Abstract

PEREA, Yenitse; ARMAS, Anny; GONZALEZ, Yaimé J  and  LAZA, Celia M. Estabilidad de curvas estándar de transcritos del virus de la hepatitis C empleadas para la cuantificación viral. Biotecnol Apl [online]. 2009, vol.26, n.3, pp.222-225. ISSN 1027-2852.

La Organización Mundial de la Salud estima que la prevalencia del virus de la hepatitis C (VHC) es del 3%, lo que representa aproximadamente 170 millones de personas infectadas en el mundo. Para la confirmación del diagnóstico del VHC, es importante la detección del ácido ribonucleico (ARN) del virus en el suero o plasma humano, por métodos de amplificación de ácidos nucleicos. La determinación cuantitativa del ARN viral circulante permite predecir la respuesta al tratamiento y monitorear la terapia antiviral. El objetivo de este trabajo fue estudiar la estabilidad de curvas de cuantificación construidas a partir de un transcripto de VHC, como componentes de un ensayo de Reacción en cadena de la polimerasa con transcripción reversa (RT-PCR) competitivo utilizado para la cuantificación del ARN del VHC en muestras de suero o plasma humano. Se estudiaron las curvas hasta los 18 meses, y en cada tiempo se cuantificaron contra una curva preparada en el momento, utilizando un estándar de cuantificación interno diluido en un tampón de lisis. A partir de cada punto de la curva se extrajo el ARN y se amplificó mediante RT-PCR competitiva y detección fluorimétrica, con el empleo de sondas específicas para los amplicones del VHC y del estándar de cuantificación interno. Los resultados de este análisis mostraron que en cada punto de la curva, el ARN fue estable en todos los tiempos estudiados. Ello posibilita preparar curvas en el tampón de lisis que contiene el estándar de cuantificación interno, de manera que se puedan usar en ensayos de determinación de la carga viral del VHC.

Keywords : ARN; VHC; cuantificación.

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