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Biotecnología Aplicada
On-line version ISSN 1027-2852
Abstract
CUETARA, Elizabeth B et al. Colección de cepas de Salmonella typhimurium para la evaluación toxicológica y anti-genotoxicológica. Biotecnol Apl [online]. 2014, vol.31, n.4, pp. 278-284. ISSN 1027-2852.
La recombinación homóloga es un mecanismo de reparación del ADN que adicionalmente genera diversidad biológica. Casi todo nuestro conocimiento acerca de ella proviene de ensayos que emplean extremos de doble cadena como iniciadores de recombinación. En este trabajo se evaluó la recombinación homóloga en bacterias, mediante un ensayo de segregación de duplicaciones cromosomales que mide los intercambios entre cadenas de cromátidas hermanas sin favorecer ninguna ruta de reparación. Se construyó una colección de cepas de Salmonella enterica serovar typhimurium deficiente en genes que codifican proteínas involucradas en la recombinación homóloga. Se evaluó las tasas de segregación espontáneas (SSR) e inducidas por luz ultravioleta (UV-ISR). Se demostró que la ausencia de la resolvasa RuvC no afecta la SSR, mientras que los defectos en RecA, RecQ y RecB/RecF la disminuyen y la carencia de SbcCD o RuvAB la estimulan. En mutantes nulos para RecB, las lesiones que usualmente no son detectadas por el sistema RecFOR parecen ser reconocidas y reparadas por esta vía. La metodología usada permitió corroborar la existencia de una ruta independiente de RecA en Salmonella y sugiere la existencia de rutas alternativas de recombinación para el doble mutante recB/recF.
Keywords : recombinación homóloga; daño al ADN; luz ultravioleta; bacterias; Salmonella.