Abstract

PEREZ-HEREDIA, Carlos E et al. Diseño del proceso de purificación mediante cromatografía de afinidad de quelatos metálicos de un nuevo antígeno vacunal para el control del piojo de mar. Biotecnol Apl [online]. 2015, vol.32, n.1, pp.1211-1216. ISSN 1027-2852.

Este trabajo tuvo como objetivo el diseño de un proceso de purificación de la proteína MY32/Ls para obtener el Ingrediente Farmacéutico Activo (IFA) contra el piojo de mar, patógeno marino que afecta considerablemente la industria salmonera de Suramérica y Europa. El proceso se diseñó compacto, basado en el análisis de alternativas para establecer las etapas de ruptura, cromatografía y renaturalización. Por sus ventajas técnico-económicas previstas, se estableció un proceso de ruptura química con urea 8 mol/L durante 1 hora, con un 20 % de ahorro respecto a la ruptura mecánica con perlas de vidrio. Para el lavado y la elución de la proteína se evaluó el pH y el imidazol en la etapa cromatográfica. Se escogió el imidazol por las ventajas técnico-económicas brindadas, con costos de la variante seleccionada inferiores en un 12.33 % a los del lavado y elución por cambios de pH. En el escalado de la etapa cromatográfica se evaluó una variante económica con modificaciones en la concentración de urea en el lavado y elución, con costos reducidos en un 3.4 %, más atractiva por el manejo de volúmenes menores en la etapa de renaturalización. En esta última se seleccionó el Tween 80, lo cual posibilitó obtener la proteína en solución. El IFA obtenido indujo títulos de anticuerpos IgG en ratones C5Bl/6 mayores que los del patrón a escala de laboratorio, tres veces como promedio. Las especificaciones del IFA obtenido satisfacen los requerimientos para la formulación de una nueva vacuna contra el piojo de mar.

Keywords : purificación de proteína; vacuna contra el piojo de mar; antígeno MY32/Ls.

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