Lic. Yanier Núñez Figueredo,1Dra. Juana Tillán Capó,2 Téc. Yamilet Vega Hurtado,3 Téc Carmen Carrillo Domínguez,4 Dra.Odila A. Olivares Guerra5 y Téc. Ramona Núñez Gomero6
Se evaluó el efecto antiartrítico inducido por administración subplantar de adyuvante completo de Freund en ratas, de una solución oleosa de jengibre (MVZ) . Los animales fueron sometidos a diferentes tratamientos y se les determinó el porcentaje de inflamación. También se realizó un ensayo de tolerancia para lo cual se emplearon ratones albinos sometidos a un ayuno de 4 h y posteriormente se administró por vía oral 1 mL/20 g de MVZ, se registraron los síntomas tóxicos y se realizó el examen macroscópico de los órganos principales al final del estudio. El MVZ a las dosis ensayadas inhibió la inflamación inducida, la dosis de 6,5 mL/kg de la sustancia de ensayo a los 30 días posteriores a la administración de adyuvante completo de Freund, presentó un efecto antiinflamatorio superior al mostrado por el tenoxicam a la dosis de 2,5 mg/kg. En el ensayo de tolerancia realizado, el MVZ no provocó signos de toxicidad, mortalidad, ni alteraciones macroscópicas de los órganos principales.
Palabras clave: MVZ, artritis, antiinflamatorio, ensayo de tolerancia, adyuvante completo de Freund.
La búsqueda de nuevos principios activos con actividad antiartrítica, obtenidos a partir de productos naturales, es de vital importancia con vistas a incorporar los mismos al tratamiento de diversas enfermedades muy frecuentes en la población actual.
El MVZ es el resultado de la extracción oleosa del rizoma de jengibre. Dicha planta es originaria de Asia tropical , cultivada en las regiones tropicales y subtropicales, de hasta 90 cm, con rizoma horizontal, hojas linear-lanceoladas de 18-28 cm, sentadas acuminadas. Pedúnculos de 15-25 cm; espigas elipsoideas, de 4-6 cm; brácteas suborbiculares a obovadas, vellosas; corola verde-amarillenta, el tubo de 2cm. Entre los usos más significativos conferidos a dicha planta se encuentra su empleo contra la diarrea, vómitos, gastralgia, indigestión, gripe, tos ferina, fiebre, catarro, resfriado, entre otros.1 Se conoce que en la población mexicana, el MVZ ha sido empleado en el tratamiento de diferentes enfermedades tales como la artritis reumatoidea.
La artritis inducida por adyuvante de Freund en ratas es uno de los modelos farmacológicos más comúnmente utilizado para la evaluación de medicamentos efectivos en el tratamiento de esta afección.2-5
El MVZ es un extracto oleoso de Zingiber officinale Roscoe (número de herbario 4595 de la Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomas Roig") elaborado a partir del rizoma de la planta fresca, en una proporción solvente/material vegetal de 1: 0,6. ]]>
| Pérdida por desecación | 0,4 % |
| Peso específico | 0,9095 g/mL |
| Índice de refracción | (40º) 1,462 |
| Cenizas sulfatadas | 0,3 % |
| Índice de acidez | 0,728 |
| Índice de yodo | 0,3 |
| Índice de saponificación | 227,9º |
| Ácidos grasos | 73,4 % |
Adyuvante completo de Freund, DIFCO Laboratories, Detroit, Michigan, EE.UU.
Tenoxicam 25 mg/tabletas, Medicuba. La Habana, Cuba.
Para la evaluación del efecto antiartrítico se emplearon ratas Wistar hembras de 150-200 g de masa corporal y para el ensayo de tolerancia se utilizaron ratones machos de 18-22 g de peso.
Todos los animales fueron extraídos de la colonia de la UCTB Control Biológico del CIDEM y se mantuvieron en un cuarto con temperatura controlada de 22 ± 2 °C, cama con cambio cada 48 h y un ciclo de luz-oscuridad de 12-12 h. La dieta administrada fue ratonina en pelotillas proveniente del Centro de Producción para Animales de Laboratorio (CENPALAB).
Como marcador para la dosificación del MVZ se empleó una cantidad de ácidos grasos. ]]>
Grupo I: tratado con el MVZ 3,25 mL/kg (2,39 g de ácidos grasos/kg).
Grupo II: tratado con el MVZ 6,5 mL/kg (4,8 g de ácidos grasos/kg).
Grupo III: tratado con tenoxicam como control positivo 2,5 mg/kg.
Grupo IV: tratado con agua destilada como control negativo.
El porcentaje de inhibición del edema se calculó según la siguiente fórmula: ]]>
Los resultados obtenidos, en los diferentes ensayos, se expresaron a través de la
media ± desviación estándar. Los mismos se procesaron mediante un análisis de varianza de una vía y posteriormente se realizó una prueba de Duncan con un nivel de significación de p<0,05.9
Fig. 1. Valores de inflamación de la pata administrada con adyuvante completo de Freund.
En la fig. 2 se puede observar que los valores de inflamación de las patas controles aumentaron de manera similar en todos los grupos tratados.
Al grupo de animales a los que no se inoculó adyuvante de Freund se le determinó el aumento de volumen de sus patas conjuntamente con los animales que se encontraban en estudio y no se observaron diferencias significativas entre el volumen de las patas controles de estos últimos y el grupo anterior. Por lo que se puede decir que el aumento de volumen en las patas controles de los animales pertenecientes a los diferentes grupos de tratamiento se debe al aumento del peso de los animales y no a la inducción de la inflamación por administración subplantar en su pata colateral de adyuvante de Freund.
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Fig. 2. Valores de inflamación de la pata control.
En la fig. 3 aparecen reflejados los porcentajes de inhibición de la inflamación en los diferentes grupos durante el período en que los animales fueron tratados. El MVZ a la dosis de 6,5 mL/kg (4,8 gramos de ácidos grasos/kg) mostró un efecto inhibitorio sobre la inflamación que aumentó gradualmente desde el comienzo del tratamiento y al final del mismo el edema se había disminuido en aproximadamente un 50 %, el MVZ a la dosis de 3,25 mL/kg (2,39 gramos de ácidos grasos/kg) disminuyó la inflamación a partir del 3er. día y después del 6to. día la inflamación en la pata afectada se mantuvo constante.
Fig.3. Porcentaje de inhibición de la inflamación inducida por adyuvante completo de Freund en cada uno de los grupos tratados.
! difieren con respecto al MVZ 3,25 mL/kg y tenoxicam 2, mL/kg para p<0,001
f difiere con respecto al tenoxicam 2,5 mL/kg para p<0,001
Y difieren con respecto al tenoxicam 2,5 mL/kg para p<0,05
& difieren con respecto al MVZ 3.25 mL/Kg para p<0,01.
En el 1er. día de tratamiento no existían diferencias significativas entre ninguno de los grupos experimentales, al 3er. día los animales tratados con MVZ 6,5 mL/kg (4,8 gramos de ácidos grasos/kg) presentaron diferencias significativas para p<0,001 con respecto a los tratados con tenoxicam 2,5 mg/kg y MVZ 3,25 mL/kg (2,39 gramos de ácidos grasos/kg); al 6to. día de tratamiento los animales pertenecientes al grupo tratado con tenoxicam presentaron diferencias significativas con los tratados con MVZ a ambas dosis (para p<0,001), ya a los 12 días de tratamiento el MVZ a la dosis de 6,5 mL/kg (4,8 gramos de ácidos grasos/kg) provocó un porcentaje de inhibición de la inflamación significativamente superior para p<0,05 y 0,01 con respecto al tenoxicam y MVZ 2,5 mL/kg (2,39 gramos de ácidos grasos/kg) respectivamente.
Se entienden por enfermedades reumáticas las que atacan al sistema locomotor produciendo dolor, disfunción y alteraciones anatómicas, que afectan principalmente el tejido conectivo (mesenquimático) y en especial su elemento colágeno.
La etiología de los procesos reumáticos es variada, muchas veces desconocida, y todos no son de la misma naturaleza. La artritis reumatoidea es una forma de reumatismo crónico, poliarticular, inflamatorio, simétrico, con graves lesiones anatómicas que llevan a la deformación y anquilosis.
En la artritis reumatoidea, la membrana sinovial de la articulación afectada es el sitio de infiltración de las células mononucleares (linfocitos, células plasmáticas y macrófagos), produciéndose una reacción inflamatoria crónica, en la cual la inmunidad celular juega el rol principal. Las reacciones en el fluido sinovial, por otra parte son características de una respuesta debido a la formación del complejo inmune. Este inmuno complejo, formado por IgG o IgM asociado con el factor reumatoideo sintetizado mayormente por las células plasmáticas de la membrana sinovial, activa el complemento. Los productos de degradación formados inducen la afluencia de leucocitos polimorfonucleares que constituyen la mayor población del exudado.
La fagocitosis del inmuno complejo por los leucocitos polimorfonucleares provoca la liberación de enzimas lisosómicas y no lisosomales, con una activa participación en el fenómeno de la inflamación. Esta afección local debido al inmuno complejo puede ser experimentalmente reproducida, en su esencia, por la reacción de Arthus.10
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En el ensayo de tolerancia realizado al MVZ no se observaron signos de toxicidad. El MVZ a las dosis empleadas respondió de manera satisfactoria a la disminución de la inflamación inducida por adyuvante completo de Freund en ratas. El MVZ puede ser eficaz en el tratamiento de la artritis reumatoidea.
The antiarthritic effect of oily ginger solution (MVZ), induced by subplantar administration of Freund's complete adjuvant in rats, was evaluated. The animals were subjected to different treatments and the inflammation percentage was determined. A tolerance assay was also made with albinic mice that were put on a 4-hour fasting and later were administered 1 mL/20 g of MVZ by oral route. The toxic symptoms were registered and the macroscopic examination of the main organs was made at the end of the study. The MVZ at the assayed doses inhibited the induced inflammation. The dose of 6,5 mL/kg of the assay substance 30 days after the administration of the complete Freund's adjuvant presented an antiinflammatory effect higher than that showed by tenoxicam at doses of 2,5 mg/kg. In the tolerance assay carried out, the MVZ did not produce toxicity signs, mortality, or macroscopic alterations of the main organs.
Key words: MVZ, arthritis, inflammation, tolerance assay, complete Freund's adjuvant.
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Recibido: 7 de enero de 2005. Aprobado: 10 de enero de 2005.
Lic. Yanier Núñez Figueredo. Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos Calle17 No. 6208 e/ 62 y 64 Playa. La Habana, Cuba. e-mail:cinfa@infomed.sld.cu Fax: (537) 33 5556
1 Licenciado en Ciencias Farmacéuticas. Aspirante a investigador.
2 Doctora en Ciencias Veterinarias. Investigadora Auxiliar.
3 Técnico Medio en Procesos Biológicos.
4 Técnico Medio en Farmacia.
5 Doctora en Farmacia. ]]>
6 Técnico Medio en Química.