Trabajos de Revisión

Enzimas que participan como barreras fisiológicas para eliminar los radicales libres: II. Catalasa

RESUMEN

Palabras clave: RADICALES LIBRES; CATALASA/química; ESPECIES DE OXIGENO REACTIVO.

INTRODUCCION

Durante los procesos biológicos y en el constante intercambio con el medio, se generan especies químicas conocidas como radicales libres, que se caracterizan por presentar un electrón desapareado y por ser muy reactivas. De todos los radicales resultan de gran interés las especies reactivas derivadas del oxígeno (EROS) debido a la estructura birradicálica de esta molécula y al gran número de procesos que las generan y en los que pueden verse involucradas.

Las principales EROS son: el anión superóxido (O₂), el radical hidroxilo (OH⁺), el oxígeno singlete y el peróxido de hidrógeno (H₂O₂). Estas especies radicálicas están implicadas en el daño celular de forma tal que las agresiones oxidantes pueden dirigirse hacia la carcinogénesis, enfermedades inflamatorias, senectud celular y enfermedades neurodegenerativas, entre otros procesos patológicos.¹

En el organismo existe un sistema de protección antioxidante formado por enzimas y compuestos de bajo peso molecular. Una de las enzimas que interviene en la protección y, en consecuencia, en el mantenimiento del balance oxidante/antioxidante es la catalasa (CAT).

CARACTERISTICAS ESTRUCTURALES

La catalasa (peróxido de hidrógeno: peróxido de hidrógeno oxidorreductasa, EC 1.11.1.6) es una de las enzimas más abundantes en la naturaleza y se encuentra ampliamente distribuida en el organismo humano, aunque su actividad varía en dependencia del tejido; ésta resulta más elevada en el hígado y los riñones, más baja en el tejido conectivo y los epitelios, y prácticamente nula en el tejido nervioso. A nivel celular se localiza en las mitocondrias y los peroxisomas, excepto en los eritrocitos, donde se encuentra en el citosol.² Esta enzima es una metaloproteína tetramérica, cuyo peso molecular se encuentra en el rango de 210-280 kD. Consta de 4 subunidades idénticas que se mantienen unidas por interacciones no covalentes. Cada subunidad contiene un grupo prostético de protoporfirina IX y el contenido protohémico y el de hierro representan un 1,1 % y 0,09 % respectivamente del peso molecular total de la enzima.³

En algunas especies la CAT contiene moléculas de nicotinamín adenín dinucleótido fosfatado en su forma reducida (NADPH) ligadas estrechamente a la enzima; así se ha demostrado que la CAT humana y la de res están ligadas a 4 moléculas de NADPH, 1 en cada subunidad y que no existe interacción directa entre el grupo hemo y el NADPH.⁴ En la figura aparece la representación de una subunidad de la enzima.

El NADPH unido a la enzima no está involucrado en su actividad catalítica o peroxidativa. Esta molécula puede intervenir en la prevención y reversión parcial de la inactivación de la CAT por su propio sustrato tóxico y estabiliza a la enzima por tener un efecto alostérico sobre su conformación. Además, la CAT constituye un reservorio de NADPH, lo cual juega un importante papel durante el estrés oxidativo.⁵

FUNCION ENZIMATICA ]]> La CAT como parte del sistema antioxidante está involucrada en la destrucción del H₂O₂ generado durante el metabolismo celular. Esta enzima se caracteriza por su alta capacidad de reacción pero relativamente poca afinidad por el sustrato. Presenta 2 funciones: la catalítica y la peroxidativa. Ambas se pueden representar por la ecuación:

H₂O₂ + H₂R ----------® 2H₂O + R

sustrato donador CAT

La reacción general entraña la reducción del sustrato tomando los átomos de hidrógeno aportados por el donador, y los productos finales serían el sustrato reducido y el donador oxidado.

En la función catalítica, el donador es otra molécula de H₂O₂. Esta función sólo puede ser realizada por la enzima en su forma tetramérica.⁶

H₂O₂ + H₂O₂ -----® 2H₂O + +O₂

En la reacción peroxidativa la enzima puede utilizar como donadores de hidrógeno al metanol, etanol, ácido fórmico, fenol y formaldehído. ⁷ Esta función se puede realizar con monómeros, dímeros y tetrámeros.⁶

La actividad de la CAT puede ser inhibida por el cianuro, la azida, el sulfuro, la hidroxilamina, el paracetamol, la bleomicina, la adriamicina, la benzidina y el paraquat.²

IMPORTANCIA BIOMEDICA DE LA CATALASA

La CAT ha sido ampliamente estudiada en relación con su participación en numerosos procesos patológicos de gran importancia en las investigaciones biomédicas, y está involucrada tanto en la génesis como en las consecuencias de dichos procesos. ]]> En modelos animales y humanos de isquemia-reperfusión se ha comprobado la participación de las EROS en la producción de los daños que aparecen durante este proceso, así como la modificación de las enzimas antioxidantes, entre las que se encuentra la CAT, y se ha observado que estas modificaciones no se comportan de igual forma en todos los tejidos.

En estudios realizados en riñón, la reperfusión que siguió al daño isquémico provocó una pérdida de proteínas de la matriz de los peroxisomas, con drástico compromiso de las funciones de éstos y descenso significativo de la actividad de CAT. La disminución de la actividad durante la isquemia se debe a la formación de un complejo inactivo, mientras que durante la reperfusión hay inactivación, proteólisis o disminución de la síntesis de la enzima.⁸

En pacientes con insuficiencia renal crónica, principalmente en aquéllos que recibieron tratamiento con diálisis peritoneal y hemodiálisis, se encontró una disminución de las enzimas antioxidantes, entre ellas la CAT, a nivel eritrocitario. Esta disminución pudiera ser uno de los factores que propician la hemólisis debido a la peroxidación lipídica en la membrana celular de los eritrocitos.⁹

El desarrollo de lesiones hemorrágicas en la mucosa intestinal es causado por radicales de oxígeno y la activación de la fosfolipasa A₂. Enzimas antioxidantes como la CAT y las superóxido dismutasas (SOD), así como inhibidores de la fosfolipasa A₂ pueden prevenir los daños causados por la reperfusión intestinal, siempre que el tratamiento se aplique durante la isquemia, pero antes de la reperfusión.¹⁰ Se ha encontrado también una relación causal entre la generación de radicales libres y el daño isquémico de la retina y se comprobó la protección que brindan las SOD y la CAT, las que se recomiendan como posible tratamiento.¹¹

La reperfusión es, sin duda, la forma más efectiva para tratar la isquemia del miocardio, sin embargo, puede causar profundos daños tisulares. La producción miocárdica de EROS que sobrepasa la capacidad neutralizadora de los miocitos es una causa importante de este daño. Hay evidencias de que la isquemia prolongada reduce los mecanismos de defensa contra estas especies reactivas.¹² El pretratamiento con derivados no tóxicos de endotoxinas induce la protección contra el daño y aumenta la actividad de la CAT.¹³

La administración de SOD y CAT reduce la incidencia de depresión de la función contráctil en modelos experimentales, y puede limitar la necrosis si se utilizan en el momento de la reperfusión.¹⁴

Estudios recientes muestran que la CAT y las SOD, administradas de forma independiente durante la reperfusión cardíaca, reducen significativamente la producción de EROS, pero fallan ante la producción de arritmias ventriculares inducidas por la reperfusión . Ambos efectos pueden eliminarse cuando las 2 enzimas se aplican juntas.¹⁵

La acción de la CAT puede suprimir el incremento de CA⁺⁺ intracelular que se produce a través del aumento del H₂O₂ provocado por el daño isquémico a nivel miocárdico.¹⁶

Durante los trasplantes cardíacos tiene lugar una isquemia prolongada seguida de reperfusión con sangre oxigenada, produciéndose un aumento en los niveles de las EROS, lo que trae como consecuencia un desacoplamiento de los procesos de contracción- -excitación a nivel del sarcolema. La CAT y las SOD pueden preservar la función del metabolismo miocárdico durante el trasplante.¹⁷

Se ha encontrado que después de quemaduras severas existe un incremento del catabolismo proteico con la consiguiente disfunción hepática, lo cual puede reducirse administrando enzimas antioxidantes como la CAT.¹⁸ ]]> En afecciones respiratorias como el síndrome de distress respiratorio en adultos, inducido por EROS, se ha encontrado aumento en la actividad de la CAT.¹⁹ En modelos experimentales de inducción de edema pulmonar con aloxano se observó que este compuesto produce daños a nivel endotelial y aumento en los niveles plasmáticos de tromboxano B2 y 6-cetoprostaglandina F1. La CAT previene el aumento de estos compuestos y la acumulación de agua extravascular, reduciendo el daño endotelial y con ello el edema pulmonar.²⁰

Numerosos estudios han relacionado la infertilidad masculina con una disminución de la motilidad de los espermatozoides, lo que parece estar causado por un aumento de especies reactivas, sobre todo de H₂O₂. Este puede ser reducido por acción de la CAT, lo cual se propone como posible tratamiento en estos casos.²¹

Se han realizado estudios que plantean la inducción de proteínas del shock térmico (HSP) como responsables de enfermedades neurodegenerativas como la enfermedad de Alzheimer. La síntesis de HSP es inducida por las EROS y se observa que una exposición a éstas en presencia de enzimas antioxidantes como la CAT y las SOD mejora la supervivencia de las células y disminuye la inducción de HSP.²²

En el tratamiento de pacientes afectados por estas enfermedades neurodegenerativas se utiliza la droga (-) deprenil, que aumenta selectivamente la actividad enzimática de la CAT y las SOD a nivel del cuerpo estriado.²³

En relación con las afecciones tumorales se ha encontrado en pacientes con tumores del tracto gastrointestinal un aumento de la actividad de CAT en los estadios iniciales del proceso. Esta actividad disminuía y llegaba a ser mínima en estadios de metástasis diseminada y caquexia.²⁴

Otros estudios con modelos experimentales han mostrado el importante papel que juegan las EROS en la invasión tumoral y las metástasis y se ha observado que la administración de CAT podía inhibir la formación de metástasis.²⁵

La actividad de las enzimas con propiedades antioxidantes también ha sido estudiada en modelos experimentales animales de enfermedades meta-bólicas como la diabetes mellitus donde se han encontrado disminuidas las SOD y la CAT, disminución que podía ser prevenida por la administración de insulina.²⁶

Estos hallazgos permiten considerar que la participación de los sistemas antioxidantes en el mantenimiento del balance oxidante/antioxidante constituye un elemento esencial para el control de numerosos procesos biológicos cuyas alteraciones pueden originar o ser consecuencia de trastornos somáticos en un individuo.

SUMMARY

Oxygen's reactive species are involved in cellular damage; however, in the organism there is a protection system composed of compounds and antioxidant enzymes that participate in the transformations of such species. The catalase is one of the enzymes involved in the destruction of hydrogen peroxide, generated during cellular metabolism. Its structural characteristics as well as its role in some physiopathologic situations are dealt with in the present article. ]]> Key words: FREE RADICALS; CATALASE/chemistry; REACTIVE OXYGEN SPECIES.

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Dra. Ela M. Céspedes Miranda. Instituto de Ciencias Básicas y Preclínicas "Victoria de Girón". Calle 146 No. 3102, esquina a 31, Reparto Cubanacán, municipio Playa, Ciudad de La Habana, Cuba. ]]> ]]> 1993 13 3 3 75-83 1955 ;7 64 1977 80 199-207 1985 82 1604-8 1984 81 4343-7 1980 633 317-22 1989 91 812-5 1992 15 90-100 1994 66 76-80 1993 21 1376-86 1993 34 2018-22 1992 111 61-9 1991 110 365-9 1991 2 703-20 1993 14 361-70 1992 107 488-93 1993 8 245-8 1991 29 581-3 1992 146 985-9 1992 73 1326-33 1993 16 183-8 1993 242 262-7 1993 40 69-91 1993 38 4-5 1993 30 983-6 1992 41 1053-8