;s, se conoce que la deficiencia de cinc empeora la inmunidad celular tanto en animales de experimentaci&oacute;n como en el hombre.11</P>       <P>En nuestro medio encontramos una alta incidencia de pacientes que sufren diabetes mellitus, muchos de estos casos presentan complicaciones cl&iacute;nicas severas debido a su susceptibilidad a padecer procesos s&eacute;pticos. Es por ello que en este trabajo nos propusimos conocer las diferencias que podr&iacute;an existir en los niveles s&eacute;ricos de cinc en pacientes an&eacute;rgicos o reactivos de acuerdo con su respuesta a las pruebas d&eacute;rmicas (PHR), pues &eacute;sta nos da una idea del mecanismo de defensa, lo cual se corrobora al comparar ambos grupos con el control.</P>   <H4>MATERIAL Y METODO</H4>       <P>Procesamos datos de 90 personas de ambos sexos, los dividimos en 3 grupos para su estudio: an&eacute;rgico, reactivo y control. En los 2 primeros grupos estudiamos 60 pacientes diab&eacute;ticos que padec&iacute;an de macroangiopat&iacute;a. El rango de edades se encontraba comprendida entre los 37 y 80 a&ntilde;os. El grupo control const&oacute; de 30 personas de ambos sexos con edades entre los 21 y 57 a&ntilde;os.</P>       <P>Agrupamos pacientes seg&uacute;n el resultado obtenido al realizarles las pruebas de hipersensibilidad retardada (PHR). A los 3 grupos se les determin&oacute; la concentraci&oacute;n s&eacute;rica de cinc. Las PHR se realizaron al inyectar los siguientes ant&iacute;genos en la piel de cada paciente: tuberculina PPD-RT 23, candidina y tricofitina, ambas diluidas 1:100 y estreptoquinasa 500 m/mL.12 </P>       <P>La reacci&oacute;n positiva se caracteriza por eritema e induraci&oacute;n mayor de 5 mm de di&aacute;metro que indican un estado de sensibilizaci&oacute;n y se clasifica el paciente como reactivo. Una reacci&oacute;n negativa o menor de 5 mm de di&aacute;metro demuestra que el individuo no est&aacute; sensibilizado al ant&iacute;geno y, por consiguiente, es clasificado como an&eacute;rgico. </P>       <P>La determinaci&oacute;n s&eacute;rica de cinc se realiz&oacute; seg&uacute;n una modificaci&oacute;n de la t&eacute;cnica de Paschen, Seppo y Lewis.13-15 </P>       <P>Se tomaron 5 mL de sangre venosa sin anticoagulante, y se colocaron en un ba&ntilde;o de mar&iacute;a a 37 oC por espacio de 2 horas para que ocurriera la retracci&oacute;n del co&aacute;gulo, pasado ese tiempo se centrifugaron a 2 500 rpm durante 10 minutos a temperatura ambiente y se extrajo 1 mL de suero, al cual se le adicion&oacute; agua desionizada hasta obtener una diluci&oacute;n de 1:10, al igual que el suero control (seronormtm) y las soluciones est&aacute;ndares. Las lecturas fueron realizadas en un espectrofot&oacute;metro de absorci&oacute;n at&oacute;mica a una longitud de onda de 213 nm.</P>   <H4>RESULTADOS</H4>       ]]></body>
<body><![CDATA[<P>En la tabla 1 se muestran el promedio, desviaci&oacute;n est&aacute;ndar, valores m&iacute;nimos y m&aacute;ximos de cinc para los 3 grupos en cuesti&oacute;n. Las medias obtenidas para los grupos reactivos y control son muy similares; sin embargo, la del grupo an&eacute;rgico es mucho m&aacute;s peque&ntilde;a a simple vista</P>       <P>Partiendo de estos datos decidimos realizar un an&aacute;lisis estad&iacute;stico en el cual pusimos a prueba la hip&oacute;tesis de que exist&iacute;an diferencias entre los grupos en cuanto a cinc, para lo cual empleamos una prueba t de Student (tabla 2). El valor de t cuando se comparan ambos grupos de pacientes indica una diferencia altamente significativa entre ellos. Tambi&eacute;n hubo diferencias entre el grupo an&eacute;rgico y el control, pero al poner a prueba el grupo reactivo y el control no se obtienen diferencias entre sus medias.</P>       <P>Se realiz&oacute; un an&aacute;lisis de correlaci&oacute;n entre la edad y los valores de cinc, tanto para los grupos de pacientes como para el grupo control.</P>       <P>En la figura 1 se muestra la correlaci&oacute;n entre la edad y los valores de cinc para el grupo control. Existe una asociaci&oacute;n negativa entre ambos par&aacute;metros, se obtiene una recta lineal con un coeficiente de correlaci&oacute;n de -0,12 y un nivel de significaci&oacute;n menor de 0,001.</P>       <P>Al realizar el estudio de correlaci&oacute;n en el grupo de diab&eacute;ticos que resultaron ser an&eacute;rgicos a las PHR, tambi&eacute;n obtuvimos una asociaci&oacute;n negativa con un coeficiente de correlaci&oacute;n de -0,31 y un nivel de significaci&oacute;n menor de 0,001 (figura 2).</P>       <P>Cuando se realiza el an&aacute;lisis de correlaci&oacute;n entre ambos par&aacute;metros en id&eacute;nticas condiciones para el grupo de diab&eacute;ticos que resultaron reactivos a las pruebas d&eacute;rmicas (figura 3), se obtiene una recta lineal con un valor de r = -0,22. Las rectas son lineales, indican una asociaci&oacute;n negativa entre los par&aacute;metros estudiados.</P>       <P>Seg&uacute;n se mostr&oacute; en las figuras 1, 2 y 3, cuando la edad de los individuos aumenta, los valores de cinc en suero disminuyen, independientemente de que sean diab&eacute;ticos o no.</P>   <H4>DISCUSION</H4>       <P>La inmunidad mediada por c&eacute;lulas, adem&aacute;s de intervenir en la hipersensibilidad tard&iacute;a, tiene un papel preponderante en la defensa de los individuos contra las infecciones, en el rechazo de injertos y en c&eacute;lulas tumorales. Sin embargo, puede tener efectos nocivos, como es el caso de las enfermedades autoinmunes.</P>       <P>En diferentes estudios sobre la hipersensibilidad cut&aacute;nea realizados tanto en el hombre como en animales de experimentaci&oacute;n se han utilizado numerosas sustancias antig&eacute;nicas, como la candidina, tuberculina, etc., por suponer una sensibilizaci&oacute;n previa con estos ant&iacute;genos.16,17 En diferentes estudios se plantea la importancia de realizar las PHR pues son consideradas como indicadores de los mecanismos de defensa en sepsis y en diab&eacute;ticos.8,19</P>       <P>Corman20 y Chandra21 encontraron, en animales de experimentaci&oacute;n, que el cinc parece tener un efecto espec&iacute;fico sobre la respuesta inmune. Observaron que una excesiva ingesta de cinc, trae por consiguiente una inmunidad deprimida y una incrementada susceptibilidad a las infecciones. Las PHR se encontraron disminuidas, esto indica una empeorada funci&oacute;n de las c&eacute;lulas T, lo cual pod&iacute;a ser restituido por suplementos de cinc.</P>       ]]></body>
<body><![CDATA[<P>En nuestro estudio encontramos que los pacientes diab&eacute;ticos que resultaron an&eacute;rgicos a las pruebas d&eacute;rmicas tienen menores concentraciones de cinc en suero que los individuos normales y que los pacientes que resultaron reactivos. Los pacientes an&eacute;rgicos tienen disminuido su sistema inmune y son m&aacute;s susceptible a desarrollar procesos s&eacute;pticos que los pacientes reactivos. Por tanto, sugerimos que los pacientes diab&eacute;ticos que resultan an&eacute;rgicos tienen disminuido su sistema inmune y a su vez la frecuencia a padecer sepsis puede estar dada por los bajos niveles de cinc en suero, lo cual pudiera ser dependiente del tiempo de evoluci&oacute;n de la enfermedad y del control glic&eacute;mico. Adem&aacute;s de estos factores se adiciona la edad, pues que ha quedado demostrado en &eacute;ste y otros trabajos22 que existe una relaci&oacute;n inversa entre la edad y el contenido de cinc.</P>   <H4>REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS</H4>   <OL>          <!-- ref --><LI>Berneti B, Bloom B. Reactions in vivo and in vitro produced by a soluble substance asociated with delayed hypersensitivity. Proc Nath Acad Sci USA 1968;59(3):756. </LI>    <!-- ref --><LI>Roitt I. Inmunolog&iacute;a esencial. 4a. ed. La Habana: Editorial Cient&iacute;fico-T&eacute;cnica, 1982:228. </LI>    <!-- ref --><LI>Gac&iacute;a-Lloret M. Cytokines and their role as health and disease mediators. Bol Med Hosp Infant Mex 1990;47(12):797. </LI>    <!-- ref --><LI>Creat T. Zinc and the immune system. Ann Med Interne 1990;141(5):447. </LI>    <!-- ref --><LI>Fabris N. The role of zinc in neuroendocrine immune interactions during agign. Ann NY Acad Sci 1991;621(4):314. </LI>    <!-- ref --><LI>Pekarek R, Sandstead H, Jacob R, Barcome D. Abnormal cellular immune responses during acquired zinc deficiency. Am J Clin Nutr 1979;32(7):1466. </LI>    <!-- ref --><LI>Blazsek I, Mathe G. Zinc and imunity. Biomed Pharmacother 1984;32(2):187. </LI>    <!-- ref --><LI>Chandra R, Dayton D. Trace element regulation of imunity and infection. Nutr Res 1982;2(6):721. </LI>    <!-- ref --><LI>Ranmat A. The effect of zinc deficiency on wound healing. Br J Surg 1974;61(4):271. </LI>    <!-- ref --><LI>Mooradian A, Morley J. Micronutrient status in Diabetes Mellitus. Am J Clin Nutr 1987;45(5):377. </LI>    <!-- ref --><LI>Chapil M, Stankovs L, Zuroski IV C, Zuroski III C. Inhibition of some functions of polymorphonuclear leukocytes by in vitro zinc. J Lab Clin Med 1977;89(1):135. </LI>    <!-- ref --><LI>Mah&iacute;a V, Lima S, Fern&aacute;ndez M, Velazco A. Efecto de la cirug&iacute;a sobre el sistema inmune en diab&eacute;ticos. Rev Cubana Cir 1988;27(5):5. </LI>    <!-- ref --><LI>Paschen K. Determination in a single serum dilution by A.A.S. Clin Chim Acta 1971;35(2):401. </LI>    <!-- ref --><LI>Seppo S. Improved direct determinations of copper and zinc in single serum dilution by atomic spectrophotometry. Atomic Spectroscopy 1984;5(1):4. </LI>    <!-- ref --><LI>Lewis A. Analysis of blood serum for essencial metals by simultaneous multielement atomic absorption spectrometry. Anal Chem 1984;56(7):1066. </LI>    <!-- ref --><LI>Pietsch J, Meakins J, Mc Lean L. Delayed hypersensitivity response. Surgery 1977;82(3):349. </LI>    <!-- ref --><LI>Ricci M. T cells, cytokines, IgE and allergic inflammation. Int Arch Allergy Immunol 1992;99(2-4):165. </LI>    <!-- ref --><LI>Sorell L. Pruebas de hipersensibilidad retardada <I>in vivo </I>en sepsis post-operatoria. Rev Cubana Cir 1982;21(4):321. </LI>    <!-- ref --><LI>Meakins J, Pietsch J, Bubenick O, Kelly R, Rode H, Gordon L, et al. Delayed hypersensitivity: Indicator ot host defenses in sepsis. Ann Surg 1977;186(3):241. </LI>    <!-- ref --><LI>Corman L. The relationship between nutrition infection and immunity. Med Clin North Am 1985;69(4):759. </LI>    <!-- ref --><LI>Chandra R. Nutrition, immunity and infection. Lancet 1983;1(8326):688. </LI>    <!-- ref --><LI>Mah&iacute;a V, Garc&iacute;a L. Determinaci&oacute;n de la concentraci&oacute;n s&eacute;rica de cinc y su relaci&oacute;n con la edad. Rev Cubana Med 1987;26(4):404. </LI>    </OL>          <P>Recibido: 21 de abril de 1994. Aprobado: 20 de junio de 1994.</P>       <P>Lic. <I>Miriam Mah&iacute;a Vilas. </I>Instituto Nacional de Angiolog&iacute;a y Cirug&iacute;a Vascular, Calzada del Cerro No. 1551, municipio Cerro, Ciudad de La Habana, Cuba.</P>         ]]></body><back>
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