El organismo causal de la roya naranja Puccinia kuehnii (Krüger) Butler, de la caña de azúcar, se informa por primera vez por Krüger en Java, Indonesia en 1890 (Egan, 1964). En el período 2000-2001 la patología ocasionó pérdidas entre 30 y 40 %, en Australia (Magarey et al., 2014). En el 2007 se notifica la enfermedad en el Hemisferio Occidental; en Cuba se observa por primera vez en el 2008 (Alfonso, 2016) y desde entonces especialistas del Instituto de Investigaciones de la Caña de Azúcar (INICA) estudian sus bases fitopatológicas.
En los estudios del efecto de la temperatura en la germinación del hongo bajo condiciones controladas, se encontró nula germinación de las uredosporas con diferentes afectaciones, por lo que no inducían infección a muestras inoculadas, problema que dio origen a esta investigación.
Organismos fungosos de varios géneros han sido reportados asociados a numerosas especies de hongos fitopatógenos en condiciones naturales (Egan, 1964; Koike et al., 1979; Sandoval, 1981 y 1986). Los hongos Cladosporium uredinicola y Fusarium sp se reportan sobre pústulas de roya parda de la caña de azúcar (Sandoval, 1988). En Guatemala, se informa la presencia del género Cladosporium sp. sobre el agente causal de roya blanca en crisantemo (Álvarez et al., 2015).
El trabajo inicial se realizó en el laboratorio de Fitopatología de la Estación Territorial de Investigaciones de la Caña de Azúcar (ETICA) Oriente Sur. Una vez obtenidos los aislamientos, se enviaron muestras al laboratorio de Micología de Sanidad Vegetal Provincial en Santiago de Cuba para clasificar, certificar y corroborar los resultados.
Se analizaron muestras de hojas de caña de azúcar del cultivar B80250 de semilla registrada, de la Unidad Empresarial de Base (UEB) América Libre, municipio Contramaestre, provincia Santiago de Cuba afectadas por roya naranja. Se constató con el estereomicroscopio, la presencia de micelios fungosos color verde-olivo, blancos algodonosos y pardo oscuro, inusualmente observados sobre uredosporas de roya naranja. Una asada de uredosporas se colocó en portaobjetos, con lactofenol como líquido de montaje, para su observación microscópica. La clasificación del género Puccinia se realizó con la utilización de las claves para la identificación de hongos fitopatógenos en caña de azúcar (López et al.,1998). Se observó el color, la forma, y la existencia o no de engrosamiento apical para la identificación de la especie según Arias et al., 2015.
Se aplicó el Software ImageJ para realizar las mediciones de las uredosporas de roya naranja y los microorganismos creciendo sobre estas. Porciones de uredosporas fueron colocadas en cámaras húmedas y en agar agua. De los crecimientos fúngicos obtenidos se realizaron pases a los medios de cultivos Agar Papa Dextrosa (PDA) y Agar Saboraud Dextrosa (SDA) con el objetivo de determinar las características culturales de los aislamientos y su posterior clasificación.
La clasificación del género Fusarium se realizó según las claves para la identificación de hongos fitopatógenos en caña de azúcar (López et al., 1998). Los géneros Cladosporium y Curvularia se clasificaron con las claves del Instituto Nacional de Micología de Gran Bretaña (David, 1998). Se certificó la presencia de roya naranja y la clasificación de los géneros Cladosporium, Curvularia y Fusarium en el laboratorio de Micología de Sanidad Vegetal Provincial en Santiago de Cuba.
La coloración de las uredosporas de Puccinia kuehnii (Krüger) Butler fue naranja claro, con formas variables: oblongas, en forma de pera y otras elipsoidales, con longitudes y diámetros respectivamente entre 42-47x 25-32 µm. Fue evidente la presencia del engrosamiento apical de la pared (Árias et al., 2015). Se confirmó la lisis de la pared citoplasmática, unido a una desorganización interna del citoplasma de la célula, (Figuras 1 A, B, C). Se evidenció la colonización completa de uredosporas por los crecimientos fúngicos, coloraciones oscuras en el interior de otras y el crecimiento de micelio septado.
En medio de cultivo PDA crecieron aislamientos fúngicos verde aceituna, pardos y blancos algodonosos, adheridos fuertemente a la superficie del medio, que se tornaron más oscuros con el envejecimiento del cultivo.
Con las observaciones microscópicas se comprobó la presencia de conidias, cilíndricas con dos septos (1), fusiformes carente de septos de 6.1410.17 x 4.6-4.7 µm, lo que se ajusta a lo descrito por David (1998), las conidias miden 6-22 x 3-5 µm y se pueden encontrar en cadenas, clasificados como del género Cladosporium (Figura 2).
Se observaron hifas de hialinas a marrón oscuro, y conidias con células subhialinas en los extremos, predominan las de 3 septos, células centrales más grandes y oscuras, con abultamiento pronunciado, clasificados como del género Curvularia sp. Se observaron además conidias septadas de 24 de 12.28 35.20 x 2.04.38 µm con diferentes medidas según la cantidad de septos (Figura 3 A y B), clasificados como del género Fusarium sp. (SEMINIS, 2017).
Se informa por primera en Cuba, la presencia de hongos de los géneros Cladosporium, Curvularia y Fusarium sp. sobre uredosporas de roja naranja Puccinia kuehnii (Krüger) Butler