Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig". Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos

Caracterización y conservación de Bidens alba. (L.) DC. var. radiata (Sch. Bip.) Ballard

Lic. Ester Sánchez Govín,1 Lic. Ida María Leal López,2 Téc. Caridad Carballo Guerra,3 Téc. Diosothys Chávez Figueredo,3 Lic. Madeline Chalala Vázquez4 y Téc. Carlos A. Rodríguez Ferradá5

Resumen

Bidens alba. (L.) DC. var. radiata (Sch. Bip.) Ballard, conocida por nuestra población como romerillo se obtiene de forma silvestre y ha sido utilizada popularmente como antiséptico, diurético y para curar afecciones catarrales y aftas bucales. Recientemente se ha domesticado su cultivo. En el presente trabajo se describen las características morfológicas del material vegetal procedente de parcelas cultivadas así como los siguientes indicadores de calidad: humedad, cenizas totales, sustancias solubles en agua, en etanol y el contenido de polifenoles totales. Se realizó el estudio de envase y almacenamiento de la droga seca durante 1 año en condiciones ambientales. Los resultados obtenidos sirvieron de base para la confección del anteproyecto de especificaciones de calidad de esta especie en las condiciones de Cuba. Todos los indicadores estudiados se encontraron dentro de los límites establecidos para drogas vegetales. La droga seca conservó las características óptimas por un período de tiempo mayor en envases de vidrio. El objetivo de este trabajo fue establecer los métodos para el control de la calidad de la droga seca generalizándolos en todas las dependencias que en Cuba comercializan esta especie medicinal.

DeCS: PLANTAS MEDICINALES; CULTIVOS AGRICOLAS; MEDICINA HERBARIA.

Bidens alba. (L.) DC. var. radiata (Sch. Bip.) Ballard es conocida como romerillo, romerillo blanco, pertenece a las Asteráceas, crece de forma silvestre en todo el país tanto en terrenos yermos o como planta indeseable en los terrenos cultivados.

Estudios fitoquímicos realizados al género Bidens y a la especie como tal han revelado la presencia de fitoesteroles, taninos del tipo catecol, polisacáridos, carotenos y flavonoides, aminas, terpenos, azúcares reductores y compuestos poliacetilénicos.1,2

Se utiliza tradicionalmente como emenagogo en forma de infusión y como expectorante en afecciones catarrales; también se emplea como antiséptico, diurético, digestivo, colerético y para el tratamiento de las aftas bucales y odontalgias. Posee propiedades valoradas experimentalmente como antiulceroso, antifúngico y antibacteriano de la piel y las mucosas.3-5

La gran diversidad de acciones farmacológicas atribuidas y/o comprobadas a Bidens pilosa L., Bidens alba. (L.) DC. var. radiata (Sch. Bip.) Ballard, romerillo; se debe a la variabilidad de compuestos químicos presentes en la misma de ahí que esta especie sea una ventajosa fuente de materia prima para la industria farmacéutica.6

Debido a la óptima introducción al cultivo de esta especie medicinal, realizada recientemente en la Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig" se profundizan los estudios que tratan sobre la estandarización del material vegetal para su comercialización tanto como medicamento herbario o materia prima para la formulación de formas farmacéuticas de uso antiséptico y antiulceroso en Cuba.

Métodos

Se realizaron las descripciones macromorfológicas y micromorfológicas al material vegetal de Bidens alba. (L.) DC. var. radiata (Sch. Bip.) Ballard, procedente de la Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig" ubicada en la Provincia Habana, para ello se efectuaron cortes histológicos de forma manual y observaciones al microscopio. Un ejemplar de esta especie fue registrado con el número 4598 y situado en el herbario de la citada estación.

Las muestras estudiadas estaban constituidas por las partes aéreas del romerillo obtenido de parcelas experimentales donde se utilizaron dos distancias de plantación 90 x 45 cm y 90 x 30 cm y dos fechas de siembra enero y junio; efectuándose 4 cosechas, con frecuencia de 2 meses. El secado se realizó en estufa con recirculación de aire a 40 ºC.

La presencia de diferentes grupos de metabolitos secundarios en la droga seca triturada fue determinada mediante el método de maceración de 10 g de muestra en 100 mL de solvente durante 48 h. Se maceró sucesivamente con 3 solventes de polaridad creciente: éter, alcohol y agua con la finalidad de lograr el agotamiento de la misma.7 También fueron determinados los índices numéricos de calidad tales como humedad, cenizas totales, sustancias solubles en agua, sustancias solubles en etanol al 70 % según las normas cubanas publicadas por el MINSAP en 1992 e internacionales vigentes para drogas vegetales.8 La determinación del porcentaje de polifenoles totales se realizó según técnica espectrofotométrica desarrollada por Lastra y cols. en el año 2000, como sigue: se preparó un extracto acuoso de Bidens pilosa L. a partir de 50 g de droga vegetal macerada durante una hora con etanol al 70 %; posteriormente se agitó a 150 r.p.m. durante 20 min, se filtró a través de una tela, repitiendo este proceso 2 veces con 200 mL de etanol al 70 %. Fueron reunidos los filtrados y concentrados a presión reducida hasta 80 mL aproximadamente. Seguidamente el extracto fue lavado 4 veces con volúmenes de 30 mL de cloroformo y concentrado a presión reducida hasta eliminación del mismo. Se adicionaron 0,18 g de metilparabeno y 0,02 g de propilparabeno previamente disueltos en 3 mL de etanol. Se filtró decalite y se ajustó finalmente el volumen a 100 mL de extracto con agua destilada.

El estudio de almacenamiento de la droga seca se realizó para 3 lotes en condiciones de humedad y temperatura ambiental durante 1 año, en frascos de vidrio, sobres de polietileno de baja densidad (35 micras) y sobres de papel kraft. Se determinó la calidad del material vegetal al inicio del experimento, cada 2 meses y al final del mismo; para ello se empleó una escala sensorial publicada por Triana y cols. en 1989, para la evaluación organoléptica donde el valor más alto se corresponde con la evaluación óptima y a partir del punto intermedio se rechaza el producto y el de los índices numéricos establecidos para las drogas vegetales.

Resultados

Macromorfología: la droga de Bidens alba. es una mezcla de hojas enteras o no, tallos e inflorescencias. Presenta color verde claro y olor característico. Las hojas son opuestas, pecioladas, aserradas, ovales o lanceoladas, con el ápice agudo, de color verde y pueden medir de 3 a 8 cm de largo y de 1,5 a 3,5 cm de ancho. Los tallos son tetragonales de color verde. Las inflorescencias están formadas por cabezuelas blancas y las amarillas presentan corolas tubulares.

Micromorfología: en las hojas se observan células con paredes sinuosas en ambas epidermis, numerosos estomas del tipo anomocítico y la presencia de pelos simples pluricelulares.

El corte transversal de la hoja muestra la epidermis monoestratificada con cutícula fina, pelos simples pluricelulares, parénquima en empalizada y parénquima lagunar.

El corte del tallo muestra la epidermis y en posición subepidérmica, colénquima alternado con parénquima asimilador, esclerénquima agrupado, haces colaterales abiertos y parénquima medular. Se observan cristales de oxalato de calcio.

Polvo: Se observa un fragmento transversal con la epidermis monoestratificada, parénquima en empalizada seguido de parénquima lagunar y un hacecillo conductor, fragmentos de epidermis con abundantes estomas del tipo anomocítico, fragmentos de parénquima en vista frontal y longitudinal, pelos simples uniseriados y pluricelulares largos, tráqueas reticulares y algunos granos de polen esféricos y espinosos.

Secado: el material vegetal se obtuvo con su color verde natural a los 2 días.

Índices numéricos: los resultados de los índices evaluados se muestran en la tabla 1.

Tabla 1. Índices numéricos promedios determinados en Bidens alba. (L.) DC. var. radiata (Sch. Bip.) Ballard (Romerillo)

Lote		Humedad (%)	Cenizas totales (%)	Sust. solubles en agua (%)	Sust. solubles en etanol 70 %	Polifenoles totales (%)
FS: enero, 90 x 30 cm	1ra. cosecha 2da. cosecha 3ra. cosecha 4ta. cosecha	9,12 9,65 6,14 5,25	11,58 9,85 10,8 12,53	19,54 29,32 28,78 28,0	20,50 27,42 26,72 29,33	0,48 0,76 1,14 0,96
FS:junio, 90 x 30 cm	1ra. cosecha 2da. cosecha 3ra. cosecha 4ta. cosecha	5,74 4,56 6,67 5,74	16,57 10,52 10,61 10,54	24,71 15,16 19,65 21,50	19,53 13,26 19,90 19,53	0,26 0,21 1,30 0,98
FS: enero, 90 x 45 cm	1ra. cosecha 2da. cosecha 3ra. cosecha 4ta. cosecha	7,03 11,85 6,32 4,91	11,20 10,30 12,16 12,01	21,68 28,51 27,67 30,49	22,32 28,14 27,41 26,14	0,23 0,85 0,53 0,53
FS: junio, 90 x 45 cm	1ra. cosecha 2da. cosecha 3ra. cosecha 4ta. cosecha	10,44 5,02 5,66 5,79	10,70 15,47 10,24 9,69	22,91 24,57 15,15 16,38	24,2 20,85 12,11 14,48l	0,28 0,46 0,69 1,67
ES		0,03107	0,03197	0,01671	0,2459	0,01816

Leyenda:
FS enero, FS junio: fechas de siembra.
90 x 30 cm, 90 x 45 cm: distancias de plantación.
ES : error estándar de la media.

Los resultados se refieren a los estudios de conservación de la especie durante 1 año.

Los porcentajes de humedad oscilaron en un amplio rango de 4,56 a 11,85 %, todos los casos se encuentran por debajo del 12 % encontrándose dentro de los límites para drogas vegetales. En tanto que las cenizas totales muestran valores desde 9,69 hasta 16,57 %, la mayoría de las muestras se encuentran por debajo de 13 %.

Las sustancias solubles en agua ofrecieron resultados desde 15 hasta 30 % y las sustancias solubles en etanol al 70 %, desde 12 hasta 29 % siguiendo ambas la misma tendencia, al mostrar los mejores y más altos valores para la fecha de siembra en enero en las 2 distancias ensayadas y en las diferentes cosechas efectuadas, con excepción de la primera cosecha de enero de las dos distancias de plantación. Los polifenoles totales mostraron un amplio rango de 0,21 a 1,67 %, coincidiendo los valores más altos para las 3ra. y 4ta. cosechas independientemente de la fecha de siembra o de las distancias ensayadas.

Tamizaje fitoquímico: se observaron la presencia de flavonoides, triterpenos y esteroides, taninos y fenoles, grupos aminos y azúcares.

Conservación: en la tabla 2 se pueden observar los resultados del análisis organoléptico. Los frascos de vidrio resultaron los mejores ya que las muestras mantuvieron las características óptimas durante todo el experimento, en tanto que los sobres de polietileno perdieron totalmente las características de la droga en la 6ta. evaluación (12 meses), resultó el peor envase el sobre de papel kraft, en el cual la muestra experimentó pérdidas en el olor y color desde las primeras evaluaciones.

Tabla 2. Resultados promedios de la evaluación organoléptica en el estudio de conservación de 3 lotes de Bidens alba. (L.) DC. var. radiata (Sch. Bip.) Ballard

Número de Evaluaciones	Color						Olor						Trituración						Insecto
	1a.	2a.	3a.	4a.	5a.	6a.	1a.	2a.	3a.	4a.	5a.	6a.	1a.	2a.	3a.	4a.	5a.	6.a	1a.	2a.	3a.	4a.	5a.	6a.
Frasco de vidrio	5	5	5	5	5	5	5	5	5	5	5	5	5	5	5	5	5	4	5	5	5	5	5	4
Sobre polietileno	5	5	5	5	4	2	5	5	5	5	4	2	5	5	5	5	4	2	5	5	5	4	3	2
Sobre de papel	5	5	5	4	2	-	5	4	4	3	2	-	5	5	5	4	2	-	5	5	4	3	2	-

1. Pérdida total de las características iniciales.
2. Apreciables pérdidas de las características iniciales.
3. Medianos cambios de las características iniciales.
4. Leves cambios de las características iniciales.
5. Se mantienen las características iniciales.

En las figuras 1, 2, 3 y 4 pueden ser observados los comportamientos de los índices numéricos de las muestras en los diferentes envases. De forma general se observó una disminución en los valores de las sustancias solubles en agua, en etanol al 70 % y en el contenido de los polifenoles totales en las sucesivas evaluaciones en todos los envases, sólo pudieron ser evaluados los frascos de vidrio hasta el final del experimento.

Fig. 1. Comportamiento del porcentaje de humedad.

 

Fig. 2. Comportamiento del porcentaje de polifenoles totales.

 

Fig. 3. Comportamiento del porcentaje de sustancias solubles en agua en el estudio de conservación de Bidens alba. (L.) DC. var. radiata (Sch. Bip.) Ballard durante 1 año

 

Fig. 4. Comportamiento del porcentaje de sustancias solubles en etanol al 70 % en el estudio de conservación de Bidens alba. (L.) DC. var. radiata (Sch. Bip.) Ballard durante 1 año

Discusión

Las observaciones macromorfológicas y micromorfológicas para Bidens alba domesticada coinciden con las descripciones realizadas para la droga de procedencia silvestre que aparecen elaboradas por la primera autora de este trabajo en el año 1995, en informe técnico que obra en el CIDEM.

En este estudio sólo se utilizó el secado artificial, que fue el que resultó más eficiente en las pruebas previamente desarrolladas. La presencia de los metabolitos secundarios coincidieron con los determinados para esta especie por Manzini María Eugenia y cols. Informe de Tema. Laboratorio Mario Muñoz.

Los índices numéricos mostraron grandes diferencias en todos los casos, resultando la mejor variante para ambas sustancias solubles la fecha de siembra en enero. Para los polifenoles, las últimas cosechas (la planta con mayor edad) con independencia de la fecha de siembra, ambas distancias ofrecieron buenos resultados por lo que se puede recomendar el més de junio como la mejor fecha de siembra para rendimiento de masa vegetal y la distancia 90 x 30 cm que ahorra más espacio.

En cuanto a las cenizas totales no serían admisibles valores por encima del 13 % que es el valor publicado con frecuencia para drogas vegetales.8

En una evaluación integral de los resultados de la conservación se descartó la utilización de los sobres de papel kraft, en los cuales las muestras mostraron pérdidas de las características óptimas desde los pocos meses de almacenado el material vegetal. Los sobres de polietileno sólo se pueden usar por períodos de 6 meses. Los mejores envases fueron los frascos de vidrio que permitieron una vida de estante de 12 meses sin pérdidas marcadas de las condiciones óptimas del material vegetal.

Finalmente se puede concluir que se obtuvo la droga vegetal de Bidens alba con buena calidad a partir de las mejores variantes de agrotecnia (fecha de siembra junio y distancia de 90 x 30 cm en las 3ra. y 4ta. cosechas). Los frascos de vidrio resultaron los mejores envases para la conservación de la droga seca. Con los resultados de este trabajo se confeccionó el anteproyecto de especificaciones de calidad de la especie medicinal Bidens alba. (L.) DC. var. radiata (Sch. Bip.) Ballard (Romerillo).

Agradecimientos

Los autores agradecen a la Lic. Leticia Fuentes Hernández y a las compañeras María Gamez Guerrero y Miralys Reyes Arias, su colaboración en la realización de este trabajo.

Summary

Bidens alba. (L.) DC. var. radiata (Sch. Bip.) Ballard, known by our population as rosemary, is wildly obtained and it has been popularly used as antiseptic, diuretic and to cure cold and oral aphthae. Its growth has been domesticated recently. The morphological characteristics of the plant material from the cultivated plots as well as the following quality indicators: humidity, total ashes, substances soluble in water and in ethanol, and the content of total polyphenols, are described in this paper.
.s conocida por nuestra población

Subject headings: PLANTS, MEDICINAL; CROPS, AGRICULTURAL; MEDICINE HERBAL.

Referencias bibliográficas

1. Ferdinand B, Maniruddin A, King RM, Harold R. Acetylenic compounds from Bidens graveolens. Phytochemistry1983; 22:5.
   
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3. Roig JT. Plantas Medicinales Aromáticas o Venenosas de Cuba. La Habana: Ed. Científico-Técnica; 1988:1125.
   
4. Álvarez AA. Evaluación de la actividad antiulcerosa de un extracto total y de 3 extractos obtenidos por fraccionamiento fitoquímico de Bidens pilosa L. Rev Cubana Farm 1990;24(2):297-303.
   
5. Álvarez A A. Efecto antiulceroso de una solución viscosa oral a partir de un extracto de Bidens pilosa L. en ratas. Rev Cubana P Med. 1996;1(1):25- 9.
   
6. Lastra B H. Bidens pilosa L. Rev Cubana P Med 2001;(1):28-33.
   
7. Chabra SC, Viso FC, Mshin EN. Phytochemical screeening of Tanzanian medicinal plants. I . J Ethnopharmacol 1984;11:157-79.
   
8. OMS. Métodos de control de calidad de plantas medicinales. Ginebra: OMS; 1992.

Recibido: 19 de mayo de 2003. Aprobado: 23 de junio de 2003.
Lic. Ester Sánchez Govín. Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig". San Antonio de los Baños. Provincia La Habana, Cuba.

1 Licenciada en Ciencias Farmacéuticas. Investigadora Auxiliar.
2 Licenciada en Ciencias Farmacéuticas.
3 Técnico Medio en Tecnología Farmacéutica.
4 Licenciada en Química.
5 Técnico Medio en Agronomía.