Abstract

AGUERO, J.A; SANCHEZ, O; BARRERA, Maritza  and  TOLEDO, J.R. CLONAJE MOLECULAR Y EXPRESIÓN DE UN FRAGMENTO DEL GEN QUE CODIFICA PARA LA PROTEÍNA DEL VIRUS DE LA PESTE PORCINA CLÁSICA, ERNS. Rev Salud Anim. [online]. 2008, vol.30, n.2, pp. 85-92. ISSN 0253-570X.

El virus de la fiebre porcina clásica (CSFV), perteneciente al género Pestivirus de la familia Flaviviridae, es un virus ARN positivo, altamente contagioso capaz de causar una enfermedad fatal caracterizada por fiebre, leucopenia y hemorragia, con considerables pérdidas económicas. Existe una gran demanda de una vacuna marcadora contra CSFV. C, Erns, E1 and E2 son las proteínas estructurales del virus. E2 es el mejor candidato para ser incorporado a una vacuna, mientras Erns resulta entonces un candidato ideal como antígeno en un ensayo de diagnóstico diferencial. En el vector pET28a se subclonó un fragmento sintético del gene que codifica para Erns (codificante para los aa 109-160). El clonaje se monitoreó por análisis de restricción. El gen se expresó como una proteína de fusión a histidina en la cepa BL21(DE3) de E. coli. El polipéptido recombinante formó agregados de aproximadamente 7.9; 15.8; 23.7; 31.6; 39.5; 47.5 y 55.3kDa. La proteína no fue reconocida por anticuerpos contra el virus por Western blot. Con el empleo de la cromatografía de afinidad a iones metálicos se obtuvo un producto recombinante con un 90% de pureza. Más adelante debe ser evaluado el empleo potencial de este antígeno para la detección de anticuerpos contra CSFV.

Keywords : Erns; CSFV; proteína recombinante; IMAC.

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