Se estudió la actividad antimicrobiana de diferentes concentraciones de un extracto fluido (etanol al 80 %) de hojas de Schinus terebinthifolius Raddi (copal). Se utilizó una batería mínima de cepas de microorganismos que incluye Staphylococcusaureus, como Gram+ Escherichiacoli y Pseudomonasaeruginosa, como Gram - y la levadura Candida albicans, mediante el método de difusión en agar. Los resultados obtenidos indican que aún a la menor concentración del 1 % se aprecia inhibición del crecimiento de todos los microorganismos y la respuesta se incrementa gradualmente con la concentración hasta el 80 %. Estos resultados contribuyen a respaldar científicamente el uso tradicional de esta planta como antimicrobiano, además de sugerir la elaboración de formas farmacéuticas que permitan ampliar su aplicación.
We studied antimicrobial activity of different concentrations of a fluid extract (80 % ethanol) from leaves of Schinus terebinthifolius Raddi (copal). An small serie of strains of microorganisms was used, including Staphylococcus aureus, e.g. Gram positive, Escherichia coli and Gram negative Pseudomonas aeruginosa, and Candida albicans yeast, by means of agar diffusion method. Results obtained suggest that even in smallest concentration (1 %), growth inhibition of all microorganisms is evident, and response is gradually increased with concentration up to 80 %. These results scientifically support traditional use of this plant as antimicrobial, in addition to suggest processing of pharmaceutical formulations allowing to extend its application.
La especie Schinus terebenthifolius Raddi, denominada comúnmente copal, pertenece a la familia Anacardiaceae, es originaria de América del Sur y se cultiva por la resina de su tronco.1 Está constituidapor arbustos de 3 a 4 m de altura, con ramas alargadas y delgadas; hojas pinnadas, con unos 7 foliolos, oblongos; las flores blancas, pequeñas, y su fruto es rojo de un 1 cm de diámetro.2 Fue introducida en Cuba y se utiliza como sustituto del copal legítimo que es una especie mexicana.3
El uso de la corteza y hojas de esta planta se reporta en la medicina tradicional de diferentes países para tratar dolencias venéreas, inflamación del útero, afecciones del aparato urinario, heridas, diarreas y úlcera gastroduodenal.4 Los estudios farmacológicos con decocciones de la planta han mostrado eficacia como protector de úlceras inducidas experimentalmente.
Se ha reportado la actividad antimicrobiana de un extracto acuoso de hojas de la planta frente a Staphylococcus aureus y Bacillus subtilis y de un extracto fluido (30 %) frente a S. aureus, B.subtilis, E. coli y P. aeruginosa.5
En un ensayo clínico realizado con 100 pacientes aquejadas de cervicitis y vaginitis cérvica crónica, se apreció una mejoría considerada como satisfactoria luego de un tratamiento con un extracto etanólico de la planta aplicado en forma de tapones intravaginales.6
MÉTODOS
Material Vegetal
Se utilizó un extracto fluido de hajas de Schinus terebinthifolius Raddi, preparado con etanol al 80 % por el laboratorio de Fitoquimica de la Facultad de Medicina "Dr. Salvador Allende". Elaborado el 18/11/95, conservado en refrigeración con las siguientes características: pH 5,5; contenido de sólidos totales 7,95 %; densidad de 0,8972; índice de refracción 1,3768 y contenido alcohólico 72 %.
Para evaluar la actividad antimicrobiana se emplearon 7 concentraciones: 80 (extracto fluido sin diluir) 60, 40, 30, 15, 5 y 1 % mediante diluciones del extracto fluido y control negativo con etanol 72 %.
Cepas de microorganismos
Las cepas utilizadas en el ensayo de actividad antimicrobiana son de referencia internacional, depositadas en el American Type Culture Collection (ATCC) y forman parte de una batería mínima de cepas que se emplean para este tipo de estudio7 y que se relacionan a continuación: Staphylococcus aureus (ATCC 15008); Escherichia coli (ATCC 25922); Pseudomonas aeruginosa (ATCC 14207); Candida albicans (ATCC 10231).
Medios de cultivo
Los medios de cultivo empleados fueron medios ricos que permiten el crecimiento vigoroso del microorganismo. Para las bacterias se utilizó Medio Antibiótico No. 1 (Oxold) y para la levadura Medio Sabouraud (Oxold), esterilizados en autoclave a 121 ?C y 1 atmósfera durante 20 min.
Ensayo de actividad antimicrobiana
Se prepararon los precultivos de los microorganismos en el medio líquido correspondiente -Antibiótico No. 1 para las bacterias y Sabouraud para la levadura- dejándolos crecer en agitación (100 rpm) durante 20 a 37 oC. A partir de los precultivos se inocularon los microorganismos en el medio agarizado correspondiente previamentes fundido y mantenido a 45 oC. El inóculo debe permitir un crecimiento en césped con una concentración de 108 cel/mL. ]]>
Luego de la solidificación del medio, se hicieron 3 perforaciones de 1 cm de diámetro en las placas donde se colocaron los 100 m L de las diferentes concentraciones del extracto fluido a evaluar, así como de los controles negativos y positivos, con un total de 10 réplicas por tratamiento para cada m.o.
Las placas se incubaron a37 oC durante 24 h y al cabo de este tiempo se evaluaron los resultados mediante la lectura en milímetros del halo de inhibición de crecimiento de los microorganismos.
RESULTADOS
Los resultados de la evaluación de la actividad antimicrobiana del extracto fluido (preparado en etanol al 80 %) de las hojas de Schinus terebinthifolius Raddi aparecen reflejados en la tabla 1, donde se evidencia una respuesta de inhibición en orden decreciente desde la concentración del 80 % hasta la menor del 1 %, para todos los microorganismos estudiados. Resultó la levadura C. albicans la de mayor halo de inhibición y le continúa en orden la P. aeruginosa, S. aureus y la E.coli. En el caso de la concentración del 1 % el mayor valor registrado fue el del S. aureus.
TABLA 1. Actividad antimicrobiana del extracto fluido de Schinus terebinthifolius Raddi (copal) frente a diferentes microorganismos
Microorganismos Diámetro del halo de inhibición en mm de las diferentes concentraciones del extracto
80 %
60 %
40 %
30 %
15 %
5 %
]]>
1 %
-
S. aureus
23,8
22,3
21,5
20,2
17,6
16,9
16,2
0
E. coli
]]>
23,6
21,0
19,6
18,1
17,6
16,1
12,5
0
P. aeruginosa
24,3
21,5
]]>
20,6
19,1
18,0
16,3
12,7
0
C. albicans
25,3
23,3
22,3
21,4
]]>
19,2
16,8
11,9
0
DISCUSIÓN
Los resultados coinciden con lo reportado sobre la actividad de un extracto fluido (etanol al 30 %) de hojas de la planta frente a las bacterias Gram (+) y Gram (-),6 pero en el estudio con el extracto fluido (etanol al 80 %) la respuesta de halo de inhibición de los microorganismos es mayor y difiere para el caso de la levadura C. albicans donde en el extracto fluido (80 %) mostró una buena respuesta de inhibición y los extractos acuoso y fluido (etanol 30 %), manifestaron carencia de actividad inhibitoria.
Todo lo planteado anteriormente tal vez pudiera explicarse por el uso de etanol al 80 % como menstruo y con ello se posibilite una mayor extracción de material que incremente esta acción farmacológica.
CONCLUSIONES
El extracto fluido (etanol al 80 % de hojas de Schinus terebinthifolius Raddi (copal) presenta actividad anti-microbiana a concentraciones de 80, 60, 40, 30, 15, 5 y 1 % frente a la bacterias Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y la levadura Candida albicans.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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Liogier HA. Plantas medicinales de Puerto Rico y del Caribe. San Juan: Editorial Iberoamericana, 1990:35-7.
Roig JT. Plantas medicinales, aromáticas o venenosas de Cuba. La Habana: Editorial Científico-Técnica, 1988;298-9.
Martínez MJ, Betancourt J, Alonso-González N, Jauregui A. Screening of some Cuban medicinal plants for antimicrobial activity. J Etheropharmacol 1996; 52:171-4.
Wanick MC, Bandeira JA. Revista do Instituto de antibióticos, aeno anti-inflamatoria e cicatrizante da B. sartorum Mart em pacientes portadores de cervicite e cervico vaginites. 12(1/2), Recife. Pp 105-107, 1974.
Verpoorte R, Kos-Kuhck E, Tjin A, Tsol A, Ruigrok CLM, Jong G, et al. Medicinal plants of Surinam. III: Antimicrobially active alkaloids, from aspidosperma excelsum. Planta Méd 1983;48:283-9.
Recibido: 28 de febrero del 2000. Aprobado: 3 de marzo del 2000. Lic. María Julia Martínez Guerra. Instituto Superior de Ciencias Médicas de La Habana. Carvajal s/n, entre A y Agua Dulce, Cerro. Ciudad de La Habana. Cuba.