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Biotecnología Aplicada
On-line version ISSN 1027-2852
Abstract
VALDES, Jorge et al. Incremento de la expresión del Factor de Crecimiento Epidérmico en Saccharomyces cerevisiae mediante la manipulación de las condiciones de cultivo. Biotecnol Apl [online]. 2009, vol.26, n.1, pp. 34-38. ISSN 1027-2852.
El Factor de crecimiento epidérmico humano (FCE-h) es una proteína que posee una potente actividad mitógenica la cual se manifiesta en el incremento la velocidad de cicatrización de heridas y ulceras en diferentes tejidos del cuerpo humano. Durante los últimos años el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) ha estado involucrado en diversos proyectos de terapias novedosas asociadas al uso del FCE-h. Actualmente existe la necesidad de aumentar de forma significativa la capacidad productiva de esta molécula en la misma instalación industrial para dar respuesta a la creciente demanda de este producto. El objetivo central de este trabajo fue el aumento del nivel de expresión de FCE-h mediante la optimización de las condiciones de cultivo. En el siguiente trabajo se estudió la influencia del medio de cultivo, el pH y la temperatura sobre la expresión del Factor de Crecimiento Epidérmico humano (FCE-h). Se logró un aumento de 1.8 veces en el nivel de expresión del FCE-h mediante la adición de 50 mg/L de histidina y leucina respecto al medio base. El medio de cultivo fue optimizado empleando un experimento factorial de superficie de respuesta. Se encontró un óptimo de concentración de extracto de levadura y peptona bacteriológica de 18 y 25 g/L, respectivamente, correspondiéndose con un nivel de expresión máximo de 3.5 mg/g. Este nivel de expresión es el máximo reportado para el FCE-h en levaduras. Por otra parte, se discute como es posible lograr un control de la proteolisis del FCE-h cuando se opera a un pH de 6.5 y una temperatura de 25 °C.
Keywords : Medio de cultivo; optimización; mejora de la expresión; factor de crecimiento epidérmico humano; control de la proteolisis; Saccharomyces cerevisiae.
