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Biotecnología Aplicada
On-line version ISSN 1027-2852
Abstract
HERNANDEZ, Abel et al. Elevada producción y agregación del antígeno de superficie de la hepatitis B en semillas de tabaco transgénico. Biotecnol Apl [online]. 2013, vol.30, n.2, pp. 97-100. ISSN 1027-2852.
El antígeno de superficie de la hepatitis B (AgsHB) se ha producido exitosamente en hojas de tabaco, tubérculos de papa y frutas del banano, pero a muy bajos rendimientos. Se adecuan las semillas de las plantas para la acumulación, el almacenamiento y la preservación de las proteínas recombinantes con interés farmacéutico, incluyendo los antígenos para vacunas profilácticas o terapéuticas. En este trabajo se evaluó la eficacia del promotor tejido específico faseolina para dirigir la expresión del gen del AgsHB en semillas de tabaco. Se diseñaron dos construcciones binarias para sintetizarlo, fusionado o no a la señal de retención en el retículo endoplasmático KDEL. Con cada construcción se transformaron las plantas de tabaco mediante el método de Agrobacterium tumefaciens. El mayor rendimiento (2.2 µg de proteína recombinante por gramo de semilla) se alcanzó en una línea transgénica que portaba el gen del AgsHB sin la fusión de la señal KDEL. El antígeno heterólogo se agregó adecuadamente y se formaron partículas, que se detectaron mediante un ensayo inmunoenzimático basado en un anticuerpo monoclonal que reconoce el epítopo inmunodominante a del AgsHB. El antígeno producido en las semillas sedimentó ligeramente más rápido que el producido en la levadura Pichia pastoris. Las semillas de tabaco que expresan el AgsHB podrían constituir una nueva fuente alternativa para la producción económica de este antígeno.
Keywords : antígeno de superficie de la hepatitis B; promotor faseolina; proteína recombinante; semilla de tabaco.