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Vaccimonitor
On-line version ISSN 1025-0298
Abstract
IGLESIAS, Nuris et al. Preparación y caracterización de un Material de Referencia de Trabajo de Acetil Colina para determinar Grupos Oacetilo en polisacáridos vacunales. Vaccimonitor [online]. 2003, vol.12, n.1, pp. 18-22. ISSN 1025-0298.
El control de la calidad de los polisacáridos vacunales exige la evaluación del contenido de grupos O-acetilo, que conjuntamente con otros índices, proporciona criterios de la integridad molecular importantes para su inmunogenicidad, como en el caso del polisacárido Vi de Salmonella typhi. El método comúnmente empleado es colorimétrico y requiere de un material de referencia de cloruro de acetil colina para preparar la curva de calibración contra la que se comparan las muestras en estudio. Generalmente, se adquiere el reactivo comercial (sólido) y de éste se prepara la solución de referencia. Esto genera imprecisiones por errores de pesada, características higroscópicas del reactivo, temperatura y tiempo de conservación, entre otras, que influyen en la estimación del contenido de O-acetilo de las muestras. En este trabajo se describe la preparación y caracterización de un Material de Referencia de Trabajo (MRT) de Acetil Colina, liofilizado, para ser empleado en los laboratorios del Instituto Finlay involucrados en el control de la calidad de los polisacáridos purificados de Neisseria meningitidis serogrupo C y Salmonella typhi. Para su caracterización se empleó como referencia el producto de SIGMA. Los parámetros evaluados fueron: linealidad (r2 ≥ 0,99), precisión intermedia (CV=2,63%), reproducibilidad (CV=2,73%), exactitud (recuperación: 96%) y estabilidad (10 meses hasta el momento actual). Los resultados obtenidos en la evaluación de este MRT demostraron que es adecuado para el ensayo. Esto ha sido corroborado durante más de 10 meses de uso en la rutina del laboratorio.
Keywords : Acetil colina; O-acetilo, polisacárido; Salmonella typhi; Neisseria meningitidis; material de referencia.