RESUMEN

INTRODUCCION

El metabolismo producido por los niveles tóxicos de salicilato produce múltiples reacciones bioquímicas. Este efecto incluye o está directamente relacionado con la estimulación del sistema nervioso central (SNC) (centro respiratorio); incluye la inhibición de la fosforilación oxidativa de las enzimas del ciclo de Krebs, inhibición del metabolismo de los aminoácidos interfiere con los procesos hemostáticos, glucolisis tisular.

Este efecto bioquímico trae consigo manifestaciones clínicas como acidosis metabólica, alcalosis respiratoria, pérdida de electrolitos, etc. Los niveles de ácido láctico acelerado, incremento de glucosa, incremento de los niveles de cetonas, amináciduria por la inhibición de la aminotransferasa, acidosis metabólica, etcétera.

En este trabajo el objetivo principal fue la dosificación y validación de ASA y derivados en orina. Este método anteriormente se realizaba como un método cualitativo (Gerhard's, 1961). En este estudio el parámetro en cuestión es dosificable (cuantificable). El principio del método está basado en la formación de un complejo de color rojo bordeau (púrpura) por la reacción del o-acetil salicílico ácido de peso molecular 180,15 g/mol y derivados con el ClFe (cloruro férrico).

No obstante este método es válido después de realizar pruebas de presunción como: Imbert (C. cetónicos) y fenoles (Forrest y colaboradores); ambas técnicas deberán ser (-), a las muestras conjuntamente con estas pruebas se les realizó ASA y derivados (cualitativo); Nathelson (nitrato férrico) (figura 1). Según la bibliografía se plantea que los salicilatos en sangre su rango es de: (tabla 1).

FIGURA 1

MATERIAL Y METODO

REACTIVOS:

• Acido perclórico.
• HCL.
• Acido nítrico.
• Cl₃Fe (cloruro férrico).
• Nitrato férrico.
• Amoníaco.
• Acido acetil salicílico.
• Acido Sulfúrico.

SOLUCIONES:

]]> Nitrato férrico al 1 % en ácido nítrico.
1. Imbert.
2. Cl₃Fe (5 mL de ClFe 10 % en H₂O; 40 mL de ácido perclórico al 20 %; 50 mL de ácido nítrico al 20 %)
3. ClFe al 10 % en agua.
4. Acido nítrico (0,07 n) (4,69 mL de ácido nítrico [c] llevar a 1 L (H₂O).
5. Patrón (ácido acetil salicílico)

• 12,5 mg % (12,5 mg de ASA en 100 ML de H₂O)
• 25 mg % (25 mg de ASA en 100 mL de H₂O)
• 50 mg % (50 mg de ASA en 100 mL de H₂O)
]]> 100 mg % (100 mg de ASA en 100 mL de H₂O)

METODO

1. Poner en baño hirviente y añadir HCl 1 N durante 20 minutos.

Muestra® 6,0 mL ¬ 0,1 mL HCI 1N.

Control ® 3,0 mL ¬ 0,05 mL HCl 1N.

Blanco ® 3,0 mL ¬ 0,05 mL HCl 1N.

2. Esperar 5 minutos.
3. Retirar y filtrar las muestras; se puede centrifugar 5 minutos a 4 000 rpm.
4. Realizar Imbert a todas las muestras:
]]>
• 1 mL de orina (filtrado) se le añaden 3 gotas de reactivo Imbert.
• Mezclar.
• Añadir 0,5 mL de amoníaco concentrado por las paredes lentamente.
• (+) formación de anillo interfásico (violeta); (-) no formación.
1. Detección de compuestos fenotiacínicos:
1. Añadir a 2 mL de orina 2 gotas de ácido sulfúrico y 2 gotas de Cl₃Fe al 10 % en agua (ver resultados abajo).
]]> Añadir a 1 mL de orina (filtrada) 1 mL de solución Cl₃Fe; para compuestos fenólicos.
2. Mezclar.
• (+) matices de rosado a púrpura.
• (-) rosado tenue, de ser negativo continuar como dice la técnica.
1. Detección de salicilato cualitativo (específica)
]]> Añadir a 100 mL de orina (filtrada) 1 gota de nitrato férrico al 1 % en ácido nítrico 0,07 N, esperar 3 minutos.
(+) color púrpura (débil, moderado, elevado)

(-) color carmelita o carne débil.

1. Modificación de Gerhard's (1961).

Variables	Volumen	Cl3-Fe al 10 % (H2O)
Blanco	1 mL (H2O)	0,5 mL
Control (500 mg %) dil. 1/10	]]> 1 mL	0,5 mL
Muestra (1ra. micción)	1 mL	0,5 mL

2. Mezclar.
3. Incubar a temperatura ambiente 10 minutos.
4. Lectura inmediata l = 525, K= =55,517, B= -0,3528
Nota:- Límite máximo de concentración detectable:

100 mg/dL - Abs= 2,180

Estabilidad del complejo: 20 minutos.

RESULTADOS

Como resultados obtuvimos que a partir de un estudio poblacional en el cual se analizaron 131 casos de diferentes edades, sexo y raza, la media aritmética (X) y desviación estándard (DE) respectivamente fueron 22,95 mg/dL y 10,70, el coeficiente de variación (CV) para la precisión de 4,7 % y para la reproducibilidad de la muestra control o pool conservado en HCl 1N de 4,1 %, una sensibilidad de 2,04 mg/dL la recuperación alrededor del 100 % y un rango de referencia normal sin dosis de administración inferior a 44 mg/dL. Por otra parte al estudiar 20 casos pediátricos voluntarios a los cuales se le administró una dosis diaria de aspirina (ASA) 65 mg/kg de peso, observamos que el rango terapéutico en orina de este medicamento es inferior a 70 mg/dL y por último para 10 casos de niños intoxicados por salicilatos (ASA) el rango arrojado fue superior a 70 mg/dL (tabla 2). ]]> TABLA 2. Rango terapéutico y tóxico

Casos estudiados 20 (voluntarios)
Población	Dif. edades, sexo, raza
Dosis diaria	65 mg/kg
Media aritmética(X)	40,02 mg/dL
Desviación estándard
DE	15,1
Rango teapéutico	Valor < 70 mg/dL
Casos estudiados 10
Rango tóxico	]]> Valor > 70 mg/dL

DISCUSION

Esta investigación demostró después de haber realizado estudios previos al método de análisis instrumental, precisión, reproducibilidad, sensibilidad, recuperación y estando todos estos parámetros dentro de las normas estadísticas fijadas, que el rango terapéutico y tóxico en orina de este medicamento es el resultado concluyente del objetivo principal de este trabajo.

SUMMARY

131 cases of children of different ages, sex, and race, apparently sound, coming from the outpatient department of the "Juan Manuel Márquez" Pediatric Teaching Hospital, were studied aimed at knowing basal concentrations of salicylates in urine. 20 voluntary cases were studied later to establish reference values, and lo cases of children with intoxication due to salicylate were processed so as to determine the toxic range of this parameter in urine.

Key words: ASPIRIN/urine; REFERENCE VALUES; SALICYLATES/poisoning; SALICYLATES/urine.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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6. Samuel. Salicilato. Microtécnicas de química. Barcelona: Toray, 1964:427-9.
7. Wayne R, Snodgrass MD. Salicylate toxicity. Pediatr Clin North Am. 1986;33(2):381-9.
Recibido: 30 de octubre de 1995. Aprobado: 21 de marzo de 1996. ]]> Dr. Francisco Martínez Cruz. Calle 43, no. 18024, entre 180 y 190, apto 3. Lisa, municipio Marianao, Ciudad de La Habana, Cuba.
1. Licenciado en Bioquímica.
]]> 1982 65,703-705,708 Fluka, Chemika 1990 32 1983 12,13,19 1969 68 1987 88 1964 427-9 1986 33 2 2 381-9