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Vaccimonitor
On-line version ISSN 1025-0298
Abstract
CLIMENT, Yanet et al. Detección e identificación por PCR de microorganismos causantes de meningoencefalitis bacteriana. Vaccimonitor [online]. 2002, vol.11, n.2, pp. 1-5. ISSN 1025-0298.
Reportamos el empleo de cebadores para la detección e identificación de microorganismos causantes de meningoencefalitis bacteriana (MEB) en 24 muestras de líquido cefalorraquídeo (LCR) y a partir de ADN genómico de cepas de referencia previamente purificado. Se emplearon cebadores generales y específicos derivados del gen 16S ARNr (ARN ribosómico). Los cebadores generales amplificaron en todas las especies bacterianas analizadas: Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae tipo b, Streptococcus sp y Staphylococcus aureus, en una misma banda de 825 pb. Los cebadores específicos solamente amplificaron en el microorganismo del que se derivan, obteniendo bandas de 667, 478 y 253 pb para N. meningitidis, H. influenzae y Streptococcus sp, respectivamente. También se diferenció Streptococcus agalactiae mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR), donde se obtuvo una banda de 478 pb. Al evaluar estos cebadores en muestras clínicas de LCR se constató que hubo una sensibilidad del 100% de las MEB por PCR; la especificidad fue del 100%. Los productos de PCR se analizaron por digestión Hae III, encontrando correspondencia en los patrones de restricción de las muestras clínicas y las cepas de referencia.
Keywords : ARN ribosómico; Bacterias; gen; LCR; MEB; PCR.